毛蚶蛋白对益生菌抗生素胁迫的保护作用

长期摄入抗生素残留的水产品可引起肠道菌群稳态失调。该研究基于恩诺沙星对四种益生菌（两歧双歧杆菌BBi32、鼠李糖乳杆菌LGG、植物乳杆菌LP45和乳双歧杆菌Probio-M8）的抑菌作用，建立了抗生素胁迫的益生菌生长模型，评价了红三鱼、黄蚬和毛蚶蛋白粗提物及其不同分离纯化组分对益生菌抗生素胁迫的保护作用。在四种益生菌中，乳双歧杆菌Probio-M8对抗生素胁迫最为敏感，三种原料中毛蚶蛋白粗提物表现出对抗生素胁迫保护作用；毛蚶蛋白粗提物经过阴离子交换柱（SepharoseFastFlow）分离得到四个组分（Fr0、Fr1、Fr2和Fr3），其分子量分别为14.3~44.3 ku（Fr0）、20.1~29.0 ku（Fr1）、14.3~97.2 ku（Fr2）和<14.3 ku（Fr3），其中Fr0可更有效地提高Probio-M8菌液的OD600从0.80提升至1.56，Fr3可将其生长代时缩短至0.98 h。毛蚶蛋白可促进乳双歧杆菌在恩诺沙星胁迫下增殖的活性，表明毛蚶蛋白具有保护益生菌免受抗生素生长胁迫、促进益生菌增殖的功能，该研究为毛蚶蛋白对肠道稳态的调节功能提供理论依据，并提出了应对体内抗生素残留的应对方案。     

单甲氧基聚乙二醇氨基的制备

通过两步反应制备了相对分子质量(简称分子量)为5 000的单甲氧基聚乙二醇氨基(m PEG5k-EDA)。首先以单甲氧基聚乙二醇5 000(m PEG5k)和对甲苯磺酰氯(p-Ts Cl)为原料,反应得到活性中间体m PEG5k-OTs,然后通过与乙二胺的亲核取代反应获得目标产物,并通过正交实验确定了最佳反应条件:m PEG5k-OTs与乙二胺的摩尔比为1∶25、反应温度为80℃和反应时间为24 h。产物和中间体的结构通过IR和1HNMR进行表征,并通过SDS-PAGE碘染色法检测产物分子量的变化情况。结果表明,通过该方法能简便快捷地制备m PEG5k-EDA,在最优实验条件下,目标产物的总收率高达76.8%,且SDS-PAGE检测表明,产物纯度较高,不含交联副产物。     

重组单抗药物的非还原电泳纯度分析

目的对重组单抗药物的非还原电泳纯度进行分析,排除样品制备过程中形成的一些假象。方法结合重组单抗的分子结构特征,改变常规SDS-PAGE条件,将抗体样品在不同的缓冲液及电泳条件下进行比较。结果抗体在非还原SDS-PAGE纯度检测中出现的次带,可通过在供试品缓冲液中加入烷基化试剂封闭自由巯基而几乎全部消除;通过降低电泳过程的环境温度,可有效降低主带上方高相对分子质量带的出现。结论单抗药物中由于含有多对二硫键引起的一些因电泳样品制备而形成的假象带,可以通过试验方法的修正而去除。     

细胞可溶性蛋白准弹性激光散射分析与SDS-PAGE法比较研究

分别采用SDS-PAGE和准弹性激光散射检测柠檬醛作用白血病K562前后细胞可溶性蛋白变化情况。实验结果表明：SDS-PAGE与准弹性激光散射均能检测出可溶性蛋白种类、大小、含量及其变化：但准弹性激光散射法所获取的参数信息反映了可溶性蛋白天然构象下的真实状态及其动态变化,与传统的SDS-PAGE方法相比较,它是研究外界因素（包括药物）对细胞可溶性蛋白尤其是对蛋白聚合体影响的更好表征方法。     

三角帆蚌糖蛋白的盐溶液浸提及抗氧化活性

以三角帆蚌脏器为试验材料,以Na Cl溶液为提取溶剂,研究三角帆蚌脏器糖蛋白的低温提取、分离及抗氧化活性。通过单因素试验和正交试验,确定三角帆蚌脏器糖蛋白最优提取条件为:提取温度4℃、Na Cl溶液浓度0.3 mol/L、料液比1∶15、提取时间9 h。在此条件下,糖蛋白得率(以糖含量计)为(9.259±0.083)%,糖蛋白得率(以蛋白质含量计)为(3.763±0.107)%。提取液经硫酸铵分级沉淀得三个组分糖蛋白粗品。体外抗氧化实验表明,三个组分都具有清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力,但清除能力不同。10%SDS-PAGE电泳后经考马斯亮蓝R250和PAS染色,表明3个组分含有不同的糖蛋白谱带。     

