建立一种快速检测坂歧肠杆菌的方法

目的:建立快速检测婴儿配方奶制品(IFM)中坂歧肠杆菌的方法。方法:选择ATCC坂歧肠杆菌标准株,对不同的增菌性培养基、选择性培养基和显色培养基进行研究;结合VITEK仪和API20E细菌鉴定系统,构建快速检测配方奶制品中坂歧肠杆菌的方法。结果:建立的快速检测配方奶制品中坂歧肠杆菌的方法,所需检验流程为72h,方法灵敏度为2CUF/g,能有效区别于阴沟杆菌、产气杆菌等肠杆菌科细菌;方法应用稳定;操作简单、方法可靠,适宜规模化检测。结论:本研究认为,所建立的快速检测配方奶制品中坂歧肠杆菌的方法适宜检验检疫的工作要求,能有效地发现配方奶制品中坂歧肠杆菌的污染情况。     

奶粉中坂崎肠杆菌检测方法研究进展

坂崎肠杆菌为肠杆菌科肠杆菌属，奶粉（尤其是婴幼儿配方奶粉）中坂崎肠杆菌的污染可引发严重的公共卫生问题，其主要检测方法包括传统的细菌学培养方法及各种基于聚合酶链式反应（PcR）的分子生物学检测方法，改进的培养方法和快速特异的分子生物学方法已成为坂崎肠杆菌检测的重要发展方向。     

原儿茶醛对阪崎克罗诺肠杆菌的抑制作用及机理

本文通过检测原儿茶醛（PC）对阪崎克罗诺肠杆菌的最小抑菌浓度及对生长曲线的影响,分析其抑菌效果;利用场发射扫描电镜,观测PC对阪崎克罗诺肠杆菌细胞形态的影响;利用多种荧光探针检测PC对细菌细胞膜完整性、胞内pH、胞内ATP浓度、膜电位的作用,探明其可能的抑菌机理。结果表明：PC对阪崎肠杆菌的最小抑菌浓度为0.625~1.25 mg/mL,PC使细菌生长速率和最大菌体浓度显著减小。扫描电镜结果表明PC使菌体干瘪皱缩,丧失原本的棒状杆菌形态。同时,浓度为2MIC和4MIC的PC使细胞膜完整性分别降低49.0%和50.7%,使胞内pH由6.87降低为5.67和4.47,使胞内ATP浓度由1.824 μmol/L降低为0.01 μmol/L以下,并且使细菌细胞膜出现去极化。综上所述,PC对阪崎克罗诺肠杆菌有良好的抑制效果,其可能的抑菌机理是影响细胞膜的通透性,原儿茶醛有潜力作为天然抑菌剂在婴幼儿食品或其他食品中使用。     

奶粉中阪崎肠杆菌的污染及快速检测方法的研究

目的：了解福建省市售婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染状况、污染途径并寻找快速准确的检测方法。方法：应用分离鉴定、PCR 和荧光PCR 等方法检测,分离鉴定采用阪崎肠杆菌显色培养基和全自动微生物生化仪。结果：阪崎肠杆菌在192 份市售婴幼儿配方奶粉中的检出率为1.56%,在60 份原料奶粉中的检出率为13.33%,30 份生产车间环境样本均未检出。结论：福建省市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌的安全隐患,某工厂奶粉中阪崎肠杆菌的污染主要来自原料奶粉。荧光PCR 和显色培养基可用于阪崎肠杆菌的快速筛选和分离。     

LAMP法在阪崎肠杆菌快速检测中的应用

针对阪崎肠杆菌的ompA基因设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立一种快速检测阪崎肠杆菌的DNA环介导恒温扩增法(LAMP)。通过对2株阪崎肠杆菌标准菌株、24株阪崎肠杆菌分离株和18株非阪崎肠杆菌测试,结果表明此方法具有很高的特异性;对其灵敏度进行检验,发现该方法的最低检测限可以达到8CFU/mL,具有较好的敏感性。在1份实验室能力验证盲样和26份实际奶粉样品中应用发现,该方法与传统生化方法结果吻合,具有较好的可靠性。     

