煮制时间对鹅肉蛋白结构的影响

为了探究煮制对鹅肉蛋白的影响,本文通过测定不同煮制时间(0、30、60、90、120 min)下鹅肉的蒸煮损失率、剪切力、蛋白电泳、肌原纤维小片化指数(myofibril fragmentation index,MFI)、游离氨基酸(free amino acid,FAA)构成及微观结构研究了煮制时间对鹅肉蛋白结构特性...     

大豆脂肪氧化酶凝胶电泳分析研究

本文介绍利用SDS电泳、簿层等电聚焦电泳技术及激光光密度计扫描分析大豆脂肪氧化酶的方法,其中薄层等电聚焦电泳技术具有准确、快速、分辨率高的特点,并应用于53份大豆资源LOX同功酶缺失体的鉴定以及激光扫描定量测定酶带峰值面积,为在我国开展大豆脂肪氧化酶研究提供了鉴定技术。     

菜籽分离蛋白分子质量分布及酶解条件的研究

以脱脂"双低"油菜籽为原料,利用碱溶解酸沉淀法提取菜籽分离蛋白;用SDS-PAGE凝胶电泳研究菜籽蛋白的分子质量的组成;以水解度和氮回收率为考察指标,用响应面分析法拟合了Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白成菜籽肽的二次多项数学模型,优化了酶解菜籽分离蛋白的工艺参数。SDS-PAGE凝胶电泳研究表明利用碱溶解酸沉淀提取的菜籽分离蛋白主要是2S清蛋白。响应面分析法研究的试验结果表明,酶的使用量、pH、酶解温度、酶的使用量与pH的交互作用对Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白的水解度和氮回收率的影响均显著(P0.05)。通过求解菜籽肽的二次多项数学模型的逆矩阵方程,可得Alcalase 2.4L水解菜籽分离蛋白的最佳条件为:酶的使用量0.05 Au/g,pH 9.0,酶解温度54℃;在此酶解条件下,菜籽分离蛋白浓度为5%时,水解5 h,所得的水解度和氮回收率分别为35.12%及52.96%。     

利用蛋白质"指纹"技术鉴定澳大利亚、法国啤酒大麦的品种和纯度

采用操作简便、分辨率高的种子醇溶蛋白SDS-PAGE电泳技术对常用澳大利亚和法国啤酒大麦进行鉴定，利用Gel-Pro软件对电泳图谱进行条带分析和比较，建立了澳大利亚和法国啤酒大麦品种标准图谱库。利用Cross Checker 2．8和MEGA3软件对供试的啤麦品种进行遗传聚类分析，结果与传统分类相近。并成功进行了人工混种试验。     

坚果类过敏原的分离及免疫印迹分析

本文采用传统的丙酮、乙醚溶剂去脂方法,选用不同品种和不同种类的坚果食品对其进行过敏蛋白的初步分离,应用BCA蛋白试剂盒测定各蛋白浓度,通过SDS-PAGE电泳分离坚果过敏蛋白各组份,采用免疫印迹(Western-blotting)方法鉴定坚果蛋白的过敏性。结果表明,各坚果蛋白提取浓度为白芝麻:14 mg/mL,黑芝麻:4 mg/mL,核桃:8 mg/mL,腰果:28 mg/mL,开心果:21 mg/mL。SDS-PAGE电泳显示15 ku是白芝麻的主要蛋白,34 ku是黑芝麻的主要蛋白,19和37 ku是腰果的主要蛋白,13 ku是核桃的主要蛋白,13和21 ku是开心果的主要蛋白。Western-Blotting显示对过敏患者的阳性混合血清均有过敏反应,坚果过敏具有同源性,白芝麻与黑芝麻的主要过敏原分子量均在22 ku,腰果的主要过敏原分子量在20 ku,核桃的主要过敏原分子量在54 ku,开心果的主要过敏原分子量在23 ku。     

