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Ewa ya Katarzyna Dziendzikowska Dariusz Kamola Jacek Wilczak Rafa Sapierzyski Joanna Harasym Joanna Gromadzka-Ostrowska 《International journal of molecular sciences》2021,22(9)
Background: The incidence of Crohn’s disease (CD) is increasing worldwide, and it has currently become a serious public health issue in society. The treatment of CD continues throughout a patient’s lifetime, and therefore, it is necessary to develop new, effective treatment methods, including dietotherapy. The present study aimed to determine the effects of consumption of oat beta-glucans with different molar mass on colon inflammation (colitis) in the early stages of 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced CD in an animal model. Methods: Sprague–Dawley rats (control and TNBS-induced CD) were divided into three dietary groups and fed for 3 days (reflecting acute inflammation) or 7 days (reflecting remission) with a feed containing 1% low (βGl) or high (βGh) molar mass oat beta-glucan or a feed without this polysaccharide. The level of colon inflammatory markers and the expression of cytokines and their receptor genes were measured by ELISA and RT-PCR methods, respectively. Results: Acute inflammation or remission (3 or 7 days after TNBS administration, respectively) stages of experimentally induced CD were characterized by an increase in the level of inflammatory markers (IL-1, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α, CRP, MPO, COX, and PGE2) and the disruption of some cytokine signaling pathways as well as macro- and microscopic changes of colon tissue. The consumption of oat beta-glucans reduced the level of inflammatory markers and recovered the signaling pathways and histological changes, with stronger effects of βGl after 7 days of colitis. Conclusions: Dietary oat beta-glucans can reduce colitis at the molecular and organ level and accelerate CD remission. 相似文献
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目的构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Vasostatin并检测其在真核细胞内的表达水平。方法将带有信号肽的Vasostatin基因片段克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染293T细胞,通过Westernblot法,检测其在293T细胞内的表达水平。结果所构建的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Va-sostatin转染293T细胞后,在其裂解的上清液中,检测到目的基因的表达。结论已成功构建了pcDNA3.1(+)-Vasostatin表达载体,并在真核细胞中表达了目的蛋白。 相似文献
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丙型肝炎病毒多表位基因核酸疫苗的构建及其免疫原性 总被引:4,自引:0,他引:4
目的构建丙型肝炎病毒(HCV)多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm,用该重组质粒免疫BALB/c小鼠,并检测其免疫原性。方法用BamHⅠ和HindⅢ双酶切含有HCVC区、E2区模拟表位和NS3~NS5区细胞表位串联基因的原核表达载体pQE30-CtEm,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),脂质体瞬时转染CHO细胞,并检测其表达。以100μg重组质粒免疫BALB/c小鼠,检测其体液免疫和细胞免疫效果。结果所构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm在CHO细胞中能获得有效表达。该质粒免疫小鼠后可诱导高水平的抗体,特异性淋巴细胞增殖反应、IFN-γ水平及CTL活性均明显高于空载体和生理盐水对照组。结论已成功构建HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm,免疫小鼠后可诱导特异性体液免疫和细胞免疫应答。 相似文献
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Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。 相似文献
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目的 克隆人B淋巴细胞刺激因子(B-lymphocyte stimulator,BLyS)胞外区cDNA,并行高效表达、纯化及功能鉴定。方法 提取 HL-60细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人 BLyS胞外区 78-285氨基酸 cDNA,行序列测定后,构建高效原核表达载体pQE-80L,经 IPTG诱导表达及 Ni-NTA层析纯化,SDS-PAGE和 Wester blot检测活性。结果 RT-PCR扩增得到627bp的DNA片段,序列分析与CenBank中报道的编码BLyS 78-285的cDNA序列一致,并在大肠杆菌中得到高效表达,纯化后纯度可达95%,并能刺激B淋巴细胞增殖。结论 成功克隆人 BLyS胞外区cD-NA,并获得了高效表达,纯化产物具有生物学活性,为进一步研究奠定了基础。 相似文献
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针对手工选点生成的三次样条曲线无法准确地描述图像边缘的问题,以粒子群三次参数样条曲线优化算法为基础对现有的图像边缘算法进行了改进。在图像边缘上取若干点作为样条曲线的型值点,利用粒子群算法对这些型值点进行优化,使得到的样条曲线对图像边缘有很好的贴合。实验表明,该算法不仅能够快速拟合样条曲线,而且优化后的样条曲线形态能较好地贴合图像边缘轮廓。 相似文献