从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA

采用试剂盒法、饱和酚抽提法、高盐沉淀法和氯化苄法从皂苷糖基水解酶产生菌sp.48g提取基因组DNA。经比色法和琼脂糖凝胶电泳分析检测。结果用氯化苄法提取的基因组DNA在质量上和得率上优于其他方法。A260/A280为1.7,DNA产量为0.11mg/g湿菌体。达到下部实验要求。     

Biodegradation of Ammonia Nitrogen Using a Novel Candida sp. Strain N6 Immobilization

固定化假丝酵母菌株N6降解氨氮的研究

王 凯^1,2,孙亚文¹,李斯琪¹,张瑛洁¹,程喜全¹,马 军²

（1. 哈尔滨工业大学(威海), 海洋科学与技术学院,山东 威海 264209;

2. 哈尔滨工业大学 市政与环境工程学院,哈尔滨 150090）

创新点说明：

发现一株假丝酵母菌株,具有较高的氨氮降解能力,采用固定化技术,将其固定化后用于模拟生活污水的处理效果仍然显著,表明将该菌固定化后具有较高的应用价值。

研究目的：

将高氨氮处理效率的菌株N6固定化,以期通过固定化的形式将其应用于废水处理中。

研究方法：

从山东威海金海湾排污口分离出一株假丝酵母菌,该菌株具有较高的氨氮处理效率。采用包埋固定化技术将N6固定,考察了固定化N6的氨氮降解能力以及稳定性,通过单因素以及正交试验确定了固定化材料以及最佳固定化条件。利用SBR反应器探究固定化N6的应用情况。

研究结果：

1）当固定化材料PVA, SA, CaCl2的浓度分别为9%, 1.5%, 2%时最适合N6固定化,在此条件下,固定化N6的氨氮去除率达到了97.97%。

2）稳定性测试表明固定化N6具有很强的稳定性,固定化小球在测试条件下未出现破碎现象。

3）固定化N6的最佳固定化条件为：固定化24h,N6接种量3%,pH 8。

4） 固定化N6在SBR反应器中表现出非常好的氨氮降解能力,去除率稳定在95%-99%。

5）在固定化N6的应用过程中,最适添加量为15%。

结论：

固定化高效菌株用于废水处理具有广阔的前景。高氨氮处理效率的假丝酵母N6固定化后氨氮降解能力仍然较强。固定化N6具有潜在的应用价值,将固定化N6应用到SBR中,具有较高且稳定的氨氮去除率。

关键词：氨氮废水;固定化;假丝酵母菌属;脱氮效率

     

丹参酮转化酶的制备及其在丹参酮转化中的应用

以Absida sp.T48s为产酶菌种,研究了丹参酮转化的培养基组成.结果表明,Absida sp.T48s在豆粕占65%的培养基中培养7 d,产酶量最大.最适酶转化条件为45℃、pH 5.0、底物浓度17.5%、反应时间13 h.     

UV-B辐射下NO对衣藻生长及抗氧化酶活性的影响

以衣藻(Chlamydomorm sp.)为实验材料,研究了在紫外线(Uv-B)辐射增强的情况下,外源SNP(硝普钠,N0供体)对其抗氧化酶SOD(超氧化物岐化酶)、CAT(过氧化氢酶)、POD(过氧化物酶)活性的变化以及对衣藻生长曲线的影响.探讨了NO对藻类在辐射休克情况下的生理保护作用.     

Rhodococcus sp-1的Mn~(2+)生物去除能力及诱导特性

利用传统的细菌分离方法,从地下水生物除锰滤池中分离、纯化出1株细菌,经LBB(leucoberbelin blue)法定性检测其具有Mn2+氧化能力,利用Sherlock细菌鉴定系统初步确定其属于红球菌属(Rhodococcus sp).对红球菌Rhodococcus sp-1菌株的生物除锰能力和诱导特性研究结果表明,Rhodococcus sp-1菌株在达到第1个生长稳定期,细菌浓度2.3×108个/mL时,其Mn2+的去除量可达到35 mg/L,具有很强的Mn2+生物去除能力;同时Fe的存在对Rhodococcus sp-1 Mn2+氧化活性的表达具有诱导作用,在相同培养条件下,Fe3+的诱导性强于Fe2+,其诱导速度是Fe2+的3~4倍;有机Fe3+的诱导性强于无机Fe3+,其诱导速度是无机Fe3+的1.6~2倍.     