阴沟肠杆菌对石油烃污染物的降解特性

考察了阴沟肠杆菌E．cloacae对石油烃代表物十六烷及菲的降解特性,分析了菌在各碳源中的生长动力学曲线及各碳源的降解动力学曲线。结果表明E.cloacae在十六烷、菲、十六烷和菲的混合物这三种碳源中都能较好地生长,生长速率较高,生长过程中都有二次生长现象;E．cloacae对葡萄糖、十六烷、菲、以及十六烷和菲混合物中所含菲在1天内平均降解速率大小关系为十六烷〉葡萄糖〉菲（十六烷与菲混合）〉菲,E．cloacae对十六烷具有很强的降解能力,1天内其对十六烷的平均降解速率是其对葡萄糖的2．4倍,是对单独菲及混合菲的6200倍。最终结果表明E．cloacae是一种高效的石油烃降解菌。     

阪崎肠杆菌3种检测方法的应用与分析

分别采用美国FDA、ISO/TS 22964-2006和GB4789-2010阪崎肠杆菌检测方法,同时采用缓冲液蛋白胨水(BPW)作为前增菌液,对FAPAS(Food Analysis Performance Assessment Scheme)提供婴幼儿配方奶粉进行阪崎肠杆菌定性检测,同时应用VITEK2生化鉴定和16SrDNA序列分析技术对分离的可疑菌落进行确认。结果表明:mLST-Vm选择性增菌肉汤和DFI显色平板可以提高工作效率和阳性检出率,可疑菌落易于识别,VITEK2(全自动微生物生化鉴定系统)和16SrDNA测序技术应用可以实现阪崎肠杆菌高效、快捷的检测。     

蓝光对阪崎肠杆菌的杀菌及机制研究

本文以食源性致病菌阪崎肠杆菌为对象,研究了医学领域抗细菌感染蓝光的杀菌作用,并首次对其杀菌机制进行了探究。结果表明,当蓝光剂量大于30 J/cm~2时,对阪崎肠杆菌具有显著杀菌作用,照射剂量达240 J/cm~2时,杀菌率超过8 log 10 CFU。亚致死剂量(0～30 J/cm~2)蓝光照射下,单线态氧(~1O_2)探针SOSG开始出现绿色荧光信号,显示细胞内1O2涌现并造成细胞外壁微小孔洞;活性氧物质(ROS)也迅速产生并逐渐增大至5 a.u.;随后脂质氧化标志物丙二醛(MDA)逐渐增加,显示细胞内产生脂质氧化。上述胞内物质变化导致细胞外膜受损,30 J/cm~2蓝光下细胞外膜渗透性增加了48.96%;此外脂肪酰基谱测定揭示,不饱和脂肪酸C18:2,C16:1和C18:1含量减少并逐渐消失,很可能是细胞外膜损伤的重要原因之一。本研究确证了蓝光下细菌胞内~1O_2、ROS及脂质氧化物的动态变化,更重要是的,揭示了细胞外膜损伤是蓝光杀菌的重要方式之一,因为细菌脂质尤其是不饱和脂肪酸是蓝光杀菌重要靶标,本研究将有助于蓝光杀菌机制的深入探究。     

阪崎肠杆菌测试片快速准确保障乳品安全

阪崎肠杆菌是乳制品中新发现的一种病原菌．已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌。从2005年开始我国陆续出台了阪崎肠杆菌检测的行业标准和国家标准。虽然标准规定的检测方法准确性和灵敏度较高，但存在操作繁琐、时间长等缺陷，为了寻求更简便、快速的检测方法．本公司将选择性显色培养基结合吸水凝胶和各种载体做成一次性的测试片．     

基于电沉积石墨烯阪崎肠杆菌免疫传感器研究

为研制一种新型免疫传感器并用于快速检测阪崎肠杆菌(E.sakazakii),采用自组装方法将辣根过氧化物酶标记的阪崎肠杆菌抗体(HRP-anti-E.sakazakii)固定于修饰有电沉积石墨烯(ERGO)的丝网印刷碳电极上,制得一次性酶免疫传感器。采用循环伏安法(CV)考察不同修饰电极的电化学特性,根据CV还原峰电流值的变化对E.sakazakii进行快速检测。在优化的检测条件下,该方法检测E.sakazakii的线性范围为102～109cfu/mL,检测限为9.1×101cfu/mL(S/N=3)。该酶免疫传感器灵敏度高,并具有良好的特异性、重现性(RSD=6.4%)、稳定性(4℃无菌容器中放置15d后电流响应为初始值的90.05%),具有一定潜在应用价值。