鱼鳞胶原蛋白的提取鉴定初探

胶原蛋白是生物体内含量极高的一种蛋白质，可达30％左右。目前胶原蛋白的主要采源局限于牛和猪的皮和骨。作为下脚料大部分被浪费的鱼鳞也是胶原蛋白的重要来源。采用碱提取、酸提取以及水提取方法提取鱼鳞中的胶原蛋白，并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法对提取的胶原蛋白进行鉴定，确定水提法为鱼鳞胶原蛋白的较佳提取方法，并进一步对该提取方法的提取条件进行优化，得出鱼鳞肢原蛋白的最佳提取条件：提取温度70℃，提取时间20min，料液比1：25和1：50之间。     

处理方法对大豆致敏蛋白的影响

Gly m Bd 30K、Gly m Bd28K和β-伴大豆球蛋白的α亚基(MW68K)是大豆中的主要致敏蛋白，本文对经过不同处理的大豆进行SDS-PAGE电泳，结果显示，结合盐析和pH值处理可以有效去除Gly m Bd 30K和Glym Bd28K，但要同时去除三种致敏蛋白还需进一步研究。     

Post-exsanguination Infusion of Ovine Carcasses: Effect on Tenderness Indicators and Muscle Microstructure

Lambs were assigned to 3 treatment groups: control (Ctr), infused with 10% volume (by wt) of a tenderizing blend (NCa), and NCa plus 0.015M CaCl₂ (WCa). Compared to Ctr and WCa, NCa-treated samples had lower shear force values (P < 0.05) and higher percent change in myofibrillar fragmentation index (P < 0.05). SDS-PAGE of infused samples revealed the appearance at 24 hr postmortem of 22-30 kd protein components. Scanning electron micrographs of NCa myofibrils showed they were more fragmented, fractured, or split and had wider interfibrillar spaces compared to Ctr and WCa. The fracture plane of muscles immediately postmortem was along the endomysial-sarcolemmal sheath, while at 24 hr postmortem the sheath was weakened enough for the fracture to occur along the surface of the myofibrils.     

运用一步化体外转录—翻译系统筛查基因突变的新技术

报道了一种筛查基因突变的新技术－ＰＣＲ结合一步化体外转转录－翻译系统。该技术包括：（１）ＰＣＲ扩增靶ＤＮＡ片段，并使ＤＮＡ产物的一端或两端带上Ｔ７Ｔ１序列；（Ｔ１：翻译起始信号，ＣＣＡ ＣＣＡ ＴＧ）；（２）以核的为模板，利用一步化体外转录－翻译系统合成相应肽链；（３）用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及高分辨ｐＨ梯度ＰＡＧＥ（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离分析多肽产物，通过异常电泳图谱而发现基因突变，本文以已知突变的     

A Study on Subunit Groups of Soybean Protein Extracts under SDS-PAGE

Protein extracts of 640 soybean cultivars and landraces, mainly from China and a few from the US, were analyzed for their components and subunits based on distribution patterns of bands with varying molecular weights (MW) under SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis). The number and molecular weight of the bands in SDS-PAGE varied among materials and showed a tendency of continuous distribution. Accordingly, the SDS-PAGE patterns of the soybean protein extracts were divided into two regions: the region of bands with MW < 44 KDa and that with MW ≥ 44 KDa. The first region containing mainly 11S proteins was divided into four parts, called subunit groups, i.e. 11S-1 (14.4–22 KDa), 11S-2 (22–26 KDa), 11S-3 (26–34 KDa) and 11S-4 (34–44 KDa). The second region containing mainly 7S protein was divided into six subunit groups, i.e. 7S-1 (44–49 KDa), 7S-2 (49–55 KDa), 7S-3 (55–67 KDa), 7S-4 (67–73 KDa), 7S-5 (73–82 KDa) and 7S-6 (82–91 KDa). The sum of relative contents of 11S-1–11S-4 was obtained as the relative content of 11S protein, those of 7S-1–7S-6 as that of 7S protein, and therefore, the 11S/7S ratio obtained. The proposed criteria were demonstrated to be simple, stable and feasible. Among the 640 tested materials, 39 lacked 11S-1 but none lacked the other 11S subunit groups, while deficiencies existed in all the six subunit groups of 7S, indicating a great potential for the genetic variation of protein components and subunits for breeding for the improvement of protein qualities.