皂荚多糖超声波提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

以皂荚多糖为研究对象,在单因素实验的基础上,采用响应面法对皂荚多糖的超声波提取工艺进行优化,并对多糖进行体外抗氧化活性的研究。结果表明:最佳提取工艺条件为:提取温度50 ℃,液料比35:1 (mL/g),提取时间30 min,超声功率285 W,提取3次,多糖得率为30.65%±0.25%。抗氧化实验表明,皂荚多糖具有一定的抗氧化能力,其对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基清除作用的IC₅₀分别为:10.3、6.9、1.5 mg/mL。     

粗根荨麻不同部位多糖的提取及其对巨噬细胞的调节作用

目的：研究粗根荨麻（Urtica macrorrhiza Hand.-Mazz.）不同部位粗多糖的含量及化学组成,初步评价其对巨噬细胞的调节作用。方法：利用热水提取、乙醇分级沉淀的方法分别制备粗根荨麻根、茎、叶粗多糖;通过高效液相色谱法分析其分子量及单糖组成;全波长扫描及红外光谱分析其结构特征;MTT法研究其细胞毒性;中性红染色法考察其对巨噬细胞吞噬活性的影响;Griess法和ELISA法分别检测其对巨噬细胞NO、TNF-α分泌的影响。结果：提取得到粗根荨麻叶（UML40、UML60）,茎（UMS40、UMS60）,根（UMR40、UMR60）共6种粗多糖,其中叶粗多糖得率最高为4.62%,UML40为占77.92%,茎粗多糖和根粗多糖得率分别为0.69%和1.13%;各粗多糖平均重均分子量从2.11 kDa到802.21 kDa不等,主要由D-Glc、D-Gal、D-Ara和D-GalA组成,但不同部位粗多糖的单糖组成摩尔比不同。此外,不同部位、不同分子量的粗根荨麻多糖免疫活性存在较大差异,其中UML40、UMS40、UMR40均能够显著活化巨噬细胞,促进其吞噬活性及NO、TNF-α分泌水平（P<0.05）;UMR60虽然不能促进巨噬细胞吞噬但能显著促进细胞因子的分泌（P<0.001）;UML60细胞毒性较大且活性较低;UMS60无激活巨噬细胞的活性。结论：粗根荨麻不同部位多糖在组成及免疫调节活性上存在一定差异,在对其进行研究以及开发利用时应当注意质量控制。     

茶多糖对海藻酸钠—淀粉—茶末复合膜性能的影响

目的:开发绿色环保海藻酸钠—淀粉—茶末复合膜。方法:向海藻酸钠—淀粉—茶末复合膜中添加不同质量分数的茶多糖,探究其对复合膜全红外阻隔率、色差、水溶性、水蒸气透过系数、力学性能、厚度、含水率、自由基清除率、抑菌性等性能的影响。结果:茶多糖和海藻酸钠有很强的相互作用。当茶多糖质量分数为5.00%时,复合膜拉伸强度最大,为9.71 MPa;断裂伸长率最大,为25.42%,水蒸气透过系数最小,为2.38×10^-9 g·mm/(cm²·d·Pa),此时其抑菌性能最好。复合膜的抗氧化性随茶多糖添加量的增加而增加,最高可达85.49%。结论:茶多糖对复合膜理化性质及抑菌抗氧化性能均有一定影响。当茶多糖质量分数为5.00%时,复合膜具有最佳的力学性能、阻湿性能及抑菌性能。     

