响应面法优化月桂酸单甘油酯的酶催化合成工艺

以月桂酸三甘油酯和甘油为原料,脂肪酶催化甘油解反应合成月桂酸单甘油酯。在单因素试验的基础上,采用响应面分析法进行合成工艺优化。结果表明,含水量(相对于甘油的质量)对月桂酸单甘油酯产率的影响最为显著,且较优合成条件为:恒温振荡器转速100 r/min,酶添加质量分数(相对于底物)5%,n(甘油)∶n(月桂酸三甘油酯)=6∶1,底物质量分数(相对于整个反应体系)51.9%,温度65℃,含水量4.23%,反应时间5 h。在此条件下,月桂酸单甘油酯产率的预测值和实验值分别为81.68%和81.32%,说明二次多项回归模型具有良好的预测性。     

Determination of pesticides using a low-temperature co-fired ceramic microfluidic platform

The aim of this work is the integration of an improved graphite–epoxy composite electrode modified with the acetylcholinesterase enzyme as a detector into a green tape ceramic microfluidic device for the online amperometric determination of pesticides. First, the operational conditions of the microfluidic system were optimized for the enzymatic substrate determination of acetylthiocholine. Good results were achieved for acetylthiocholine determination, obtaining a low detection limit and optimal sensitivity. The analytical performance of the microanalyzer was evaluated with organophosphorus and carbamate pesticides across a wide concentration range. Pesticides were determined indirectly measuring the enzymatic inhibition effect that they caused. The analysis was based on stopped-flow methodology with a three-step strategy: enzymatic substrate measurement, enzymatic inhibition by pesticide contact with the biosensor, and enzymatic substrate measurement after the inhibition process. The pesticide concentrations were determined by the percentage of inhibition produced. The microanalyzer was used for the analysis of spiked irrigation water samples using this indirect method. The low-temperature co-fired ceramic/epoxy–graphite–acetylcholinesterase microfluidic system showed low limits of detection and adequate sensitivity. The recoveries of the spiked water samples were approximately 100% with relative standard deviation values lower than 5% for three replicate measurements. All results obtained are indicative of a convenient, rapid, sensitive, and economic method for the determination of pesticides in environmental samples.     

新型方法制备固定化脲酶基质材料及固定化脲酶的性能研究

以微晶纤维素(Microcrystalline cellulose,MCC)为原料,采用新型水热氧化方法,制备纤维素基质固定化脲酶载体材料-双醛纤维素(Dialdehyde cellulose,DAC)。采用红外光谱(IR)、固体核磁共振(CP/MAS 13C NMR)、X-射线衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)表征产物结构。测试制备的纤维素基质固载脲酶的酶学性能,并与交联壳聚糖、双醛淀粉固载脲酶的酶学性能进行比较分析,构建酶学性能理论方程。结果表明:采用新型水热氧化反应可成功制备高醛基含量的氧化纤维素,与交联壳聚糖和双醛淀粉固定化脲酶相比,所得氧化纤维素载体材料固定化脲酶的米氏常数小(0.0108mol·L-1),对底物亲和能力强,重复使用率高,在pH=5.0~9.0能保持酶活性,建立的理论方程较好地表征了固载酶酶学性能。     

HPLC法检测酶法合成中还原型/氧化型谷胱甘肽

建立酶法反应中还原型/氧化型谷胱甘肽含量的液相分析方法。采用ZOABAX SB-C18进行分离,流动相为磷酸二氢钾辛烷磺酸钠溶液∶乙腈(920∶80,V/V),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL;采用外标法定量。还原型/氧化型谷胱甘肽在10~200μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9994(n=4)、0.9999(n=4),在S/N=3时最低检测限分别为0.037μg/mL、0.019μg/mL;在S/N=10时最低定量限分别为1.90μg/mL、1.12μg/mL;样品加标回收率分别为98.7%~100.6%、98.5%~101.4%;色谱系统稳定性RSD,GSH、GSSH分别为0.44%、1.16%。样品分析显示出本方法操作简便,快速,准确,灵敏度高,稳定性好,适合酶催化反应中还原型/氧化型谷胱甘肽的测定。     

高压耦合酶解技术软化槟榔壳的研究

采用高压耦合纤维素酶水解技术软化槟榔壳。研究表明,高压处理有助于纤维组织的软化。实验得出最佳酶解温度为50℃,最佳酶解时间5 h,纤维素酶的最适用量为30 FIU/g;pH=4.8时纤维素酶对槟榔壳纤维水解效果最佳。     

酶解制备吉尾鱼水解蛋白粉的工艺研究

以水解液中α-氨态氮含量为指标,选用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和动物蛋白水解复合酶对吉尾鱼进行单酶水解,确定中性蛋白酶为水解用酶。通过正交实验确定的中性蛋白酶水解条件为肉：水=1：2、酶浓度1600IU／g原料、温度60℃、水解时间5h。验证实验表明,水解液中α-氨基态氮含量为1.764g／100g,水解度为62.2％。水解液经喷雾干燥,得到淡黄色,带海鲜味的粉末。     

一种新型脂肪酶的反应特性及动力学研究

本文对一种具有高度特异磷脂酶活力的新型脂肪酶的反应特性和动力学进行了研究.此酶可同时作脂肪酶和磷脂酶使用.作脂肪酶使用时,始初时酶活最高的条件是:pH值为7.0,温度为40 ℃;作磷脂酶使用时,始初时酶活最高的条件是:pH值为5.0,温度为60 ℃.该酶在pH 4.0-9.0范围内稳定,50 ℃时稳定性较好,其水解甘油三酯的酶活24 h为79.80 %,水解磷脂的酶活24 h为61.1 %;60 ℃时酶活的稳定性变差,其水解甘油三酯的酶活15 min为原酶的17 %;水解磷脂的酶活1 h为原酶的26.39 %,5 h为13.89 %.对其动力学和热力学常数进行了测定和计算,得知在各自始初酶活最高的条件下该酶对磷脂的催化效率高于对甘油三酯的催化效率.脱胶实验验证此酶可用于菜籽油脱胶.     

脱脂乳粉非酶褐变影响因素的实验研究

在食品、饮料、营养品、医药等行业广泛涉及非晶态粉体产品,这些粉体产品的非酶褐变,会严重影响产品质量。本文对脱脂乳粉的非酶褐变特性进行了实验研究;考查了水分活度、贮藏温度、储藏时间和玻璃化转变温度等参数对脱脂乳粉非酶褐变的影响。结果表明:随着水分活度、贮藏温度、贮藏时间以及贮藏温度T与脱脂乳粉的玻璃化转变温度Tg间的差值(T-Tg)的增加,脱脂乳粉非酶褐变指数显著增大;脱脂乳粉应在较低水分活度(例如0.3以下)和较低温度(例如40℃以下)下贮藏,以延长其货架寿命。