发酵蔬菜中乳酸菌的功能性与安全性研究进展

乳酸菌是发酵蔬菜制作过程中发挥重要作用的一类优势微生物,可利用蔬菜中的可溶性成分进行乳酸发酵,还能抑制有害微生物并发挥多重功能。本文首先对其最新研究进展做了归纳。近年来食品发酵微生物出现可转移耐药性问题,成为国际关注热点。作者结合研究实践,综述了可转移耐药性及其在发酵蔬菜乳酸菌中的研究现状,以及发酵蔬菜中乳酸菌的控制策略。     

广谱乳酸菌细菌素enterocin LM-2对低温切片火腿的防腐保鲜效果(英文)

为考察广谱乳酸菌细菌素enterocin LM-2对低温切片火腿的防腐保鲜效果,并探讨其在低温肉制品防腐保鲜中的应用可行性。本研究在不添加任何化学防腐剂的前提下,分别添加80、320、1280AU/g enterocin LM-2处理低温切片火腿,分析不同浓度细菌素处理前后样品中微生物数量、理化指标以及感官特性的变化。结果发现:细菌素enterocin LM-2的添加可明显延长低温切片火腿的货架期,有效减少贮藏过程中挥发性盐基氮的生成及脂肪氧化程度,并保持产品原有色泽、气味、质构等感官特性。综合微生物和理化特性分析结果,确定添加1280AU/g enterocin LM-2的处理组防腐效果最好,可将低温切片火腿的货架期延长至49d。这些结果都显示出乳酸菌细菌素enterocin LM-2有作为天然生物防腐剂应用于低温肉制品防腐保鲜中的巨大应用潜力。     

产细菌素乳酸菌的筛选及其发酵特性

从传统发酵制品中分离出60株乳酸菌,在排除有机酸及过氧化氢的干扰后,从中筛选出抑菌活性较高的菌株P-319,经常规生理生化实验,鉴定该菌株为短乳杆菌.其发酵上清液经胰蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后抑菌活性丧失;对其抑菌谱的测定表明,其能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,但对霉菌和酵母菌没有任何抑制作用.产细菌素的发酵过程测定结果表明,该菌株在MRS培养基中30 ℃培养24 h时,抑菌活性达到最高.     

Lactobacillus J23发酵合成抗菌肽Bac-J23培养条件的优化研究

研究了培养条件(接种量、发酵温度、初始pH)对LactobacillusJ23发酵合成广谱抗菌肽Bac-J23的影响,并采用响应面法进行了优化。结果表明,Lactobacillus-J23生产Bac-J23体现出温度、pH梯度和接种剂量依赖性,响应面优化结果表明最适温度和pH分别为36.8℃和5.2,接种量阈值为2.13×104cfu/mL。     

Comparative Study on Antibacterial Effect of Pediocin ACCEL and Nisin Against Fluorescencestained Listeria monocytogenes BCRC 14845

ABSTRACT: Effects of pediocin ACCEL (Class IIa, pediocin-like bacteriocins) and nisin on carboxyfluorescein diacetate (cFDA) -stained Listeria monocytogenes BCRC 14845 was carried out. Decrease of fluorescence intensity in stained cells and increase in efflux were observed with the increase in bacteriocin concentrations up to 12.5 μg/mL. No further decreases in fluorescence intensity and cell numbers were obtained when the concentration of bacteriocins was over 12.5μg/mL. The leakage of efflux was further confirmed by the release of intracel-lular ultraviolet-absorbing substances. Comparing the leaking time of fluorescence, the intensity of cFDA in nisin-treated cells within 1 min incubation was almost comparable to that in pediocin-treated samples after 40 min incubation. Considering the leakage of cFDA, UV-absorbing substances, changes in cell numbers during incubation of cFDA-stained cells, and restoration ability, nisin seemed to reveal mainly bacteriostatic effect and partially bactericidal effect on L. monocytogenes and to cause easier-to-repair membrane damage. However, pediocin ACCEL appeared to have both bacteriostatic and bactericidal effects on L. monocytogenes and to cause more difficult-to-repair membrane damage.     

温度诱导双水相分离纯化细菌素工艺条件的选取与优化

利用TritonX-114可萃取疏水性蛋白质的性质,研究了温度诱导双水相分离纯化细菌素乳链菌肽, 用响应面法对成相成份TritonX-114和离子强度进行了优化,最佳浓度分别为3.27% TritonX-114,0.85 mol/L氯化钠. 优化过程中,pH固定为2.0,温度固定为30℃, 在此条件下乳链菌肽的萃取率为92%,纯化系数为9.05.     

