米曲霉发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉的发酵生产大豆多肽,先以水解度为指标初步探索发酵工艺条件,然后通过正交试验,并以大豆多肽含量为指标确定摇瓶发酵的最佳工艺条件,即发酵液初始pH6.0,发酵培养温度28℃,培养基中大豆分离蛋白含量3%,摇瓶转速180r/min,发酵时间60h～70h,得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。     

米曲霉种曲制备工艺优化研究

试验以籼米为原料,应用均匀试验设计方法对米曲霉种曲的制备工艺进行了研究。结果表明经均匀试验优化后的最佳培养条件为:培养时间6.4 d,接种量0.1%,木灰添加量2.1%,培养温度25℃。在此条件下制备的种曲的孢子数为6.33×108个/g,与预测值接近。     

Production of fungal biomass from cormel process waste‐water of cocoyam (Xanthosoma sagittifolium (L) Schott) using Aspergillus oryzae obtained from cormel flour

Aspergillus oryzae obtained from spoilt cormel flour was subjected to mutation treatments using X‐rays, solar radiation and bleach. Exposure of A oryzae spores to X‐radiation of 50 kV at 20 mA s and other treatments induced both mutation and lethality in the organism. Following selection and screening of viable colonies on a medium containing cormel process waste‐water as the only carbon source, two strains, A oryzae No 15 and A oryzae No 8, which significantly (P ≤ 0.05) produced more biomass at a higher growth rate than the wild parent, were chosen for single‐cell protein production. Nutrient content of the single‐cell protein produced by the mutants was comparable to that of the wild type. Addition of 3.0 g each of (NH₄)₂SO₄, NH₄NO₃, NH₄Cl, and urea in 1 l of Xanthosoma process waste‐water increased the growth rate of mutants, with the highest increase observed with urea. Medium amended with urea also produced fungal biomass with the highest protein level of 7.97 g l^?1 for A oryzae No 8 strain compared with a protein yield of 3.97 g l^?1 obtained in the control. Total biomass produced after 54 h was 22.47 g l^?1 for A oryzae No 15 strain when urea was added, whereas only 15.20 g l^?1 was produced when no nitrogen source was added. The optimal temperature for single‐cell protein production was found to be 35 °C and the optimal pH was 3.50. A speed of 100 rpm gave the largest quantity of fungal biomass for the mutants tested. Copyright © 2003 Society of Chemical Industry     

产β-葡萄糖苷酶真菌的筛选鉴定、纯化及酶学性质分析

经刚果红平板染色法从土样中筛选到3株产纤维素酶的真菌,通过对其β-葡萄糖苷酶活力的测定,选择一株相对活力较高的菌株进行菌种鉴定。在形态鉴定的基础上,通过内转录间隔区(ITS)序列构建系统发育树初步鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae),命名为giF-10。对米曲霉giF-10进行摇瓶发酵,经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶层析、DEAE Cellulose 52离子交换层析进行纯化。得到纯化后的β-葡萄糖苷酶,比活力为40.84U/mg,分子质量约90kD;该β-葡萄糖苷酶最适温度为55℃;在30～50℃之间热稳定性好;最适pH值为4.5;pH4.0～6.0稳定性好;金属离子对酶活力具有一定的影响,Mn2+对酶具有较强的激活作用;Fe3+和Cu2+对β-葡萄糖苷酶活力有较强的抑制作用;该酶对水杨素和纤维二糖具有较强的底物特异性;β-葡萄糖苷酶对水杨素的动力学参数：Km为0.676mmol/L;对纤维二糖的动力学参数为：Km为2.906mmol/L。     

