应用间接ELISA技术快速检测花鲈病原菌-鳗弧菌

以花鲈（Lateolabrax japonicus)弧菌病的病原菌－鳗弧菌（Vibrio auguillarum)W-1为抗原,制备兔抗血清;利用辣根过氧化酶标记的羊抗兔血清（HRP－IgG)为酶标二抗,建立了检测鳗弧菌的间接ELISA快速检测法。结果表明,应用间接ELISA技术检测鳗弧菌有较高的灵敏度,最低的检测量为10^5个／ml,即10^4个／孔。同时交叉反应表明其具有较高的特异性。对46份人工感染后的花鲈组织样品,包括肌肉、鳃、肠、肝、肾等组织的检测表明,阳性检测率为76．1％。     

氨基脲胁迫下刺参的组织学和酶学反应

根据急性毒性试验,推导了氨基脲在刺参中的半数致死浓度值(LC_(50)),96hLC_(50)为3.72 g/L(以盐酸氨基脲计),95%置信区间为3.43 g/L～4.02 g/L。氨基脲能对刺参呼吸树、肠道和肌肉的组织结构产生一定影响。在1/5 LC_(50)组,呼吸树病变严重,肠道组织基本解体,平滑肌病变紊乱;在1/25 LC_(50)组和1/50 LC_(50)组,呼吸树、肠道和肌肉组织均呈现病变缓慢且逐步积累的现象。刺参对氨基脲的毒性作用表现为毒物兴奋效应,抗氧化酶和神经传导关键酶活性均显示先升高后降低的趋势,即先诱导后抑制,1/5 LC_(50)组刺参中毒反应最为明显。1/25 LC_(50)组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及乙酰胆碱酯酶(ACh E)酶活性最高,其次是1/5 LC_(50)组和1/50 LC_(50)组。中浓度1/25 LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大SOD活性值分别是对照组的1.78倍、1.67倍和2.50倍。中浓度1/25LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大CAT活性是对照组的1.87倍、1.96倍和2.04倍。中浓度1/25 LC_(50)组呼吸树、肠道和肌肉最大ACh E是对照组的7.86倍、6.24倍和2.86倍。最终均趋于对照组水平,推测可能与刺参免疫疲劳有关。     

水解牡蛎粉基本成分分析及其辅助降血糖功能的评价

本论文从刺参中分离纯化得到一种海参肽,并研究其对NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌的影响。采用活性追踪的方法从新鲜刺参中通过离子交换层析、凝胶层析分离纯化得到海参肽SP12,采用MTT法检测SP12对NIH/3T3细胞的增殖作用;采用流式细胞术检测SP12对NIH/3T3细胞细胞周期的影响;采用羟脯氨酸测定试剂盒的方法检测SP12对NIH/3T3细胞胶原蛋白分泌的影响;采用Western Blot及RT-PCR的方法,在蛋白水平及基因水平上检测SP12对NIH/3T3细胞I型胶原蛋白、MMP-1及TIMP-1表达的影响。结果表明SP12能显著提高NIH/3T3细胞的增殖率,能促进NIH/3T3细胞由G1期向S期转变,增加其胶原蛋白的分泌量,且在0~20 μg/mL范围内均呈剂量依赖性。在蛋白水平和基因水平,SP12均能显著促进I型胶原蛋白及TIMP-1的表达,抑制MMP-1的表达,这可能是SP12促进NIH/3T3细胞胶原蛋白分泌的作用机制。     

Activity-Based Protein Profiling of Chitin Catabolism

The microbial catabolism of chitin, an abundant and ubiquitous environmental organic polymer, is a fundamental cog in terrestrial and aquatic carbon and nitrogen cycles. Despite the importance of this critical bio-geochemical function, there is a limited understanding of the synergy between the various hydrolytic and accessory enzymes involved in chitin catabolism. To address this deficit, we synthesized activity-based probes (ABPs) designed to target active chitinolytic enzymes by modifying the chitin subunits N-acetyl glucosamine and chitotriose. The ABPs were used to determine the active complement of chitinolytic enzymes produced over time by the soil bacterium Cellvibrio japonicus treated with various C substrates. We demonstrate the utility of these ABPs in determining the synergy between various enzymes involved in chitin catabolism. The strategy can be used to gain molecular-level insights that can be used to better understand microbial roles in soil bio-geochemical cycling in the face of a changing climate.     

