海蜇头糖蛋白分离纯化及免疫活性研究

以海蜇头为原料,通过乙醇分级沉淀、柱层析等分离纯化方法,获得3种组分均一的糖蛋白JGP-Ⅱ、JGP-Ⅲ、JGP-Ⅳ。检测3种糖蛋白对小鼠脾淋巴细胞增殖作用和转化能力的影响,研究其免疫活性。结果表明:3种糖蛋白对小鼠脾淋巴细胞均有增殖作用;对脾淋巴细胞转化能力具有促进作用。     

黑豆糖蛋白的结构分析及抗氧化和免疫活性

本实验从黑豆中分离得到两种糖蛋白，并对其结构组成、抗氧化活性和免疫活性进行研究，为糖蛋白的高效开发利用提供理论依据。采用碱提醇沉法提取黑豆糖蛋白粗品，命名为HDJ，通过DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析分离纯化获得两个均一组分，分别命名为HDJS2和HDJS5-2。利用物理化学方法和光谱法对其化学组成及结构进行分析，通过测定总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH）清除率及总抗氧化能力研究两种糖蛋白的抗氧化活性，采用噻唑蓝比色法评价两种糖蛋白的免疫活性。结果表明：HDJS2（3.20×104 Da）和HDJS5-2（3.89×104 Da）主要是由中性糖和蛋白质组成的糖蛋白，其糖肽键类型均为O-型糖肽键。HDJS2主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖和96.1%氨基酸组成；HDJS5-2主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和71.3%氨基酸组成。抗氧化分析结果表明，HDJS2和HDJS5-2的还原能力、DPPH清除能力和抗氧化能力呈剂量依赖性关系。此外，HDJS2和HDJS5-2均能够促进脾淋巴细胞增殖。结论：HDJS2和HDJS5-2具有潜在的抗氧化作用和免疫调节作用。     

人巨细胞病毒gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果。方法大量提取目的质粒,分3个剂量组进行多点肌肉注射免疫小鼠,利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,ELISA法检测小鼠血清中HCMV特异性抗体,中和试验检测小鼠血清中和抗体。结果ELISA检测结果表明,与空白对照、空载体对照组相比,3个剂量组pcD-NA3.1/gB质粒免疫后小鼠血浆中抗HCMV IgG抗体水平均明显增高(P<0.05),中和抗体水平为1∶20~1∶40,而对照组血清中无中和抗体存在。淋巴细胞增殖指数免疫小鼠与正常小鼠差异无显著意义。结论已构建的HCMV gB基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫,为核酸疫苗研究奠定了基础。     

HiTrap Q柱FPLC快速纯化人血清白蛋白（HSA）

为研制新型三、四天线半乳糖肝受体功能显像剂,须将三、四天线半乳糖与人血清白蛋白(HSA)偶联,故必须制备较纯净人血清白蛋白(HSA).在FPLC上用HiTrap Q柱快速纯化人血清白蛋白(HSA).经PAGE和SDS-PAGE鉴定只有一条带.在FPLC上用HiTrap Q柱纯化HSA有速度快、纯化量大且方法较为简便等特点.     

发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒糖蛋白抗原(Gn)定量检测方法的建立及验证

目的建立发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)糖蛋白抗原(Gn)的定量双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证,以用于疫苗生产过程中SFTSV糖蛋白抗原含量的监测。方法用SFTSV糖蛋白抗原分别免疫新西兰兔及BALB/c小鼠,制备抗SFTSV多克隆抗体和单克隆抗体。以抗SFTSV多克隆抗体作为包被抗体,经辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体作为酶标抗体,建立SFTSV糖蛋白抗原(Gn)定量双抗体夹心ELISA检测方法,确定该方法的线性范围、定量限,并对该方法的特异性、精密度、准确性、稳定性、适用性进行验证。结果建立的ELISA方法的线性范围为0.125~4.000μg/ml,定量限为0.125μg/ml,线性相关系数R2的平均值为0.994 1;该方法可特异性检测SFTSV病毒株,而与布尼亚病毒属其他病毒、Vero细胞培养上清及其他生产辅料均无交叉反应;该方法检测不同浓度SFTSV样品的变异系数小于15%,回收率在85%~115%之间;该检测试剂于37℃放置3 d对样品进行检测,变异系数小于15%;该方法检测SFTSV原液制备过程中不同阶段样品,随着工艺过程的不断推进,样品中单位蛋白的抗原含量呈上升趋势,可有效反映抗原纯化过程。结论建立了SFTSV糖蛋白抗原(Gn)的定量检测方法,具有较高的广谱性、灵敏度、特异性和稳定性,为疫苗生产工艺过程的质量控制奠定了基础。     

二丁基二硫代氨基甲酸铋的抗氧协同性能

为研究有机铋添加剂的抗氧化性能及与传统抗氧剂复配后的抗氧协同作用,采用薄层油膜微氧化实验考察二丁基二硫代氨基甲酸铋(Bi DDC)与p,p-二异辛基二苯胺(DODPA)在聚-α-烯烃(PAO)合成基础油和150SN矿物基础油中的抗氧协同作用,借助红外光谱定量分析基础油在不同氧化时间下的氧化程度,探讨Bi DDC与DODPA的抗氧协同机制。结果表明:Bi DDC自身具有一定的抗氧化性能,与DODPA复配后,Bi DDC可以起到消除自由基和分解氢过氧化物的作用,可使润滑油中的氢过氧化物分解,而芳胺抗氧剂能够捕捉自由基,控制氧化链的生长;Bi DDC和DODPA复配后,能够降低添加剂的用量,提升润滑油的抗氧化能力,表现出了良好的抗氧协同性能。     

动态p-坚持CSMA/CD协议的统计改进

p-坚持CSMA/CD协议在计算机终端数据发送上有着广泛的应用。针对计算机终端中p-坚持CSMA/CD协议的信道利用率的问题进行研究,为了能更好的利用信道发送数据,提高信道利用率,采用了统计方法中的贝叶斯决策统计理论,通过全概率公式拆分,对p-坚持CSMA/CD协议中的参数p进行动态自适应拟合的一种CSMA/CD协议方法,并进行改进使之有更好的信道利用率。用MATLAB2010a进行模拟仿真实验,得出改进后的自适应p-坚持CSMA/CD协议比静态的p-坚持CSMA/CD协议对信道有高20%左右的利用率。     

螺旋藻中藻胆蛋白和多糖的分离纯化及产品特性

提出一种从螺旋藻中提取纯化藻蓝蛋白和糖蛋白的新型分离工艺。等电聚焦分析结果表明所得到的藻蓝蛋白为电泳纯,等电点为４．３,测定了藻蓝蛋白的氨基酸组成及其红外吸收光谱。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析结果表明所得到的糖蛋白组成均一,其分子量为１３０ｋｄ,测定了螺旋藻糖蛋白的氨基酸组成,红外光谱分析表明螺旋藻糖蛋白含有α－型糖苷连接键。     

N-(p-溴苯基)-2-(p-氯苯氧乙酰基)氨基脲的合成与表征

用 Ｎ － （ｐ － 溴苯基） 三氯乙酰胺与ｐ － 氯苯氧乙酰肼反应,合成了一种新的取代氨基脲, Ｎ － （ ｐ － 溴苯基） － ２ － （ ｐ － 氯苯氧乙酰基） 氨基脲,其结构经 Ｉ Ｒ 、１ Ｈ Ｎ Ｍ Ｒ 和元素分析证实。