酶联免疫吸附法直接测定乳制品中雌二醇残留

建立了测定乳制品中雌二醇残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,其重现性好、特异性强,测定线性范围0.01mg/L～1000.0mg/L,最低检出浓度为9.714mg/L,乳制品的加标实验回收率为87.2%～120.8%。     

加味左归丸联合激素替代疗法治疗卵巢早衰临床研究

目的:观察加味左归丸联合激素替代疗法治卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)的临床疗效。方法:将96例POF患者随机分为对照组47例和观察组49例。对照组采用戊酸雌二醇片/雌二醇环丙孕酮片(克龄蒙)治疗,每日1片,无间断的服用21 d。撤退性出血5 d,第5天后重复使用此法,连续使用6个月经周期。观察组在对照组治疗的基础上加用加味左归丸(熟地黄20 g,山药15 g,枸杞子15 g,山萸肉10 g,菟丝子10 g,鹿胶10 g,龟胶10 g,党参20 g,女贞子20 g,墨旱莲20 g,川牛膝10 g,当归10 g,香附10 g,鸡血藤20 g,郁金10 g)治疗。共治疗6个月经周期。记录主要症状评分,检测两组治疗前后卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体素(luteotropic hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)水平,临床疗效和不良反应。结果:观察组有效率为91.84%,对照组有效率为74.47%,观察组高于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.210,P<0.05);治疗后两组症状积分逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.01),观察组在治疗后第3个月、第6个月经周期症状积分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后两组血清FSH和LH水平均较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),观察组下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.01);治疗后两组E2水平较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),治疗后观察组E2水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);两组患者均无严重不良事件发生。对照组不良反应累积发生率为29.79%,高于观察组的10.20%,差异有统计学意义(χ2=5.795,P<0.05)。结论:加味左归丸联合激素替代疗法在改善POF围绝经期症状、纠正性激素的紊乱、促进卵巢功能恢复方面有较好临床疗效,且无严重不良事件发生。     

~(60)Coγ射线和雌性激素对大鼠的远后效应

本文目的在于观察雌性激素是否具有致癌作用以及与γ射线全身照射结合使用是否具有加重致癌作用。 用子宫次全切除的雌性Wistar大鼠,分4组。第1组动物全身γ射线照射300rad,照后1天开始肌肉注射戊酸雌二醇(E)10mg/kg体重和己酸孕酮(P)1250mg/kg体重,以后每2周注射1次,共注射24次;第2组单纯γ射线照射;第3组单纯EP注射;第4组对照。每组动物40～46只。 1～4组动物肿瘤发生率依次为61.5、90.9、30.8和10.3％。前3组肿瘤发生率明显高于对照组(p<0.05或<0. 01)。第1、2组动物肿瘤虽然均主要来自脑垂体和乳腺,但肿瘤类型不同,第2组主要为良性乳腺纤维腺癌,恶性与良性肿瘤之比为0.5:1;而第1组乳腺肿瘤主要为恶性,其比值为5.5:1,此外,脑垂体肿瘤发生率比第2组或第3组的高,依次为46.2、6.1和26.9％。除肿瘤外,在第1、3两组动物有较多子宫积脓,其发生率分别达78.6和81.4％。     

植物雌激素的研究进展

植物雌激素具有广泛的健康效应。本文就植物雌激素的化学特性、代谢分布及作用机制进行了简述。     

雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立

目的 建立一种牛奶中雌二醇(17β-estradiol, E2)胶体金(colloidal gold, CG)试纸条快速检测方法。方法 从E2的3号位羟基和17号位羟基引入活性基团制备半抗原H1和H2, 偶联载体蛋白制备完全抗原, 经过动物免疫和细胞融合筛选, 制备单克隆抗体, 采用间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay, icELISA)对单克隆抗体性能进行评估, 筛选出灵敏度最高的单克隆抗体, 最后采用静电吸附法将胶体金标记抗体为探针, 构建牛奶中E2的胶体金试纸条检测方法。结果 制备了H1-7B7、H1-9C7、H2-4A10、H2-2E2 4种单克隆抗体, 经过评估, 选取H1-9C7和H2-OVA作为最优抗体及抗原, 建立的胶体金试纸条消线(cut-off)值为6.00 ng/mL, 半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)为1.54 ng/mL, 与苯甲酸雌二醇和雌三醇的交叉反应率分别为101.31%和2.43%。结论 本研究建立的试纸条具有操作简单、灵敏度高等特点, 能够基本满足牛奶中E2快速检测要求。     