Original article: Super‐chilling maintains freshness of modified atmosphere‐packaged Lateolabrax japonicus

The effect of ?1.5 °C brine super‐chilling on the quality of the modified atmosphere‐packaged Lateolabrax japonicus fish fillets was studied. The result showed that the total viable mesophilic count (TVC) and H₂S‐producing bacterial count (HC) of samples were super‐chilled, and then modified atmosphere‐packaged (Sc + Map) were lower than that of Map (Samples were not super‐chilled but modified atmosphere packaged), and values of total volatile base nitrogen (TVB‐N), thiobarbituric acid (TBA), pH and myofibril fragmentation index (MFI) for Sc + Map increased more slowly than those for Map. Colour of skin and flesh of fish fillets was not affected by brine super‐chilling, except the whiteness of the skin of fish fillets. Sc + Map could extend the shelf life of fish fillets for 4 days longer than Map.     

醋渍处理对养殖鲈鱼理化性质的影响

研究了醋渍处理对养殖鲈鱼理化性质的影响及变化规律。结果表明,醋渍处理可以使鱼肉的pH值迅速下降,处理1.5h可以使鱼肉的持水力由原来的79.65%降至30.66%;肌原纤维蛋白发生变性,蛋白质溶解度总体呈现下降趋势;同时短时间的醋渍处理可以起到脱去部分游离脂肪的作用。     

海鲈鱼鱼松加工工艺研究

摘 要：目的 优化海鲈鱼鱼松加工工艺。方法 以海鲈鱼为原料制备鱼松,通过质构、色差及感官评分确定鱼松加工中蒸煮时间、初炒时间和炒酥时间3个关键工艺参数。在此基础上,以感官评价为指标对单因素试验和正交试验结果分析,获得鱼松的最佳配方,由电子舌、电子鼻检测对感官评价结果进行验证。结果 蒸煮时间20 min、初炒时间10 min,炒酥时间25 min为鱼松最佳加工条件,而影响感官评分的配料因素排序依次为食盐添加量＞豌豆粉添加量＞白砂糖添加量,当添加2%食盐、5%白砂糖、8%豌豆粉制备的鱼松品质最好。结论 一定工艺条件下,食盐添加量对海鲈鱼鱼松感官品质有较大影响,本研究可为工业化生产海鲈鱼鱼松产品提供参考。     

鲈鱼蛋白质感染因子蛋白基因的克隆和结构分析

采用RT-PCR方法分离了鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列,并进行了结构分析。研究证明,该感染因子蛋白由507个氨基酸组成,与红鳍东方、大西洋鲑蛋白质感染因子蛋白的平均相似性为67．9％,预测分子量约54kD,具有信号肽、短肽顺接重复、疏水区、糖基化位点、二硫键、糖基缩醛磷肌醇锚定位点等蛋白质感染因子蛋白的主要特征结构域。鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列的分离,为蛋白质感染因子的进化、功能研究以及可能存在的鱼类传染性海绵样脑病研究奠定了基础。     

海水养殖花鲈和淡水养殖花鲈肌肉脂肪酸组成和含量分析

采用Folch 液回流提取投喂相同配合饲料的海水养殖花鲈和淡水养殖花鲈背部肌肉脂质,脂质经氢氧化钾-三氟化硼法甲酯化后进行气相色谱分析。结果表明：海水养殖花鲈和淡水养殖花鲈肌肉脂肪酸组成存在一定差异。海水花鲈肌肉脂肪酸中单不饱和脂肪酸(MUFA)、n-3 系列多不饱和脂肪酸(PUFA)、EPA(C20:5 n-3)和DHA(C22:6 n-3)含量明显高于淡水花鲈,而饱和脂肪酸(SFA)、n-6 系列PUFA 和AA(C20:4 n-6)含量则低于淡水养殖花鲈。海水养殖花鲈和淡水养殖花鲈肌肉中n-6 和n-3 系列PUFA 比值分别为0.27 和0.42,均远低于HMSO(英国卫生部)推荐的最高安全限值(4.0)。