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简介所谓PCR(聚合酶链式反应polymerase chain reaction),即体外基因扩增技术,是将试管中标本的单个复制的目的基因在短时间内由人工复制到数千万倍,从而对疾病发展过程中相关基因的变化特征进行检测的新技术。其原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理(温度t1),解开为两个单链,然后加入引物与互补DNA结合后,经 相似文献
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目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞瘤肿瘤基因P16及P53表达的变化.方法:以不同剂量ALA(20mg/kg、40 mg/kg、60 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg)、HPD(1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5mg/kg)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞肿瘤以波长630nm半导体激光照射,功率密度200mW/cm2,每光斑照射20分钟,PDT后一天、三天、七天及十四天,以流式细胞仪测试各组基因P16、P53不同光敏剂组及不同时间表达的变化并与不照光对照组比较.结果:本实验中未作PDT治疗的对照组肿瘤,肿瘤生长快,P16对照组最低值12.01%.最高值15.41%,HPD-PDT组表达最低值17.12%,最高值34.735%,ALA-PDT组.表达最低值17.1%,最高值25.51%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值16.5%,最高值28.22%;P53对照组最低值15.02%,最高值23.16%.HPD-PDT组,表达最低值29.98%,最高值43.62%.ALA-PDT组,表达最低值25.06%,最高值33.25%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值28.08%,最高值41.01%.总的P16、P53光动力学治疗组表达明显高于对照组,随光敏剂剂量增加表达值渐增,HPD-PDT组表达高于ALA组,HPDlmg/kg联合、ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg,HPD3-4mg/kg联合ALA20mg/kg能达到P16表达最佳值及最高值.PDT后七天表达较佳.结论:推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPDlmg/kg联合ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg光动力学治疗表达是最佳值或最高值,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应. 相似文献
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56.
目的:探讨母亲还原叶酸载体1(RFC1)基因80G/A多态性与子女唐氏综合症(DS)易感性的相关性.方法:计算机检索PubMed、MEDLINE 、Web of Science、CNKI、CBM数据库,收集从建库至2012年9月间关于母亲RFC1基因80G/A多态性与子女DS易感性相关性的病例对照研究,对符合纳入标准的文献进行Meta分析.结果:共纳入7个研究,包括病例625例,对照767例.Meta分析结果显示:母亲RFC1基因80G/A多态性与子女DS易感性的相关性在各比较模型中差异无统计学意义[A Vs.G:OR=0.85,95%CI(0.73,1.00);AA Vs.GG:OR=0.73,95%CI(0.53,0.99);AA Vs.AG+ GG:OR=0.82,95%CI(0.63,1.06);AA+ AG Vs.GG:OR=0.81,95%CI(0.64,1.03)].基于人种的亚组分析结果显示,两者相关性无统计学意义.结论:目前的研究结果显示,母亲RFC1基因80G/A多态性与子女DS易感性无明显相关性. 相似文献
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目的:应用滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)技术以DNA芯片为载体建立一种对结核分枝杆菌耐药基因单碱基突变的快速检测方法.方法:根据结核分枝杆菌利福平耐药rpoB基因序列,设计针对该基因常见突变位点的锁式探针,及固定于基因芯片上的捕获探针.针对临床结核分枝杆菌样本的基因组DNA,PCR扩增含有rpoB基因常见突变位点的特异性DNA片段.将与突变型特异性互补结合并环化的锁式探针与芯片上固定的捕获探针进行杂交,并运用滚环扩增技术,将含有生物素标记的dUTP掺入扩增产物,最后通过与亲和素标记的纳米金反应,并银染增强显色.同时与临床样本的测序结果比较.结果:通过优化反应条件,能特异性的检测出结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的单碱基突变,通过对临床样本的检测,结果与测序结果一致.结论:该方法结合了DNA芯片和滚环扩增技术,能够快速有效的检测出耐药结核的单碱基突变,具有高特异性、高灵敏度. 相似文献
58.
目的:探讨超声微泡介导基因转染面神经的可行性及有效性。方法:建立小鼠面神经损伤模型,以增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)为标记基因。将48只小鼠随机分为6组:空白组(A组)、脂质体+质粒组(B组)、微泡+质粒+超声组(C组)、微泡+质粒组(D组)、超声+质粒组(E组)、单纯质粒组(F组)。将小鼠面神经损伤后,局部注射... 相似文献
59.
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