酶转化人参皂苷C-K的提取工艺

以粗品人参皂苷C-K为原料,进行脱色、脱脂、硅胶柱层析法分离纯化,得到纯度较高的人参皂苷C-K。结果表明,粗品人参皂苷C-K样品利用D-296树脂脱色柱脱色,除去色素占总质量的4.74%,石油醚脱脂共除去杂质占总质量的7.46%;应用硅胶柱法分离得到较纯人参皂苷C-K得率为41.2%;样品结晶后收率为90%,高效液相色谱检测结晶产物中稀有人参皂苷C-K的质量分数为98.09%。     

酶解产物人参稀有皂苷Rh3的制备与分离

人参二醇类皂苷经酶转化等方法处理,得到Rh2 和Rh3为主的混合物.经常压硅胶柱分离,得到纯Rh2,也得到Rh3粗品;Rh3粗品再经高压硅胶柱分离,成功地得到了Rh3单体.其纯度达到95%以上.     

人参皂苷葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及包涵体的变复性

将人参皂苷葡萄糖苷酶的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。对该基因进行诱导表达,并对包涵体进行变性和复性。结果显示,经终浓度为0.5mmol/L IPTG在30℃下诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析,目的蛋白主要以包涵体形式存在并确定其分子质量约为75ku,与理论值基本相符,表明该基因得到了表达。包涵体经过变性和稀释复性后,经TLC活性检测,能够水解底物Rb1,表明具有人参皂苷葡萄糖苷酶的活性。     

紫外辐射对皮肤角化细胞的影响及其防护的研究

利用紫外线照射人皮肤角化细胞，采用流式细胞技术观察细胞 进程和细胞凋亡情况，并研究了人参皂甙单体Rg-1和Rb-1对紫外辐射的保护.作用。结果表明一定剂量的紫外线可明显诱导人皮肤角化细胞S期阻滞及细胞凋亡，人参皂甙单体Rg-1和Rb-1能够释放S期阻滞，抑制细胞凋亡，对细胞的紫外辐射损伤具有不同程度的保护作用，为开发相关的抗紫外辐射护肤产品提供理论依据。     

低极性人参皂甙的制备研究

通过实验从人参中提取人参皂甙,用乙酸乙酯与正丁醇萃取分离出人参二醇类皂甙。水解法改变人参二醇类皂甙糖基,制备低极性人参皂甙。     

人参皂苷Rf的分离提纯

以人参根须为原料,采用甲醇浸提法提取人参根须中总皂苷,再用硅胶柱层析法对总皂苷进行分离,得到较纯净的人参皂苷单体Rf.结果表明,500 g人参根须中提取得到总皂苷20.5 g,提取率为4.10%.总皂苷中主要含Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分.20.5 g人参根须总皂苷经硅胶柱层析法分离,得到较纯人...     

新细菌转化生产人参皂苷Rg_3的条件研究

研究了新筛选的细菌Phycicoccus sp.BXN5-13转化人参二醇类皂苷生成Rd和Rg3皂苷酶反应条件。结果表明,该细菌产生的人参皂苷酶为胞内酶,最佳产酶发酵条件为在含胰蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L、NaCl 10 g/L的培养基中加入产酶诱导物,即人参茎叶总皂苷,在35℃培养72 h。其粗酶反应最佳条件:底物质量浓度为1 mg/mL,最适pH为6,在45℃反应24 h。其发酵液与人参二醇类皂苷反应后,用薄层层析法与高效液相色谱法检测结果;其酶液将Rb1等人参二醇类皂苷,转化为人参皂苷Rd,将Rd进一步转化为人参皂苷Rg3;转化率为44%。     

转化人参二醇类皂苷为C-K的特异人参皂苷糖苷酶的纯化及性质

研究了真菌sp.g848p发酵产生的把人参二醇类皂苷PPD转化为人参皂苷C-K的特异的人参皂苷糖苷酶,及该酶的分离提纯。该酶经DEAE-Cellulose离子交换柱分离、聚丙烯酰胺凝胶电泳提纯,得到纯酶,其酶的分子质量约为74 ku。这种特异的人参皂苷糖苷酶能水解人参二醇类皂PPD生成稀有人参皂苷C-K,该酶最适反应时间为24 h,最适反应温度为45℃,最适pH为5.0。     

从一种新筛选的菌中找出人参皂苷酶

从新筛选的Absida sp F7菌中找出了人参皂苷酶。该皂苷酶能水解人参皂苷Rb1 C-20位末端的一个β-葡萄糖基生成人参皂苷Rd的β-葡萄糖苷酶。酶的最佳反应条件：时间，4h；底物浓度，5mg/mL；温度，40℃；pH，5．0。     

泡沫分离法分离人参皂苷

通过对浓缩倍数和收率的测定,考察了气速、pH值、进料浓度、进料量以及通气类型、操作方式等因素对人参皂苷泡沫分离效果的影响. 结果表明, 泡沫分离是分离浓缩人参皂苷的一种简便有效的方法.