金属离子对红球菌腈水合酶活力的影响

不同金属离子对红球菌（Rhodococcus sp．）TCCC 28001的生长及其腈水合酶的酶活有着不同程度的影响．菌株TCCC 28001产生的腈水合酶是钴型,且Co^2＋对该腈水合酶诱导激活的最适浓度为10×10^-5mol／L．选择酵母粉中含有且含量波动较大的5种金属离子,考察了在添加10×10^-5 mol／L Co^2＋诱导激活下,5种金属离子对酶活的影响．结果表明：Fe^2＋,Mn^2＋,Mo^6＋,Cu^2＋4种金属离子具有促进作用,Zn^2＋产生轻微抑制作用．6×10^-5mol／L Fe^2＋的促进效果显著,使菌株TCCC 28001的酶活从453U／mL增加到1941U／mL,提高了328％．     

一株海洋耐冷菌的分类鉴定及其生长特性和抗菌活性研究

从连云港海域潮间带采集的样品中筛选出一株产广谱高活性抗菌物质的海洋耐冷菌G1,该菌的生长温度范围为10~40℃,最适生长温度为20℃;生长的pH范围为3.0~12.0,最适生长pH为9.0;生长的NaCl质量分数为1%~9%,最适生长NaCl质量分数为4%,无NaCl不生长。根据其形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析结果,确定其为交替假单胞菌。菌株G1抗菌活性研究表明,其发酵产物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌以及大肠杆菌、鳗弧菌等革兰氏阴性菌都有显著的拮抗作用。结果揭示该菌在生防、食品及医药方面有潜在的应用价值。     

产DHA酒香酵母的培养条件优化研究

对海洋中筛选的酒香酵母(Brettanomyces sp.)7-3产DHA条件进行了优化,结果表明培养基最佳组成为葡萄糖10 g/L, 蔗糖10 g/L,酵母膏20 g/L,(NH4)2SO4 10 g/L,NaHCO3 1 g/L,K2HPO4 6 g/L,ZnSO4 0.1 g/L,MgSO4 0.1 g/L,CaCl2 0.5 g/L,Na2EDTA 0.2 g/L,FeC6H5O7·3H2O 0.01 g/L.摇瓶培养最佳条件为培养初始pH=6.0,培养温度25 ℃,装液量为100 mL(在500 mL摇瓶中),培养时间为84 h,优化后油脂与DHA产量分别提高了3.3和3.8倍.     

黄绿木霉纤维素酶提纯及其性质研究

通过(NH4)2SO4分级沉淀、Sephadex G-100分子筛层析和DEAE Sephadex A-50离子交换层析等步骤,分离纯化出木霉T2纤维素酶系中达到电泳纯的3种内切葡聚糖酶(EGⅠ、EGⅡ、EGⅢ)和2种β-葡萄糖苷酶(BGⅠ、BGⅡ).通过SDS-PAGE和IEF电泳测得5个酶组分的相对分子质量分别为62.3 ku、71.9 ku、52.6 ku、85.3 ku和78.3 ku,等电点分别为5.4、4.8、5.0、5.6和5.8.此酶系均为糖蛋白,含糖量分别为17.7%、11.7%、15.6%、17.8%、19.3%.5个酶组分均属酸性纤维素酶,最适pH都是5.0;3种内切葡聚糖酶的最适温度皆为60℃,2种β-葡萄糖苷酶的最适温度都是55℃.Mn2 、Fe2 、Zn2 对5种纤维素酶都有一定的激活作用,尤其是Mn2 对内切葡聚糖酶的激活作用极为显著;Mg2 、Cu2 、脲对5种纤维素酶都具有不同程度的抑制作用.酶学动力学分析表明5种纤维素酶组分的Km值分别为0.093、0.083 8、0.079 0、0.085 1和0.077 8 mg/mL,Kcat值为101.7、119.6、11.4、111.4和162.1 s-1.内切葡聚糖酶对底物CMC-Na亲和力的大小与酶的催化效率之间并无相关性,BG对底物水杨苷亲和力的大小与酶的催化效率之间有一定的相关性.β-葡萄糖苷酶有较高的底物专一性,只对水杨苷有活力;内切葡聚糖酶在对羧甲基纤维素钠有活力的同时,对滤纸和秸秆粉也有微弱的活力.     

3株生防芽孢杆菌的筛选及对棉花枯萎病的防治研究

从植物根际土壤中筛选到3株对大豆根腐病、棉花枯萎病、小麦赤霉病等多种作物真菌病害有较强拮抗性的芽孢杆菌菌株Bacillus sp．920,Bacillus sp．930和Bacillus sp．932。用琼脂块法分别测定了它们对11种植物病原真菌的抗菌谱、发酵液的抑菌活性大小及其热稳定性,并对发酵液中的抑菌活性物质进行了初步提取。结果表明,920和932菌株为广谱性抗真菌菌株;930菌株仅表现出对稻瘟病菌具有较强的桔抗性。Bacillus sp．920发酵液中的抑菌活性物质可被酸沉淀,并具有较好的热稳定性。棉花盆栽试验结果表明,接种芽孢杆菌920菌剂可使棉花枯萎病引起的棉苗死亡率由15％降至3．7％,发芽率比对照提高了10％。