稀有(鲍)鲫卵黄蛋白原电泳表征

鱼类卵黄蛋白原是检测环境内分泌干扰化合物雌激素效应的敏感生物标志物。稀有鮈鲫是我国目前最具发展潜力的用于生态毒理学研究的实验室模型物种。本文采用强效人工合成的雌激素乙炔基雌二醇对成熟雄性稀有鮈鲫和未成年稀有鮈鲫进行诱导,然后用十二烷基磺酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳对血清中的蛋白进行了表征,发现雌激素诱导的特异性蛋白由两个亚单位组成,分子量分别为170和147kDa,该蛋白与成熟雌鱼所具有的特异性蛋白完全一致,而且分子量在其它硬骨鱼类卵黄蛋白原分子量范围之内,确定该蛋白为稀有鮈鲫的卵黄蛋白原。     

基于表面等离子共振的全自动浓度检测系统

研制了以SpreetaTM传感器为核心,结合液体处理系统、信号检测与控制器、计算机分析处理软件等模块的小型表面等离子共振（SPR）检测系统.运用该系统,通过在传感器表面偶联牛血清蛋白（BSA）,采用直接检测法测量了不同浓度的BSA抗体溶液,得到了BSA抗体溶液的SPR传感图,建立了BSA抗体的浓度标准曲线.在传感器表面固定雌二醇（E2）,采用间接检测法测量了不同浓度的E2溶液,根据E2溶液SPR响应信号的变化量,建立了E2的浓度标准曲线.实验中系统的分辨率为10-5折射率单位（RIU）.对于实际的待测样品,只要测得其SPR信号的变化量,结合标准曲线就能够得出样品的浓度.     

好氧/厌氧污泥对17β-雌二醇的降解特性

采用好氧、厌氧交替运行的污水处理厂的活性污泥处理内分泌干扰物17β-雌二醇（E2）,分别考察了好氧和厌氧条件下,污泥对E2及其降解中间产物——雌酮（E1）的去除效果,同时考察了污泥混合液中碳源和氮源对E2降解的影响。结果表明,在好氧条件下,活性污泥对E2、E1均有很好的降解效果,E2的未检出时间均在70 min左右,E1的未检出时间均在110 min左右,添加碳源和氮源对E2的降解速率无显著影响。厌氧污泥对E2和E1的降解速率远小于好氧活性污泥的,添加碳源对E2、E1的降解有一定的抑制作用,而添加氮源可以促进对E1的降解,但对E2降解的影响较小。好氧条件下活性污泥对E2的降解符合一级反应动力学方程;厌氧条件下,特别是有NO3^--N存在的条件下,污泥对E2的降解不符合一级反应动力学。     

雌二醇对大鼠颈动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖和内皮功能的影响

目的 研究雌二醇对血管内皮损伤后血管壁细胞增生和内皮功能恢复的作用。方法 应用球囊导管剥脱大鼠的左颈总动脉,于术前六天和术后两周给予17-β雌二醇,通过形态学分析和免疫组化测定血管内膜增生和血管平滑肌细胞增殖程度,并测定乙酰胆碱诱导的内皮依赖性血管舒张反应。结果 17-β雌二醇显著抑制血管内皮损伤后平滑肌细胞增殖和减少新生内膜面积。内皮损伤后乙酰胆碱诱导的血管舒张反应显著降低,最大为12%±6%;雌二醇能使其显著改善,最大舒张反应为48%±9%(P<0.05)。结论 雌二醇显著抑制血管内皮损伤后平滑肌细胞增殖和促进内皮功能的恢复。