Immune-Enhancing Effect of Submerged Culture of Ceriporia lacerata Mycelia on Cyclophosphamide-Induced Immunosuppressed Mice and the Underlying Mechanisms in Macrophages

The white-rot fungi Ceriporia lacerata is used in bioremediation, such as lignocellulose degradation, in nature. Submerged cultures and extracts of C. lacerata mycelia (CLM) have been reported to contain various active ingredients, including β-glucan and extracellular polysaccharides, and to exert anti-diabetogenic properties in mice and cell lines. However, the immunostimulatory effects have not yet been reported. This study aimed to identify the immunomodulatory effects, and underlying mechanisms thereof, of submerged cultures of CLM using RAW264.7 macrophages and cyclophosphamide (CTX)-induced immunosuppression in mice. Compared to CTX-induced immunosuppressed mice, the spleen and thymus indexes in mice orally administered CLM were significantly increased; body weight loss was alleviated; and natural killer (NK) cytotoxicity, lymphocyte proliferation, and cytokine (tumor necrosis factor [TNF]-α, interferon [IFN]-γ, and interleukin [IL]-2) production were elevated in the serum. In RAW264.7 macrophages, treatment with CLM induced phagocytic activity, increased the production of nitric oxide (NO), and promoted mRNA expression of the immunomodulatory cytokines TNF-α, IFN-γ, IL-1β, IL-6, IL-10, and IL-12. In addition, CLM increased the inducible NO synthase (iNOS) concentration in macrophages, similar to lipopolysaccharide (LPS) stimulation. Mechanistic studies showed that CLM induced the activation of the NF-κB, PI3k/Akt, ERK1/2, and JNK1/2 pathways. Moreover, the phosphorylation of NF-κB and IκB induced by CLM in RAW264.7 cells was suppressed by specific MAPKs and PI3K inhibitors. Further experiments with a TLR4 inhibitor demonstrated that the production of TNF-α, IL-1β, and IL-6 induced by CLM was decreased after TLR4 was blocked. Overall, CLM protected against CTX-induced adverse reactions by enhancing humoral and cellular immune functions, and has potential as an immunomodulatory agent.     

蜂王浆对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

研究蜂王浆对免疫低下小鼠免疫系统的调节作用。48只雄性昆明小鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组、酪蛋白组以及蜂王浆低、中、高剂量组,每组8只。除空白组外,其余5组每天腹腔注射80 mg/(kg bw)环磷酰胺,建立免疫低下小鼠模型。各组小鼠经不同样品连续灌胃30 d后测量小鼠体重、脾脏和胸腺质量及HE染色观察脾脏与肝脏的形态、白细胞计数、免疫球蛋白含量、细胞因子水平、脾淋巴细胞增殖能力、睾酮含量。造模后,脾脏和胸腺指数降低,小鼠脾脏和肝脏镜下形态学结构紊乱,白细胞计数、免疫球蛋白、IL-6水平显著降低,T/B淋巴细胞增殖能力显著下降;经蜂王浆干预后,相比于模型组,蜂王浆干预组小鼠上述指标有不同程度的改善,其中以高剂量组效果最为显著。蜂王浆可以增强环磷酰胺造成的免疫功能低下小鼠的免疫功能。     

光动力结合环磷酰胺对小鼠移植瘤影响的实验研究

目的 :观察PDT结合环磷酰胺对小鼠移植肿瘤的杀伤效应。方法 :应用光敏剂加氩离子激光照射结合应用环磷酰胺对小鼠移植肿瘤进行治疗。结果 :激光光动力结合环磷酰胺治疗对小鼠移植瘤的杀伤作用较单独应用激光光动力或单独应用环磷酰胺的杀伤作用更明显 (P <0 0 1)。结论 :光动力结合化疗药物可作为治疗肿瘤的一种方法     

蛹虫草子实体多糖抗突变作用

研究蛹虫草多糖(CMPS)对环磷酰胺(CTX)诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核形成率及染色体畸变率的影响,探讨其抗突变作用.采用微核实验和染色体畸变实验技术,镜下观察并计数.结果显示:CMPS三个剂量组小鼠微核抑制率分别为29.75％、36.20％、44.48％,抑制率随剂量增多呈增加趋势,各剂量组与环磷酰胺组比较,均有显著性差异(p ＜0.05);CMPS三个剂量组染色体畸变率分别为36.7％±5.46％、20.8％±3.52％、18.1％±3.28％,畸变率随CMPS剂量增多呈下降趋势.蛹虫草多糖可降低环磷酰胺诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及染色体畸变率,具有抗突变活性.     

