碱性蛋白酶助浸水的研究

本研究将碱性蛋白酶应用于生产黄牛软鞋面革的浸水工序，并将其与常规工艺进行了对比。通过对坯革进行物理机械性能检测和感观评定，确定利用碱性蛋白酶作为生产黄牛软鞋面革的浸水助剂，不仅可以缩短浸水时间还可以减少黄牛皮颈部皱纹，提高得革率，使坯革粒面细致，革身丰满、柔软。     

响应面法优化碱性蛋白酶酶解酱渣的条件

为了更好的利用酱渣中残留的蛋白质物质,设计利用碱性蛋白酶酶解酱渣.利用响应面分析法(RSM)优化碱性蛋白酶酶解酱渣的条件参数.在pH、温度、料水比、酶加量、酶解时间单因素试验的基础上,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计,选择影响较大的三个因素开展响应面分析.通过Design-Export软件分析得到回归模型并进行方差分析,得到最优工艺参数是:酶解pH 10.03,温度47.20℃,料水比1:3.39,酶加量200 U/g.在优化工艺参数条件下测得的蛋白水解度为4.45％,与理论预测值相对误差仅0.45％,说明回归方程与实际情况拟合较好.最优酶解条件的蛋白水解度较对照(2.86％)提高了55.59％.     

内源酶在鱼肉和猪肉热胶凝过程中作用的比较研究

以鲢鱼和猪背肌肉为原料,采用质构仪、SDS-PAGE和溶解率测定等仪器和方法比较研究了内源性转谷氨酰胺酶(TGase)、蛋白酶在两种肉糜热胶凝过程中的作用。结果表明,鱼肉TGase于40℃催化蛋白质形成的非二硫共价键促使了其凝胶化,导致鱼糜凝胶劣化的主要是半胱氨酸蛋白酶。猪肉TGase在40℃下活性较低,或该温度下猪肉蛋白质分子链伸展程度偏低不适于被TGase交联;猪肉蛋白酶在60℃也会导致蛋白质的降解,然而该温度下形成的二硫键和疏水相互作用强于水解作用,故猪肉糜未表现出低温(40℃)凝胶化和60℃的凝胶劣化现象。两段加热显著提高了鱼肉糜凝胶的硬度和咀嚼性,而对猪肉糜凝胶性能的影响较小。     

大豆蛋白酶产生菌的诱变选育及酶学性质研究

从市场下水道中筛选获得一株产大豆蛋白酶的细菌D-16,经初步鉴定属于芽孢杆菌属(Bacillus),该菌的蛋白酶活力为1 164.00 U/mL.通过对初筛菌株进行紫外诱变和HNO2化学诱变,结合筛选,最后得到突变菌株D-16-9,其酶活为6518.40U/mL,酶活力提高了5.60倍,水解大豆蛋白的能力也提高了4.12倍.该酶作用的最适pH为10.5,pH7.0～12.0的范围内较稳定.最适温度为40℃,在60℃以下范围内,该酶具有良好的稳定性.Mg2+酶促反应有明显的促进作用,pb2+和EDTA明显抑制酶活力.     

Actinomucor elegans、Aspegillus oryzae和Rhizopus oligosporus产蛋白酶条件及蛋白酶性质的比较

比较了腐乳生产菌株Actinomucor elegans、豆酱和酱油生产菌株Aspegillus oryzae以及天培生产菌株Rhizopus oligosporus产生蛋白酶的条件和所产蛋白酶的性质。结果表明,不同的菌株产酶条件及蛋白酶的性质有较大的差异:少孢根霉主要产生酸性蛋白酶,在pH2.5-4.0的酸性介质中、32℃条件下培养时产酶能力较强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0时酶活力最高,在pH5.0附近最稳定;米曲霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,所产生的蛋白酶活力显著高于少孢根霉和毛霉,米曲霉在酸性条件下产酸性蛋白酶能力强,在中性条件下产中性蛋白酶能力强,在碱性条件下产碱性蛋白酶能力强,在28-32℃时产酶能力强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛范围内有很强的活力,在pH6.0-8.0的范围内稳定性强;毛霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,但酶活力明显低于米曲霉,毛霉在中性偏酸性(pH5.5)的介质中产酸性蛋白酶的能力较强,但介质的酸碱度对毛霉产中性及碱性蛋白酶没有影响,在28℃时产酸性、中性和碱性蛋白酶的能力都比较强,毛霉所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛pH范围内有活力,在pH5.0-6.0时酶活力最高,在pH5.0-7.0时稳定强。     

