酸奶弱后酸化菌株摇瓶增菌工艺及发酵罐扩培试验

针对目前我国高效直投式发酵剂技术水平落后以及在应用中普遍存在酸奶后酸化的问题,研制开发具有自主知识产权的弱后酸化高效直投式发酵剂,势在必行.本文采用自行选育的弱后酸化保加利亚乳杆菌Lb-s1 rp-1为出发菌株,在优化的胡萝卜汁复合增菌培养基上增殖培养.首先研究了培养温度、培养方式、培养基起始pH值、接种量等单因素对弱...     

嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种共生关系的研究进展

嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种是组成酸奶发酵剂的主要菌种,在长期共处于牛乳环境的过程中形成多种协同共生关系。这些协同共生关系赋予发酵剂菌株产酸快、黏度高、活性物质丰富等优良性能,同时对酸奶品质产生重要影响。该文旨在从营养供给、抵抗环境胁迫及酸奶品质改良等方面讨论两菌的协同共生关系,为提高发酵剂菌株活力及酸奶品质提供理论指导。     

乳酸菌原生质体制备与再生研究

从市售酸乳中分离嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌,并对其进行原生质体制备和再生。采用溶菌酶对嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌进行处理,脱去细胞壁以探讨原生质体形成和恢复与菌龄、酶浓度、酶解时间及酶解温度之间的关系,利用四因素三水平的正交试验选出原生质体形成和恢复较适宜的条件。试验结果显示嗜热链球菌原生质体制备和恢复的较优条件为,菌龄16h,酶浓度1mg/ml,酶解时间40min,酶解温度42℃,此时原生质体形成率为98.75%,再生率为23.8%;而保加利亚乳杆菌原生质体制备和恢复的较优条件为,菌龄16h,酶浓度10mg/ml,酶解时间30min,酶解温度36℃,此时原生质体形成率为82.05%,再生率为27.1%。本文研究为这两种乳酸菌原生质体的制备、再生条件及其基因操作和相关研究提供技术思路和实验条件。     

酸奶在冷藏过程中酸度、粘度和双乙酰的变化和关系研究

以实验室保存的3株保加利亚乳杆菌和3株嗜热链球菌制作酸奶,研究酸度、粘度和双乙酰在冷藏过程中的变化规律和相关性。结果表明,由嗜热链球菌发酵的酸奶在冷藏过程中,酸度值呈上升趋势,粘度值和双乙酰值先上升后下降;由保加利亚乳杆菌发酵的酸奶在冷藏过程中,酸度值和粘度值呈上升趋势,双乙酰值先上升后下降。同时酸度和粘度呈极显著正相关且有线性回归关系。     

乳酸菌原生质体融合筛选

对从市售酸乳中分离的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌进行原生质体融合,用再生的菌落和原始菌进行发酵,筛选出凝乳好且产酸量高的融合子;再用高温法筛选耐热性好的融合子。实验结果显示用溶菌酶处理后得N2种菌的原生质体,在融合了3min后所涂的平板上长出了12株再生菌落,观察凝乳结果表明4、6、8号菌为凝乳快且好的融合子;从酸度测量结果分析得出4、5、6、8号菌为产酸量高的融合子;利用高温法依据菌的耐热性优点筛选出4号和8号菌的最高耐受温度为56℃。     

Phosphate group requirement for mitogenic activation of lymphocytes by an extracellular phosphopolysaccharide from Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus

The mitogenic activity of extracellular polysaccharides produced by Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus OLL 1073R-1 and NCFB2483 was examined in murine lymphocytes. The extracellular polysaccharide from Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus OLL 1073R-1 was fractionated into neutral and acidic polysaccharides by anion-exchange chromatography, while that of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus NCFB2483 were all fractionated into neutral polysaccharide(s). The acidic polysaccharide stimulated mitogenic responses of murine splenocytes and Peyer's patches but not of thymocytes. The optimal concentration of the acidic polysaccharide at the highest stimulation was 160 μg/ml. A significant increase of mitogenic activity was initiated at 24 h, and the highest response was obtained after stimulation for 48 h. The acidic polysaccharide purified by high performance liquid chromatography also had substantial mitogenic activity, and the molecular weight was estimated to be 1.2×10⁶. The acidic polysaccharide was a phosphopolysaccharide consisting of glucose, galactose and phosphorus. Dephosphorylation by hydrofluoric acid degradation reduced the mitogenic activity in lymphocytes. The phosphopolysaccharide produced by Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus 1073R-1 is a potent B-cell-dependent mitogen in which the phosphate group acts as a trigger of the mitogenic induction.     

三种乳酸菌混合培养的研究

在5L罐中对保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌进行了单独培养及混合培养研究。实验结果表明,嗜酸乳杆菌及嗜热链球菌会抑制保加利亚乳杆菌的生长,保加亚利乳杆菌与嗜酸乳杆菌可能对嗜热链球菌的生长具有促进作用,嗜热链球菌对嗜酸乳杆菌具有促进作用,保加利亚乳杆菌对嗜酸乳杆菌的生长没有促进作用。这种实验结果为混合培养益生菌提供的实验参考。     

提高保加利亚乳杆菌抗冷冻性的研究

保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)L.b-DR经脱脂乳培养基和MRS培养基活化、菊芋汁复合培养基培养、离心收获菌体,以12%脱脂乳作为冷冻保护剂,进行了冷冻试验。研究了在培养基中添加活性成分、培养基的起始pH值、培养温度、细胞收获的菌龄、保护剂的pH值对细胞冷冻存活率的影响。结果表明:在菊芋汁复合培养基中添加0.1%甘油或0.5%VE、培养基的起始pH值为6.0、37℃培养、对数末期或稳定初期收获菌体、保护剂pH值调至6.0,可显著提高保加利亚乳杆菌L.b-DR的冷冻存活率(P<0.05)。     

酸乳菌种分离纯化方法

本文研究了在脱脂乳中保藏的发酵酸乳菌种的分离纯化方法。确定了德氏乳杆菌保加利亚亚种的分离纯化培养基为改良MRS,以10-2稀释度划线分离法在烛缸中厌氧培养可以达到很好的分离效果,添加2%的玉米浆后有利于纯菌株的生长;采用涂布分离法和真空袋培养,在链球菌基础培养基上可很好地分离出唾液链球菌嗜热亚种的纯菌株。经鉴定所分离出菌株为纯种后,采用斜面保藏在不含乳基质的培养基上,在15d内可以保持其活力。     

板栗水解液的乳酸发酵工艺研究

本文采用正交试验，确定了用保加利亚乳酸杆菌与嗜热链球菌菌混合发酵板栗水解液，并以双歧乳酸杆菌发酵板栗水解液为参照，找出混合发酵的最佳工艺条件为Ａ１Ｂ２Ｃ３，双歧乳酸菌发酵的最佳工艺条件为Ａ２Ｂ３Ｃ３Ｄ３。