响应面法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺

采用响应面分析法优化菌草灵芝多肽-硒螯合物的制备工艺,以螯合物中硒含量为指标,考察亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比、反应温度、反应时间和pH值对螯合反应的影响,同时建立螯合物制备工艺的二次项数学模型并验证其可靠性,并利用红外光谱法对菌草灵芝多肽-硒螯合物进行表征。结果表明:影响菌草灵芝多肽与硒离子螯合的因素主次顺序为pH值反应温度体积比反应时间,最佳的螯合工艺条件为反应时间60 min、反应温度75℃、pH 9、亚硒酸钠溶液与多肽溶液体积比1∶2,最佳制备工艺条件下,螯合物中硒含量为(2 985.89±10.59)μg/g。采用红外光谱法对螯合物进行表征,表明所得物质为菌草灵芝多肽与硒的螯合物。本研究为合成有机硒化合物提供了一种新的原料,也为菌草灵芝的开发利用提供了一个新的思路。     

灵芝固体发酵龙眼核提取物的主要活性成分及其抗氧化性

为更好的利用龙眼核,使用灵芝对含有不同重量龙眼核的固体基质进行发酵,用60%乙醇提取灵芝发酵后和未发酵基质中的活性成分,并检测了提取物中的多酚类、黄酮类、糖和三萜类物质的含量及其抗氧化活性。结果表明:龙眼核经过灵芝真菌固体发酵后,多酚类和黄酮类含量显著性降低(p<0.05),糖类显著性增加(p<0.05)。发酵龙眼核提取物总抗氧化活性、总还原力、Fe³⁺还原能力、清除DPPH自由基和ABTS自由基能力均比未发酵提取物降低,但仍然具有一定抗氧化活性。结论:灵芝固体发酵龙眼核产生的菌质物质可以开发为食用或饲用资源。     

黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响

目的：探究黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响。方法：腹腔注射环磷酰胺构建免疫抑制小鼠模型,将小鼠分为6 组：正常对照组、模型组、阳性对照组以及黑灵芝多糖低、中、高剂量（25、50、100 mg/（kg·d））组,灌胃期间每天记录小鼠体质量并观察其生活状态,空肠组织进行切片病理学观察,酶联免疫吸附实验测定肠道白细胞介素（interlrukin,IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的含量,反转录定量聚合酶链式反应分析T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平。结果：与模型组相比,低、中、高剂量黑灵芝多糖有助于体质量回升,改善肠道黏膜形态结构,提高IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ细胞因子含量,增强T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平,使Th1/Th2平衡向Th1偏移。结论：黑灵芝多糖可改善免疫抑制小鼠的肠道黏膜形态,调节免疫抑制小鼠的肠道黏膜免疫。     

微波-超声协同辅助提取灵芝多糖工艺

分析不品种和来源的5 种灵芝的主要成分,确定浙江赤灵芝作为提取灵芝多糖的较佳原料。采用响应面优化超声- 微波协同萃取法提取灵芝多糖的最佳工艺条件,分析超声- 微波协同萃取法对灵芝纤维结构的影响,比较传统水浴浸提法和超声- 微波协同萃取法对灵芝多糖提取率和结构的影响。结果表明：超声- 微波协同萃取最佳的提取工艺条件为原料用量100g,微波功率284W,提取时间12min,料液比(g/mL)1:11.6;与传统水浴浸提法相比,超声- 微波协同萃取法在较短的超声提取时间下,灵芝多糖的提取率从1.517% 提高到了3.27%。     

硒和铈对灵芝多糖和灵芝酸含量的影响

目的:考察在培养液中添加硒和铈对灵芝多糖和灵芝酸含量的影响。方法:向培养液中分别添加不同质量浓度的亚硒酸钠或硝酸铈铵,用液体浅层静置培养法培养灵芝菌丝体,用苯酚-硫酸法测定菌丝体和菌液中的多糖,用冰醋酸-香草醛法测定菌丝体中的灵芝酸。结果:添加40mg/L亚硒酸钠培养的灵芝菌丝体,多糖含量比对照提高42.3%,灵芝酸含量比对照提高10.6%;添加15mg/L硝酸铈铵培养的灵芝菌丝体,多糖含量比对照提高51.1%,灵芝酸含量则有所降低;两种元素还可明显提高菌液中灵芝多糖的含量。结论:向培养液中适量添加硒或铈,可显著提高灵芝菌丝体和菌液中的多糖含量,硒还可同时提高菌丝体的灵芝酸含量,铈则降低灵芝酸含量。生产中可根据实际需要添加硒或铈,以获得品质优良的灵芝菌丝体和菌液。     

