去内酯银杏叶粗提物提取黄酮工艺条件的优化

为了优化从去内酯银杏叶粗提物中提取黄酮的工艺,采用L(934)正交实验设计方法,对浸提和超临界CO2萃取—结晶工艺进行了优化试验研究。结果表明:浸提较优工艺为浸提温度55℃,浸提时间4.0h,浸提次数1次,液固比30∶1;超临界CO2萃取—结晶较优工艺为萃取—结晶压力15MPa,萃取—结晶温度45℃,萃取—结晶时间1.0h,夹带剂为甲醇。整个工艺简单可行,总黄酮的含量由22.40%提高到79.80%。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中银杏内酯B的含量

建立测定人血浆中银杏内酯B的含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆50μL,加入2.5mol/L盐酸溶液10μL酸化,再加入内标2μg/mL银杏内酯C20μL,以1mL乙醚萃取后,取提取液500μL挥干溶剂,然后用30%的乙腈500μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:色谱柱为ZorbaxC18柱(4.5*150mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;流速:0.6mL/min,柱温:35℃。质谱条件:ESI电离源;负离子模式;用于定量分析的离子对分别为m/z423.1→m/z367.2(银杏内酯B)和m/z439.1→383.2(内标:银杏内酯C)。该方法血浆中银杏内酯B的最低定量限为5ng,线性范围为5ng/mL~0.5μg/mL。本方法操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。     

银杏花粉萌发生长与分枝式花粉管形成的观察

本研究采用半薄切片法和扫描电镜等技术对银杏（Ginkgo bilobaL.）花粉管的体内萌发与生长以及花粉的离体培养进行了观察,结果表明：（1）银杏花粉粒通过传粉滴收缩后到达胚珠珠孔处,并经珠孔道进入贮粉室内停留,约7 d后花粉粒开始萌发;（2）贮粉室内的花粉最初萌发出的花粉管与花粉粒的四细胞轴几乎垂直,表现出明显的侧向萌发特征。初始花粉管在贮粉室内的生长方向无规律,有的通过一定的贮粉室空间向较远的珠心组织细胞间隙生长,有的直接进到较近的珠心组织细胞间隙,花粉管的生长不损伤珠心组织细胞;（3）花粉离体培养过程中会迅速发生水合作用,花粉粒由船形变为圆球形。48 h后花粉外壁脱落,管细胞膨大,花粉管自管细胞膨大处萌发。随着花粉管的生长,管细胞核移动进入花粉管内,而生殖细胞仍留在花粉粒内。伸长的花粉管可分为淀粉粒区和透明区,花粉管末端易形成多种类型的分枝。花粉管内原生质呈喷泉状流动。     

银杏核桃蛋白饮料开发工艺研究

通过试验,优选试验参数与试验方法.试验结果表明:按照白砂糖8%、SE15(蔗糖酯)0.1%、吐温600.15%、异抗坏血酸钠0.05%、乙基麦芽酚50mg/L、三聚磷酸钠0.03%、酪朊酸钠0.05%的配比关系制得的产品状态稳定均一,色泽乳白,口感香醇.     

银杏黄酮抑制脂质氧化的研究

为明确银杏黄酮的有效活性形态,为银杏黄酮作为天然抗氧化剂提供实验依据,本研究将苷元型和糖苷型银杏黄酮分别添加到大豆油和鼠脑组织匀浆中,考察它们对高温下大豆油氧化的抑制效果和对由FeCl_2-H_2O_2诱导产生的丙二醛(MDA)的抑制效果。结果表明,苷元型和糖苷型的黄酮均能有效地抑制脂质氧化,且在相同浓度下苷元型比糖苷型银杏黄酮有更强的抑制脂质氧化的能力(p0.05);作为天然的抗氧化剂,苷元型银杏黄酮有更好的抗氧化效果。     

银杏分级机的改进设计

通过对银杏分级方法的对比分析,设计了分级机总体结构,筛孔的形状、尺寸和布局,核算了分级机的动力需求和机械传动系统,并对银杏分级过程的物料流系统进行了研究,最后设计一个结构相对合理,易于制造的银杏分级设备。     

银杏叶愈伤组织培养及黄酮积累的正交实验优化

采用正交实验研究了基本培养基、NAA浓度、6-BA浓度、植酸(PA)浓度对银杏叶愈伤组织继代培养及黄酮积累的影响,并测定了愈伤组织生长曲线.结果表明,银杏叶愈伤组织继代培养的最佳组合为:基本培养基N6,NAA 1.0 mg·L-1,6-BA 1.0 mg·L-1,0.05% PA.各因素对愈伤组织生长影响的主次顺序为:NAA浓度＞基本培养基＞PA浓度＞6-BA浓度;愈伤组织黄酮积累量最佳组合为:基本培养基B5, NAA 1.0 mg·L-1 , 6-BA 1.0 mg·L-1 , 0.3% PA,各因素对愈伤组织黄酮积累量影响的主次顺序为:PA浓度＞基本培养基＞NAA浓度＞6-BA浓度.愈伤组织生长曲线基本呈"S"型.     

苯酚-硫酸法测定银杏外种皮多糖的含量

目的:建立分光光度法测定银杏外种皮多糖的方法.方法:采用苯酚-硫酸法对银杏外种皮多糖含量进行测定,在单因素实验结果的基础上,进行正交实验设计,考察苯酚用量、硫酸用量和显色温度对吸光度的影响.结果:硫酸用量是影响显色的重要因素.最佳条件为5%苯酚1.2 mL、硫酸4 mL、显色温度30℃和显色时间20 min,该方法平均回收率为99.60%,RSD=3.02%(n=5).结论:该法快速.重现性好,适用于银杏外种皮多糖的含量测定.     

甲醇-水流动相HPLC测定银杏萜内酯方法优化

优化了甲醇-水流动相HPLC测定银杏萜内酯的方法,建立了线性回归方程,并与药典正丙醇-四氢呋喃-水流动相方法进行比较。在此基础上,用两种方法对银杏叶、银杏外种皮、白果以及银杏叶提取物(EGB)样品中的萜内酯含量进行了对照分析。结果表明,甲醇-水梯度洗脱基线噪音小,柱效高,分离时间短。优化的洗脱条件为:甲醇-水为流动相,0～2 min,0～20%甲醇; 2～32 min,20%～60%甲醇,建立的方法在50～2 000 mg/L的浓度范围内具有良好的线性关系,检出限为0. 05～0. 09μg,不同浓度水平的加标回收率为92. 4%～101. 6%,相对标准偏差(RSD)值为2. 7%～5. 1%。两种方法测定银杏萜内酯没有明显差别,其中测定银杏叶中白果内酯、银杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B的相对误差分别为0. 86、4. 2、1. 7、3. 9。     

HPLC-ELSD法测定银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量

目的:建立HPLC-ELSD法测定银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量。方法:采用硅胶色谱柱(Platisil Silica,250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-冰醋酸(500∶10,三乙胺调节pH值至6.0),流速为1.0mL·min~(-1),柱温为40℃,检测器为蒸发光散射检测器。结果:溶血磷脂酰胆碱在38.4～480μg·mL~(-1)时,线性关系良好(r=0.9987),平均回收率(n=9)为102.13%,RSD为3.46%。结论:该方法准确,重现性好,可用于银杏内酯B脂微球中溶血磷脂酰胆碱的含量测定。