中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4产酶条件及部分酶学性质

采用稀释平板分离法从土壤中分离到一株产中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4．通过单因素碳、氮源以及正交试验确定了最佳产酶培养基配方，同时还研究了起始pH值、金属离子、接种量对产酶的影响以及温度、pH值、金属离子以及表面活性剂对酶稳定性的影响；以最佳培养基为发酵培养基，于37℃、160r／min振荡培养48h，酶活达2519．35U／mL；该酶最适作用温度为55℃，最适作用PH值为7．5，在pH7．5缓冲体系中，55℃反应60min后仍有50％的酶活力，Ca^2＋和表面活性剂对酶有一定的激活作用，但激活作用不明显。     

Peptidyl Succinimidyl Peptides as Taspase 1 Inhibitors

Taspase 1 is an N‐terminal threonine protease implicated in leukemia and other cancers. Despite intensive efforts in recent years, only a limited number of Taspase 1 inhibitors are currently available, and they lack general applicability. Here we present a novel class of Taspase 1 inhibitors based on a peptidyl succinimidyl peptide motif. These inhibitors were obtained from the substrate cleavage sequence and mechanistic considerations involving the previously proposed asparaginase‐type cleavage mechanism. We anticipate that this class of Taspase 1 inhibitor will find wide application in further biochemical and structural studies, for example for better investigating the molecular details of the unusual enzymatic cleavage mechanism of Taspase 1.     

Computational Study on Substrate Specificity of a Novel Cysteine Protease 1 Precursor from Zea mays

Cysteine protease 1 precursor from Zea mays (zmCP1) is classified as a member of the C1A family of peptidases (papain-like cysteine protease) in MEROPS (the Peptidase Database). The 3D structure and substrate specificity of the zmCP1 is still unknown. This study is the first one to build the 3D structure of zmCP1 by computer-assisted homology modeling. In order to determine the substrate specificity of zmCP1, docking study is used for rapid and convenient analysis of large populations of ligand–enzyme complexes. Docking results show that zmCP1 has preference for P1 position and P2 position for Arg and a large hydrophobic residue (such as Phe). Gly147, Gly191, Cys189, and Asp190 are predicted to function as active residues at the S1 subsite, and the S2 subsite contains Leu283, Leu193, Ala259, Met194, and Ala286. SIFt results indicate that Gly144, Arg268, Trp308, and Ser311 play important roles in substrate binding. Then Molecular Mechanics-Poisson-Boltzmann Surface Area (MM-PBSA) method was used to explain the substrate specificity for P1 position of zmCp1. This study provides insights into the molecular basis of zmCP1 activity and substrate specificity.     

酒用酸性蛋白酶在酒精发酵中的应用

探讨酒用酸性蛋白酶在酒精发酵中的应用。实验室结果表明：在发酵开始时加入酒用酸性蛋白酶，添加量为每克原料15个单位，作用pH3．0--6．0，发酵温度为30--38℃，淀粉出酒率可提高1．6个百分点，发酵周期可提访约4h。     

脱脂豆粕酶法制备大豆肽

采用单因素实验研究了超声处理对脱脂豆粕蛋白质浸提率的影响,结果表明,容器式超声仪(300 W)浸提蛋白的最佳工艺为:频率30 kHz、料液比(质量体积比)为5%、在pH值8.5下处理20 min,此时上清液中蛋白质浓度增加58.68%.比较了五种蛋白酶对脱脂豆粕的水解效果,筛选出水解能力最强的碱性蛋白酶, 用正交实验法确定了其水解脱脂豆粕的最佳条件为:底物质量分数5%、酶用量10 000 U/g底物、温度55℃、pH值8.5、反应时间4 h,此时大豆肽溶出率为59.34%.