荔枝汁中谷蛋白结构及特性

采用Osborne分级法制备荔枝汁中的谷蛋白,并采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）、差示扫描量热仪、红外光谱等方法分析荔枝汁中谷蛋白的分子质量分布、热稳定性以及二级结构等。结果表明：荔枝谷蛋白分子质量较大,主要集中在50?kDa及以上,而且成分复杂,约有10?个条带,经还原后,少量大分子质量条带消失,出现新的较小分子质量条带,其分子质量集中在50?kDa左右;用蛋白样品结合SDS的能力表征蛋白质的表面疏水特性,得出1?mg的荔枝谷蛋白样品结合（74.25±5.26）μg?SDS;游离巯基含量为（29.83±1.72）μmol/g,总巯基含量为（40.59±2.04）μmol/g,二硫键含量为（5.38±0.18）μmol/g;荔枝谷蛋白的变性峰值为105.24?℃;β-折叠和β-转角为荔枝汁谷蛋白主要结构,所占百分比分别为33.92%和64.7%。因此,可初步推断荔枝谷蛋白组分复杂,分子质量较大,具有较强的表面疏水性,二硫键含量较少,对热较稳定。     

超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉嫩化的影响

采用单因素和响应面设计优化了超声波辅助菠萝蛋白酶嫩化鸭肉的最佳工艺参数,并对嫩化机理进行探讨。得到优化条件为处理温度45?℃、pH?7.2、菠萝蛋白酶添加量350?U/g、超声波功率80?W、嫩化时间15?min,在该条件下剪切力的预测值为20.208?N,实测值为21.110?N。相对于未处理的鸭肉,嫩化组鸭肉的pH值、持水力和肌原纤维小片化指数显著增加（P＜0.05）,剪切力、肌原纤维溶解度和不溶性胶原蛋白的含量显著下降（P＜0.05）,而色差无明显变化（P＞0.05）。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱显示嫩化组鸭肉中大分子蛋白被水解成小分子肽类或氨基酸。透射电镜结果显示嫩化组鸭肉肌原纤维Z线断裂溶解,肌节变形缩短,I带和A带模糊不清,出现了肌原纤维小片化现象。超声波与菠萝蛋白酶协同作用对鸭肉的嫩化具有显著的效果,大大缩短了嫩化时间,使鸭肉更加多汁并富有弹性,鸭肉的品质得到了极大的改善。     

SDS-PAGE方法鉴定鸡骨髓蛋白质热变性的研究

研究了不同的加热温度﹑加热时间对鸡骨髓中蛋白质变性程度的影响。结果发现,随着加热温度的升高加热时间的延长,电泳条带变少变浅,聚丙烯酰胺凝胶电泳可以作为检测鸡骨髓蛋白质变性程度,可应用于带骨鸡肉热熟程度的判定。     

不同还原剂对大豆胰蛋白酶抑制剂的钝化研究

研究了二巯基苏糖醇(DTT)、亚硫酸钠(Na2SO3)和半胱氨酸(Cys)对大豆胰蛋白酶抑制剂活性的影响。实验在温度80℃,pH7.5条件下反应,并以BAPNA为底物,采用改进的方法测定DTT对大豆蛋白酶抑制剂的钝化作用,最后用SDS-PAGE方法和凝胶排阻色谱法研究其蛋白酶钝化敏感性。通过改进的BAPNA法得出还原剂钝化大豆胰蛋白酶抑制剂由大到小顺序依次为:DTT>Na2SO3>Cys,并通过SDS-PAGE进一步证实了比色法得出的结论。而凝胶排阻色谱法说明了还原剂对大豆胰蛋白酶抑制剂作用使得抑制剂中二硫键被打断,抑制剂结构发生改变,有新的物质生成。所以,得出大豆胰蛋白酶抑制剂的稳定性与二硫键的存在有关。     

商品普鲁兰粗酶的分离纯化

对商品普鲁兰酶进行分离纯化。用已购得的商品普鲁兰酶,制成酶液,采用硫酸铵进行分级盐析,通过脱盐、离子交换层析和凝胶色谱,分离得到较纯的普鲁兰酶。通过SDS-PAGE电泳分析,获得了单一条带,表明所分离的酶已经达到电泳纯,该酶的分子量约为82kDa。