基因探针技术及其在食品卫生检测中的应用

建立在DNA杂交基础上的基因探针技术是现代分子生物学中的一种常规技术。用基因探针技术检测食品中的有害微生物具有特异性强、灵敏度高和操作简便、省时等优点。近年来 ,有关非放射性基因探针、DNA生物传感器探针及分子信标探针等技术研究取得的重要进展 ,必将加速基因探针技术在食品微生物检测中的应用。本文对多种基因探针的技术原理与研究应用概况及最新进展进行了综述讨论     

常见食源性致病菌胞外代谢轮廓分析

寻找常见食源性致病菌间特征性代谢产物,是研发食品安全快速高效监控技术的基础。本文直接利用常见食源性致病菌发酵液冻干,经硅烷化试剂衍生,并采用气相色谱-质谱技术(GC-MS)对代谢产物进行分析,同时进行NIST11谱图库检索并分类,并对数据进行热图和主成分(PCA)分析。研究发现,发酵液中有大量有机酸、醇类和胺类等物质产生,且菌种间各代谢产物种类和相对含量差异显著;同时各菌间含有丰富的特有代谢产物,其中部分特有代谢产物在其他菌株中未见报道。通过热图和PCA分析各菌株胞外代谢轮廓可知,24 h时各菌株间能够明显区分,同时去除糖类和氨基酸后,PCA区分鉴定效果明显提高,尤其在24 h时最好。研究表明,胞外代谢轮廓分析可以用于寻找常见食源性致病菌生物标志物和菌种区分鉴定,同时部分菌种间特有的代谢产物有望成为常见食源性致病菌潜在生物标志物。     

Short communication: Microbiological quality of raw cow milk and its association with herd management practices in Northern China

Contamination of raw milk with bacterial pathogens is potentially hazardous to human health. The aim of this study was to evaluate the total bacteria count (TBC) and presence of pathogens in raw milk in Northern China along with the associated herd management practices. A total of 160 raw milk samples were collected from 80 dairy herds in Northern China. All raw milk samples were analyzed for TBC and pathogens by culturing. The results showed that the number of raw milk samples with TBC <2 × 10⁶ cfu/mL and <1 × 10⁵ cfu/mL was 146 (91.25%) and 70 (43.75%), respectively. A total of 84 (52.50%) raw milk samples were Staphylococcus aureus positive, 72 (45.00%) were Escherichia coli positive, 2 (1.25%) were Salmonella positive, 2 (1.25%) were Listeria monocytogenes positive, and 3 (1.88%) were Campylobacter positive. The prevalence of S. aureus was influenced by season, herd size, milking frequency, disinfection frequency, and use of a Dairy Herd Improvement program. The TBC was influenced by season and milk frequency. The correlation between TBC and prevalence of S. aureus or E. coli is significant. The effect size statistical analysis showed that season and herd (but not Dairy Herd Improvement, herd size, milking frequency, disinfection frequency, and area) were the most important factors affecting TBC in raw milk. In conclusion, the presence of bacteria in raw milk was associated with season and herd management practices, and further comprehensive study will be powerful for effectively characterizing various factors affecting milk microbial quality in bulk tanks in China.     

金黄色葡萄球菌肠毒素在食源性微生物中的研究进展

由细菌污染引起的食源性疾病依然是影响人类公共健康和食品安全的最大问题之一。其中,金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,引起许多严重感染。金黄色葡萄球菌属于革兰氏阳性球菌,广泛分布于自然界,是引起化脓性疾病的重要病原菌,也是引起食品污染和细菌性食物中毒的一种重要细菌。食品受金黄色葡萄球菌污染后,不仅会腐败变质,而且部分菌株产生金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins,SEs）而引起食物中毒,由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的首位。所以,对SEs的研究以及快速、精确的检测和筛查,成为关键环节。本文拟对金黄色葡萄球菌肠毒素生物学性状、致病．洼、检验方法等方面的研究进展进行综述。当然,对金黄色葡萄球菌及其主要致病因子肠毒素的研究有待进一步深入与发展。     

DNA微阵列在食品营养与安全中的应用与展望

DNA微阵列是一种高通量基因检测和分析技术,主要概括介绍DNA微阵列在营养基因组学、食源性病原体检测、转基因食品和饮食补充剂安全性评价中的应用。     

过滤除菌用净化材料的研究与应用

综述了过滤除菌用净化材料的研究与应用进展情况,介绍了目前用于过滤除菌的各种净化材料以及制备新型过滤材料的新工艺。还探讨了过滤除菌的机理,概述了细菌净化材料在空气净化、生产纯净水以及在食品行业、医疗行业等方面的应用。     