乳酸片球菌抑菌物质细菌素的分离纯化

将乳酸片球菌接种于MRS培养基,37℃静置培养17h后产生抑菌物质细菌素.用三步法从培养液中分离纯化细菌素:首先根据细菌素在pH6.0时与菌体的吸附力最强,pH2.0时吸附力最弱,通过调节pH和离心来收集细菌素,然后经过SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析和Sephadex G-50凝胶层析进行纯化,最后细菌素的得率为0.19%,比活为5.17×104AU/mg,纯化了34.54倍.得到的细菌素样品通过Tricine-SDS-PAGE电泳出现清晰条带,大小约为4600D.     

大菱鲆肠道中广谱拮抗活性乳酸菌的筛选及其细菌素鉴定

应用牛津杯法从大菱鲆肠道分离的乳酸菌中筛选出对革兰氏阳性和阴性细菌均具有抑制作用的菌株LP1-4,经生理生化反应和16S rRNA鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。通过温度、pH值和蛋白酶等因素分析,结果表明菌株LP1-4无细胞上清液（cell-free supernatant,CFS）中抑菌物质具有良好的热稳定性,在pH 2.5～5.0具有抑菌活性,且对蛋白酶敏感,初步判断为细菌素类抑菌物质。菌株LP1-4在最佳培养时间24 h时抑菌活性达到峰值,应用乙酸乙酯萃取后抑菌圈直径达25.42 mm。采用Labscale TFF System超滤分离和Sephadex G-25凝胶层析获得小于1.0 ku分子质量的细菌素。经高效液相色谱纯化分析,抑菌物质在液相分离条件下目标峰的保留时间为5.0 min。采用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱确定细菌素分子质量为0.854 ku,其氨基酸排列顺序为谷氨酸-天冬酰胺-赖氨酸-脯氨酸-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-赖氨酸（ENKPAAPK）。本研究从大菱鲆肠道筛选具有广谱抗菌活性的菌株LP1-4,对研发控制水产品腐败菌和致病菌的乳酸菌生物防腐保鲜制剂具有潜在的应用价值。     

1株产细菌素乳酸菌的鉴定及所产细菌素的诱导合成现象

从发酵大蒜中筛选到一株具有抑菌作用的菌株Br26,通过用不同蛋白酶处理判断该菌株是否为细菌素产生菌。随后,通过分析自身发酵上清液与其他乳酸菌对细菌素合成的影响,探讨该细菌素的诱导合成现象。结果表明：菌株Br26的发酵上清液经胃蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后抑菌活性降低,确定该菌为细菌素产生菌,经16S rDNA鉴定为Weissella sp. Br26。Weissella sp. Br26在42 ℃、1/4 MRS培养时,细菌素抑菌活性消失,而当添加不同生长时期的发酵上清液时,抑菌活性显著增加,表明该细菌素可进行自我诱导。另一方面,Weissella sp. Br26与卷曲乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌和肠膜明串珠菌的活菌共同培养后,发酵液pH值未有明显变化,但细菌素抑菌活性显著增加,表明细菌素的合成亦可受其他乳酸菌的诱导。综上,Weissella sp. Br26细菌素的合成是受自身发酵液及其他菌诱导调控的。     

产细菌素乳酸菌的筛选及对农家干酪保质期的影响

从实验室保存的7 株乳酸菌中,经分离纯化,以金黄色葡萄球菌为指示菌,筛选获得1 株高产细菌素的菌株KLDS 1.0338,排除有机酸和过氧化氢的干扰以及蛋白酶敏感性实验,确定抑菌作用是由细菌素产生的。通过菌株形态学分析,生理生化及16S rDNA分析鉴定菌株KLDS 1.0338为干酪乳杆菌ATCC 334。进一步利用该菌株制作农家干酪,考察4 ℃贮藏期间干酪的变化,添加KLDS 1.0338干酪乳杆菌的实验组抑菌活性显著大于未添加KLDS 1.0338干酪乳杆菌组（P＜0.01）,实验组的pH值下降平缓,可以有效延长农家干酪的货架期,并保持产品原有的色泽、风味、质构等感官特性。