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该研究以黑曲霉为底盘细胞,首先敲除N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)摄取相关转运蛋白ngtA编码基因,获得GlcNAc的吸收利用缺陷型菌株,有利于胞外GlcNAc的积累。在此基础上,通过表达大肠杆菌来源的卤酸脱卤酶样磷酸酶编码基因yqaB,构建黑曲霉GlcNAc的完整合成途径,实现GlcNAc的合成,产量为1.78 g/L。通过共过表达氨基葡萄糖-6-磷酸乙酰转移酶基因gnaA和氨基葡萄糖-6-磷酸合成酶基因gfaA强化GlcNAc合成途径,GlcNAc的合成水平提升至3.64 g/L。为增加GlcNAc合成前体GlcNAc6P的胞内供给,利用RNA干扰技术对乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸(GlcNAc6P)分解代谢途径中氨基葡萄糖-6-磷酸脱氨基酶基因nagB和乙酰氨基葡萄糖-6-磷酸脱乙酰酶基因nagA基因表达进行弱化表达,GlcNAc产量进一步提高至4.03 g/L。为减弱黑曲霉糖酵解途径与GlcNAc合成途径竞争共同前体物质果糖-6-磷酸,对磷酸果糖激酶基因pfkA进行弱化表达,GlcNAc的最终产量为4.61 g/L。 相似文献
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离子交换树脂萃取发酵法生产柠檬酸的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文提出了一种利用离子交换树脂萃取发酵法生产柠檬酸的新方法。该方法将离子交换树脂填充柱与发酵反应器相连接,发酵一定时间后,发酵液流经离子交换柱,分离出产物柠檬酸,再返回发酵反应器循环使用。与传统的发酵方法相比,萃取发酵使发酵周期由9天缩短到6天,糖转化率由原来的88.4%提高到96.6%,柠檬酸生产速率由0.447g/I·h提高到0.753g/l·h。 相似文献
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冷冻聚丙烯酰胺法固定化黑曲霉生产柠檬酸的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文建立了冷冻聚丙烯酰胺包埋固定化微生物的方法,并用于固定化黑曲霉生产柠檬酸,与常规方法进行了比较。优化了固定化细胞生产柠檬酸的条件:蔗糖浓度100~140g/L,NH4Cl3.0~4.0g/L初始pH3.0,培养温度30℃。固定化细胞在半连续发酵中重复使用5批次,在连续发酵中使用300h,其余酸活性没有明显下降。 相似文献
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本文研究了柠檬酸发酵过程动力学,建立了固定化黑曲霉生产柠檬酸的动力学模型,用最优化梯度法估算了模型参数,仿真运算结果表明所建立的数字模型能较好地描述实际发酵过程。 相似文献
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黑曲霉产菊粉酶的条件及其酶学性质的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对黑曲霉SL-09在摇瓶条件下产菊粉酶的奈件及其酶学性质进行了研究。结果发现,接种量和装瓶量对产酶影响不大,而pH值影响较为显著,最佳产酶pH值为6.0;在对催化条件的研究中发现最佳反应温度、底物浓度和pH值分别为60℃、60g/L和6.0;锰离子对酶活有较强的激活作用,最适浓度为1.5×10mol/L;同时发现该酶存在着严重的产物抑制现象,当果糖浓度大于1%时,菊粉酶活力将大幅度下降。 相似文献
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