夏枯草水溶性多糖体外抗氧化活性研究

目的研究夏枯草水溶性多糖乙醇分级组分的抗氧化活性。方法采用水提醇沉法得到夏枯草水溶性粗多糖,再经不同体积分数(20%、30%、40%、50%、60%、70%,v/v)的乙醇溶液逐级沉淀,依次得到不同分子量的六个夏枯草多糖组分(依次记为PVLP-1、PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5、PVLP-6)。进一步测定了其中四个组分(PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5)对DPPH、O~(2-)·和·OH的清除效率。结果从夏枯草中得到的PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5四个多糖组分对DPPH自由基清除效果最明显,在质量浓度为3.2mg/mL时,清除率依次为98.09%、90.05%、88.56%和87.71%。各组分对O~(2-)·以及·OH自由基的清除作用相对较差些,除PVLP-4清除·OH自由基的EC_(50)值为13.24 mg/mL外,其余均小于10 mg/mL。四个多糖组分中,PVLP-2的总体抗氧化效果优于其他各个组分。结论乙醇分级可以作为一种简便易行的分离纯化方法,制备具有良好抗氧化效果的水溶性夏枯草多糖。     

两种方法制备玉竹多糖工艺优化及抗氧化活性比较

目的:研究直接热回流法和热回流-微生物发酵法两种方法制备玉竹多糖最佳工艺及两种方法所得玉竹多糖的抗氧化活性的比较。方法:通过单因素实验和正交实验考察热回流和微生物发酵两种方法制备玉竹多糖的最佳工艺,并以DPPH自由基清除率为指标,分析两种方法得到的玉竹多糖的抗氧化活性。结果:玉竹多糖提取最佳工艺为料液比为1:60(g/mL),提取温度为80℃,提取时间为2.5 h,多糖含量为834.94 mg/g;最优发酵工艺为接种量为8%,摇床转速为180 r/min,发酵时间为28 h,培养温度为28℃,多糖含量为510.78 mg/g,测定发酵后玉竹多糖抗氧化活性较热回流所得玉竹多糖明显增强。结论:玉竹多糖发酵液的抗氧化性较玉竹多糖原液更强,为其作为抗衰老、美白化妆品原料进行更深一步的研究提供了理论支持。     

铁皮石斛多糖不同级分的制备、性质分析及免疫调节活性比较

目的:制备铁皮石斛多糖(DOP)的不同分级组分,比较其理化性质及体外免疫调节活性的差异,并对多糖结构特征与活性的关系进行初探。方法:采用分级醇沉的方法获得铁皮石斛多糖不同分级组分,并对各组分的糖、糖醛酸、蛋白质含量、单糖组成、分子量进行分析。以巨噬细胞RAW264.7为研究模型,比较DOP不同分级组分的体外免疫调节活性。结果:DOP和四个组分(F30、F40、F50和F50S)均为中性糖,各组分糖醛酸含量较DOP均有所降低,F50S蛋白质含量最高。DOP、F30、F40、F50和F50S的平均分子量分别为262.4、314.5、248.3、202.9和136.2 kDa。DOP、F30、F40、F50和F50S均主要由甘露糖和葡萄糖组成,其摩尔比分别为5.16:1、3.67:1、4.16:1、5.62:1和5.86:1。DOP和各分级组分均可显著(p<0.05)增强RAW264.7巨噬细胞的增殖能力、NO的释放以及TNF-α和IL-1β的分泌。结论:铁皮石斛多糖及其分级组分均有免疫调节活性,且分子量较小的免疫调节活性较强。     

丹参内生镰刀菌HBG16胞外多糖发酵条件优化及其抗氧化能力

目的:优化丹参内生镰刀菌HBG16发酵工艺条件来提高胞外多糖产量,并分析其抗氧化能力。方法:通过单因素实验和响应面试验对产胞外多糖丹参内生镰刀菌HBG16的碳源、氮源、接种量、pH四个因素进行优化;通过凝胶渗透色谱法(GPC)进行样品单糖组成分析;通过DPPH法测定胞外多糖抗氧化能力。结果:通过单因素实验确定内生镰刀菌HBG16的碳源为麦芽糖,氮源为酵母粉,pH为6.0,接种量为6%;经响应面试验确定最佳发酵条件为麦芽糖32 mg/mL,酵母粉2.6 mg/mL,pH为6.0,接种量6%,在此优化条件下,发酵液胞外多糖的含量达到0.95 mg/mL,与预测值的偏差为2.06%。多糖主要由半乳糖组成,含量为52.09 mg/kg。随着胞外多糖浓度的增加,对DPPH自由基清除率增加。多糖清除DPPH自由基的IC₅₀为0.38 mg/mL。结论:在优化的培养条件下,丹参内生镰刀菌HBZ16胞外多糖产量由0.11 mg/mL提高到0.95 mg/mL,为真菌多糖的工业化利用奠定了基础。     