BTH诱导采后桃果实抗病性反应对其贮藏品质的影响

以"大久保"水蜜桃果实(Prunus persica(L.)Batsch cv.‘OkuBa’)为试材,研究了0.2 g/L BTH处理诱导的桃果实抗病性反应对其贮藏品质影响。实验结果表明:0.2 g/L BTH处理可有效诱导桃果实在20℃贮藏期间的SAR反应,促进抗病相关酶几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性以及总酚含量的上升,从而有效控制了果实贮藏期间P.expansum导致的青霉病的发展;但BTH处理诱导的SAR反应同时显著降低了桃果实在贮藏期间的乙烯峰值以及葡萄糖和蔗糖含量,并可抑制总黄酮、总花色苷和类胡萝卜素的积累,从而导致果实出现后熟及次生代谢产物合成速度减慢等不良症状。由此推测,BTH诱导的SAR抗病性反应对采后桃果实来说是一个不可逆的物质和能量消耗过程,可能会影响果实后熟品质的形成。     

活的非可培养状态副溶血性弧菌实时荧光逆转录PCR检测方法的建立及其毒力研究

目的 建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达.方法 将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转录PCR引物,通过不同的PCR反应程序和引物浓度组合试验,摸索最佳反应体系条件,用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力研究.结果 用所建立的检测VBNC状态副溶血性弧菌的实时荧光逆转录PCR方法,对接种于陈化海水培养的不同时期的AS079副溶血性弧菌进行荧光定量逆转录PCR扩增,结果显示,随着培养时间的延长,毒力基因tdh2和鉴定基因toxR表达水平持续下降,但即使细菌进入VBNC状态,这两个基因也能够得到很好的扩增,说明以toxR基因和tdh2基因对进入VBNC状态的副溶血性弧菌进行检测和毒力研究方法可行.灵敏度试验表明,鉴定基因toxR的最低检测限可达到48 cfu/ml,研究毒力基因tdh2的表达需要细菌浓度至少为4.8×102cfu/ml,同时试验证明此方法与其他相近食源性致病菌无交叉反应.结论 该实时荧光逆转录PCR方法检测快速、特异性强、敏感度高,适用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力分析.     

2016年广州市市售食品中食源性致病菌 监测结果分析

目的 了解广州市市售食品中食源性致病菌污染及分布情况, 发现危险因素。方法 2016年共采集6类共1058份食品样品, 对副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、致泻大肠埃希氏菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、单增李斯特氏菌等进行监测分析。结果 检出食源性致病菌164株, 总检出率为15.50%。食源性致病菌中副溶血性弧菌的检出率最高(40.93%), 其次为蜡样芽胞杆菌(9.29%)、金黄色葡萄球菌(2.38%)、单增李斯特氏菌(2.08%)、沙门氏菌(1.42%), 致泻大肠埃希氏菌检出率为0。不同食品类别中水产品检出率最高, 达到了43.52%, 其次为烘焙食品(13.64%)、小摊贩食品(10.62%)、生鸡肉(8.47%)、冷藏膳食(7.50%)和熟肉制品(6.82%), 不同食品食源性致病菌检出率差异有统计学意义。不同采样场所中采自餐饮店的食品食源性致病菌检出率最高(50.00%), 其次是农贸肉菜市场(17.70%)、超市(16.71%)和小摊贩(10.62%), 最低的是零售店(9.83%)。散装食品食源性致病菌检出率(15.85%)高于预包装食品的检出率(9.09%)。中心城区烘焙食品、生鸡肉致病菌检出率要高于周边区, 周边区域小摊贩食品致病菌检出率为零。结论 2016年广州市市售食品存在较高的食源性致病菌检出率, 对食品安全隐患较高的食品应加强监管, 预防和控制食源性疾病的发生。     

食品中3种致病菌多重PCR检测方法的建立及初步应用

建立用多重聚合酶链式反应(Multiplex polymerase chain reaction,mPCR)同时检测食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌的方法。以沙门氏菌的gyrB基因、单核细胞增生性李斯特菌的gyrB基因、金黄色葡萄球菌的coa基因作为目的基因,分别设计3对引物,通过优化反应体系,建立3种致病菌的多重PCR检测体系。采用单重PCR检测时,灵敏度可达0.423ng/mL(沙门氏菌)、2.5ng/mL(金黄色葡萄球菌)和0.36ng/mL(单核细胞增生性李斯特菌);而采用三重PCR检测时,灵敏度较单重PCR有所下降,分别为2.43ng/mL(沙门氏菌)、2.5ng/mL(金黄色葡萄球菌)、3.6ng/mL(单核细胞增生性李斯特菌)。初步建立能同时、快速、灵敏地检测食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生性李斯特菌的三重PCR方法。