牛磺酸营养液对小鼠免疫功能影响的研究

目的研究牛磺酸营养液对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法随机将雄性小鼠分为正常对照组,免疫抑制模型组和牛磺酸营养液低、中、高剂量组。腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺5次建立小鼠免疫抑制模型,观察不同剂量牛磺酸营养液对免疫抑制小鼠免疫器官、细胞免疫、体液免疫及单核巨噬细胞吞噬功能的影响。结果与模型组小鼠相比,牛磺酸营养液能显著增加免疫抑制小鼠的脾指数、胸腺指数,促进脾淋巴细胞增殖,提高抗体生成细胞数和半数溶血值,增强单核巨噬细胞的吞噬功能。结论牛磺酸营养液能够提高免疫抑制小鼠的免疫功能。     

黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫相关因子的影响

研究黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫因子的影响。选择健康昆明小鼠,适应性喂养4 d后,分成5 组：空白组、环磷酰胺（cyclophosphamide,CY）模型组、CY＋黄酒多糖（低、中、高剂量）组,每组10 只。黄酒多糖按高、中、低3 个剂量（50、100、200 mg/（kg·d）,均以体质量计）给小鼠灌胃,1 次/d,连续给药14 d,空白组和CY模型组给予生理盐水。第19天除空白组,其余4 组腹腔注射环磷酰胺,连续4 d。处死小鼠,眼眶取血,测定血清中白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosisfactor-α,TNF-α）、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）、补体（C3、C4）水平。结果表明,与CY组相比,黄酒多糖能提高IL-6、IFN-γ、TNF-α、免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）和补体（C3、C4）水平,并且随着低中高剂量效果依次增加。由此说明,黄酒多糖能提高免疫缺陷小鼠的免疫功能。     

乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用

探讨乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用。Balb/c小鼠随机分为6组,正常对照组,模型对照组,乳铁蛋白组(5、25、50、500 mg/kg)。连续灌胃给药27 d,第27天给药后除正常对照组外,其他小鼠均腹腔注射环磷酰胺80 mg/kg,继续灌胃至第30天,末次给药24 h后,放射免疫分析方法测定各组小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞。酶联免疫分析方法检测血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4,IL-10的变化。与正常对照组相比,模型小鼠外周血CD4+T、CD8+T百分率明显增加;血清IFN-γ明显降低(p<0.01),IL-4明显增高(p<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显下降(p<0.01);乳铁蛋白25、50、500 mg小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞百分率明显降低(P<0.01或P<0.05)。乳铁蛋白500 mg组小鼠血清IFN-γ较模型组明显增高(p<0.05),乳铁蛋白50、500 mg小鼠血清IFN-γ/IL-4比值趋于正常。乳铁蛋白能不同程度修复环磷酰胺所致小鼠免疫失衡状态,具有免疫保护作用。     

沙棘Vp粉的制备及增强免疫功能研究

目的：研究沙棘Vp粉增强免疫功能的作用。方法：将沙棘原汁通过高温瞬时灭菌和喷雾干燥等技术制得沙棘Vp粉,分别采用全自动氨基酸分析仪和高效液相色谱法检测沙棘Vp粉中氨基酸以及水溶性维生素的含量。利用环磷酰胺腹腔注射造成免疫力低下小鼠实验模型,实验分组为正常对照组、模型组、黄芪精阳性对照组、沙棘Vp粉低、高剂量组。分别检测小鼠胸腺指数、脾脏指数、全血分析、巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素水平和脾细胞增殖能力等指标。结果：沙棘Vp粉含有多种人体必需氨基酸,且VC含量高达（18 266.4±201.1）mg/kg。沙棘Vp粉（1.0、2.0 g/kg）能不同程度地提高小鼠胸腺指数、脾脏指数（P＜0.01）;增加白细胞数量,降低淋巴细胞比例（P＜0.05）;增强小鼠单核-巨噬细胞的吞噬系数（P＜0.01）和血清溶血素水平（P＜0.01）;提高脾淋巴细胞的转化能力。结论：沙棘Vp粉具有明显增强小鼠免疫力的作用。     

川牛膝水提物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 研究川牛膝（Cyathulae radix）水提物对 环磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法 雌性ICR小鼠60只,根据体重随机分为空白对照组、免疫抑制模型组和川牛膝低、中、高干预剂量组,每组12只。实验第1~3 d,除对照组外,其余各组小鼠每天腹腔注射80 mg/(kg·bw)环磷酰胺,建立免疫抑制小鼠模型,对照组每天腹腔注射等量生理盐水。第4 d起,每天给予对照组和模型组1%羧甲基纤维素钠（carboxymethyl cellulose sodium, CMC-Na）溶液灌胃,川牛膝低、中、高剂量组分别给予0.06、0.12、0.24 g/(kg·bw)川牛膝提取物的CMC-Na混悬液灌胃,连续灌胃30 d后测定小鼠体重、脾脏和胸腺质量及形态、外周血白细胞计数、免疫球蛋白含量、细胞因子水平、外周血及脾脏T淋巴细胞亚群、骨髓有核细胞计数和DNA含量。结果 川牛膝水提物3个干预剂量组小鼠与模型组小鼠相比：脾脏和胸腺的形态学结构逐渐恢复;外周血白细胞计数不同程度的增加;免疫球蛋白IgG含量增加,IgM含量在低、高2个剂量组显著增加;血清干扰素（interferon,IFN）-γ浓度在高剂量组显著升高,肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α浓度在低剂量组恢复,白细胞介素（interleukin,IL）-2浓度在低剂量组略有升高,在中、高剂量组显著下降,IL-9浓度在高剂量组有所降低,且较其他组向对照组回归程度最大,IL-10浓度显著降低;外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比在低剂量组显著恢复,脾脏CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比在3个组均显著恢复,且恢复程度逐渐增加;骨髓有核细胞浓度在低、高剂量组有显著提高,DNA含量在高剂量组显著增加。结论 一定剂量的川牛膝对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能具有改善作用。