超声改性大豆分离蛋白与大豆可溶性多糖复合乳化体系的冻融稳定性研究

本实验针对不同超声功率改性的大豆分离蛋白与大豆可溶性多糖形成的复合乳液的冻融稳定性进行研究, 揭示乳液冻融稳定机理与形成乳液复合物结构特性之间的构效关系。对2 次冻融循环处理前后乳液油滴进行共聚焦 观察,研究等温结晶固脂含量、油脂被乳化量的变化和作为乳化剂的大豆分离蛋白不同超声处理（0、200、300、 400、500 W）下二级结构的变化,进而分析其与乳液冻融稳定性的关系。结果表明：乳液经2 次冻融循环处理后 随着超声功率的增加聚结程度降低,400 W超声处理的大豆分离蛋白与大豆可溶性多糖复合乳液最为稳定;等温 结晶条件下不同乳液固脂含量增加速率不同,但最终平衡时总含量相同;油脂被乳化量发生不同程度的变化;不 同超声处理改变了大豆分离蛋白的二级结构,400 W超声处理的大豆分离蛋白无规卷曲结构含量最高。说明不同 超声改性的大豆分离蛋白与大豆可溶性多糖会形成不同结构的复合物,影响了乳液的冻融稳定性,初步明确了 适当的超声处理能够改善大豆分离蛋白的空间结构,促进其与大豆可溶性多糖分子的键合,进而影响大豆分离蛋 白-多糖界面结构特性和乳化体系的冻融稳定性。     

山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用

目的：探讨山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180的抑制作用。方法：噻唑蓝法及吞噬中 性红法测定小鼠脾淋巴细胞增殖能力及脾巨噬细胞活性;体内肿瘤抑制实验检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤 生长、脾脏指数和胸腺指数的影响;流式细胞术及酶联免疫吸附测定法检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞 亚群及血清细胞因子水平的影响。结果：山慈菇多糖可以增强淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞活性;同时,山慈菇多 糖也可以抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,增加小鼠脾脏指数和胸腺指数;此外,山慈菇多糖还可以增加荷瘤小鼠CD4 ＋、CD8＋ T细胞浓度,提高CD4＋/CD8＋比值及白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ水平。结论：山慈菇 多糖具有明显的肿瘤抑制作用,其对肿瘤细胞生长的抑制作用与提高免疫能力有关。     

提取方法对黄秋葵花多糖的结构组成及抗氧化活性的影响

以黄秋葵花为原料,研究热水、酸法、酶法、超声辅助提取工艺对黄秋葵花多糖提取率和样品结构组成等 的影响,在此基础上对4 种多糖抗氧化活性进行了比较分析。结果表明：4 种提取方法所得多糖的提取率大小依次 为：酶法提取（（21.90±0.14）%）＞酸法提取（（15.15±0.07）%）＞热水提取（（12.60±0.28）%）＞超声辅 助提取（（12.02±0.37）%）。经酶法和热水提取的多糖样品分子质量较高且特性黏度较大,而超声提取则显著降 低了多糖的分子质量和特性黏度,同时使多糖分子质量的分布更加均一。4 种多糖的单糖组成成分相同,主要包括 鼠李糖、半乳糖醛酸和半乳糖,但单糖的物质的量之比有所不同。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,得到的4 种 样品都具有多糖的典型傅里叶变换红外光谱特征。对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力等抗氧化活性的测定结果 表明,4 种多糖具有不同程度的抗氧化活性。其中,以超声辅助提取的多糖抗氧化活性最强。