合成类蛋白的应用研究进展

类蛋白反应，又称酶水解反应的逆反应，可提供高分子量的类似蛋白质的物质，并可通过肽键结合方式来补充原蛋白质中的必需氨基酸。尽管类蛋白反应早在100年前就有描述，但其机理目前尚不十分清楚。本文主要讨论了此反应的应用，并对其发展前景进行了展望。     

南瓜籽ACE抑制肽的Plastein反应修饰及分离鉴定

为进一步提升南瓜籽多肽的ACE抑制活性,利用Plastein反应对南瓜籽ACE抑制肽进行修饰,探究底物质量分数、反应温度、反应时间以及3种外源氨基酸添加量对ACE抑制率的影响。采用超滤和Sephadex G-25柱层析等分离修饰产物,并利用LC-MS/MS鉴定肽序列。结果表明：Plastein反应修饰的最佳条件为底物质量分数45%,反应温度20℃,反应时间3 h;分别添加亮氨酸、苯丙氨酸或甘氨酸均能显著提升修饰产物的ACE抑制率,其中添加0.5 mmol/g亮氨酸时,修饰产物的ACE抑制率最高,比修饰前提高了24.50百分点;经超滤和Sephadex G-25柱层析分离,获得ACE抑制率达89.61%的组分,经LC-MS/MS鉴定出76个肽段,固相合成其中4种多肽IFH、IFF、LAAF、DFHPR,其抑制ACE的IC₅₀分别为1.55、2.24、3.79 mmol/L和7.86 mmol/L。综上,Plastein反应修饰可显著改善南瓜籽ACE抑制肽的ACE抑制活性,经超滤和Sephadex G-25柱层析分离,可获得高ACE抑制活性的南瓜籽ACE抑制肽。     

类蛋白反应法改性水解明胶的原理

研究了在木瓜蛋白酶的作用下，蛋氨酸月桂醇酯与水解明胶进行类蛋白反应的机理。通过对反应过程中游离氨基质量分数的变化、封闭水解明胶端基对类蛋白反应的影响、不同反应时间所得类蛋白物的疏水性变化以及氨基酸组成和质量分数变化几方面的研究得出：类蛋白反应中存在肽键缩合和转肽作用；离子相互作用和静电相互作用对类蛋白物的合成有一定贡献的；疏水相互作用能够促进类蛋白反应的进行，也说明了疏水性较强的多肽之间会更容易发生类蛋白合成反应。