利用生化方法鉴定灵芝原生质体融合子的研究

以美大灵芝和信州灵芝为出发菌株,采用化学融合法将两种灵芝原生质体进行融合,利用生化方法进行检测。结果表明:融合子胞外多糖含量与美大和信芝两亲本相比分别增加了332.80%和22.86%,胞内三萜含量与美大和信芝相比分别增加了36.21%和113.16%,胞外三萜含量与美大和信芝相比分别增加了23.17%和46.31%;采用琼脂糖凝胶电泳实验对融合子及亲本DNA进行检测,融合子DNA移动速度比亲本慢,说明融合子分子量大于两亲本,两亲本遗传物质发生重组。     

水-酶联合法制备灵芝多糖及其抗氧化活性研究

本研究以冠县灵芝作为实验材料,探讨采用水-酶联合法制备灵芝多糖,并与传统水提法进行比较。水-酶联合法,即水提加酶法依次提取,且均用响应面法对其条件进行优化。结果表明,水提最佳条件为：液料比30:1(mL/g),温度97 ℃,时间2.5 h;酶法最佳条件：酶底比1566.82:1(U/g),温度46.63 ℃,时间1.78 h。最优条件下,水酶提取的灵芝多糖GLP-W-E得率为1.66%,比传统水提灵芝多糖GLP(两次水提的提取得率为1.45%)提高了14.48%。FT-IR表明,GLP和GLP-W-E均为吡喃环酸性多糖。高效阴离子结果表明,GLP和GLP-W-E单糖组成相似(均由由Fuc、GlcN、Gal、Glc、Xyl、Man、GluA七种单糖),但其摩尔比有明显不同。二者的抗氧化活性也有明显不同,GLP-W-E与GLP相比有明显提高,尤其是GLP-W-E的ABTS₊^清除率比GLP提高了52.09%。因此,水-酶联合法制备的灵芝多糖提取得率更高,活性更强,为合理发和利用冠县灵芝资源提供科学依据。     

紫外和超高压诱导漆酶产生菌变异的对比研究

分别利用紫外线和超高压诱变漆酶产生菌灵芝(Ganoderma.lucidum Karst),发现超高压的诱变幅度较大.经初步筛选和发酵,获得了2株具有较大应用潜力的漆酶超高压突变株G1502和G2001,前者漆酶活力比出发菌株提高了2.83倍,发酵时间缩短了1 d;后者漆酶活力提高了0.89倍,发酵时间缩短了3 d.     

三七渣固态发酵生产灵芝菌质的工艺优化

研究了三七渣固态发酵生产灵芝菌质的工艺条件。在单因素实验的基础上,以接种量、发酵温度、发酵时间为影响因子,生物量为响应值,采用响应面分析法优化发酵工艺条件。结果表明,接种量、发酵时间对发酵结果的影响极显著(P<0.01),发酵温度对发酵结果的影响显著(P<0.05),接种量和发酵时间、发酵温度和发酵时间之间的交互作用极显著(P<0.01);优化的发酵工艺条件为:接种量15.2%,发酵温度28.4℃,发酵时间14 d,在此条件下,每克灵芝菌质中生物量的预测值和验证实验值分别为0.4327和0.4205 g,二者相对误差为2.82%。固态发酵三七渣生产灵芝菌质为三七渣的资源化利用提供了一条新途径,响应面分析法用于发酵工艺条件的优化准确性高、误差小。     

灵芝菌生物发酵北五味子果汁降酸工艺优化及其护肝作用

本文以灵芝菌为发酵菌种,以果汁pH的变化为主要考察指标,通过单因素实验和正交设计确定北五味子果汁生物降酸的最佳发酵工艺,进而通过测定大鼠酒精肝损伤模型中血清和肝脏组织丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)的活力探究其保肝作用。结果表明,生物降酸的最佳工艺为:一定量的北五味子果汁冻干粉末,加入20倍体积(V/W)的蒸馏水,接种菌龄3 d,接种量6%(V:V),维生素B₁浓度10 mg/L,振荡速度190 r/min,发酵时间12 d;发酵后的北五味子果汁pH从1.85升到3.21,滴定酸度从14.9 g/L降到6.9 g/L,果汁中多糖的含量增加了约61.5%,多酚和黄酮的含量分别减少了约64.2%和50.6%。这几种成分的含量变化,可能是果汁生物降酸的主要原因。北五味子果汁经过发酵之后其保肝护肝活性要优于原果汁,因此具有良好的健康饮品开发潜力。