玉米芯诱导米根霉生成葡萄糖淀粉酶的研究

本研究发现,玉米芯能够使菌株CL-6生成葡萄糖淀粉酶的时间缩短为原来的1/3。于是,对菌株CL-6进行鉴定,并分析了玉米芯中的糖类成分以探究其中诱导因子的化学成分。菌株的鉴定采用形态学和ITS序列分子鉴定方法,葡萄糖淀粉酶酶活测定方法采用葡萄糖氧化酶法,发酵体系采用液体摇瓶发酵法,玉米芯中糖类成分的测定采用薄层层析和高效液相示差折光检测法。结果表明,菌株CL-6为米根霉属。玉米芯中水溶性成分中的糖类成分为蔗糖、葡萄糖、果糖和麦芽糖,其含量为520.33、242.67、228.67、30.33 mg/2.5 g湿基。通过分析在米根霉CL-6液体发酵体系中加入玉米芯、玉米芯水溶性成分、玉米芯水溶性成分中的糖类成分以及玉米芯水溶性成分中分子量高于8~14.4 KD成分对其葡萄糖淀粉酶酶活的影响,本研究推测,玉米芯中的诱导因子为分子量高于8~14.4 KD的水溶性物质而非糖类成分。     

米曲霉产大豆异黄酮糖苷酶发酵条件的研究

通过单因素实验和正交实验，探讨米曲霉O3产大豆异黄酮糖苷酶的最佳条件。结果表明：在培养基组分为玉米芯3％、豆饼粉0．2％、KH2PO40．4％、CaCI20．04％、MgSO4-7H2O 0．04％，自然pH，接种量为10％，培养温度为30℃，60h的条件下，米曲霉O3菌株的产酶活性较高，可达388．572U／mL。     

米曲霉M3中性蛋白酶的提取及酶学特性研究

采用硫酸铵沉降法分离纯化米曲霉M3所产中性蛋白酶，并对其酶学性质进行了研究。结果表明：用硫酸铵沉降法所得粗酶粉的酶活力高达159781．1μ／g；该酶的最适反应温度为50℃，最适作用pH值为7．5；该酶在30～40℃时具有良好的热稳定性，在pH值6．5—7．5的条件下酶是稳定的；NH4^1 ，K^1 对该蛋白酶有明显的激活作用，Fe^3 则对其表现出强烈的抑制作用。     

双水相萃取分离米曲霉中性蛋白酶

采用聚乙二醇(PEG)/盐双水相体系萃取分离米曲霉中性蛋白酶。探讨了不同成相盐及其浓度、成相聚合物PEG及其浓度、pH和NaCl浓度对中性蛋白酶萃取的影响。结果表明,适宜的双水相萃取体系为20%PEG1000/25%(NH4)2SO4(m/m)、pH8.0、不添加NaCl,此条件下中性蛋白酶上相酶活回收率和纯化倍数分别为99.88%和2.32。     

多菌种复合固态发酵对菜籽粕硫甙去除效果的研究

以菜籽粕为原料,选择植物乳酸菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉进行单菌和混菌的固态发酵,研究其对菜籽粕硫甙和粗蛋白含量的影响。结果表明,植物乳酸菌对硫甙的降解效果显著高于其他菌种,30℃恒温发酵3d降解率达56.42%;多菌种复合发酵效果优于单菌发酵,当植物乳酸菌:枯草芽孢杆菌:米曲霉的接种比例为9%:6%:6%,pH6.5,水料比为1.2:1,33℃发酵96h,菜籽粕硫甙含量从33.33 μmol/g(干基)下降到2.79μmol/g(干基),降解率可达91.36%(干基),粗蛋白含量提高6.06%(干基),硫甙含量大幅度下降,粗蛋白含量也有所提高。     

发酵合成熊果苷菌种筛选及优化

熊果苷是现代美白化妆品的主要原料,其生产方法包括化学合成法、植物提取法和生物合成法.生物合成法生产熊果苷具有污染小、成本低、效率高等一系列特点,在熊果苷生产中独具优势.本研究对22种包括丝状真菌、酵母菌以及细菌等不同微生物发酵生产熊果苷的能力进行筛选,并用高效液相色谱法对发酵生产的熊果苷进行定量比较.结果表明:米根霉、白地霉、酵母910,酵母904以及枯草芽孢杆菌可以利用对苯二酚发酵生产熊果苷,其中以米根霉的产量最高,产量达到441.30mg/L.对米根霉发酵生产熊果苷进行单因素条件优化,最终得到在对苯二酚浓度为50mmol/L、糖基供体为麦芽糖以及对苯二酚和麦芽糖比例为1:3的条件下,发酵效果较好.