A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量HPLC检测方法的验证及应用

目的验证A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量的检测方法。方法采用色谱柱XBridge Amide(4. 6 mm×150 cm,3. 5μm),流动相为乙腈、水、三乙胺(75∶25∶0. 1)的混合液,流速为1 mL/min,柱温为40℃,示差检测器温度为40℃,进样量为50μL。同时验证该方法的系统适用性、特异性、线性范围、精密度、稳定性、准确度及定量限。采用该方法对3个厂家生产的30批A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量进行检测。结果乳糖对照品色谱峰的理论塔板数为8 123,与其他色谱峰的分离度> 1. 5;乳糖对照品及供试品溶液图谱于相应保留时间处可见乳糖峰,阴性对照溶液未见该色谱峰;乳糖浓度在0. 050 03~0. 650 4 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=3. 484 3×10^5X-7. 378 4×10^2,R^2=0. 999 97。批号为Y201409089-1、Y201501002和201410050的3批供试品溶液分别测定6次结果的RSD分别为0. 71%、1. 01%和1. 69%;分别于12个时间点测定结果的RSD分别为0. 25%、0. 38%和0. 58%;乳糖回收率分别为101. 67%、101. 93%、99. 43%,RSD分别为1. 37%、1. 20%、1. 37%。乳糖定量限为0. 4μg。30批A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖含量为8. 29~11. 05 mg/mL。结论该方法具有良好的精密度、稳定性及准确度,可作为A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗中乳糖的检测方法。     

灵芝多糖的液态发酵研究

对泰山灵芝液态发酵灵芝多糖的培养基配方、发酵条件进行了优化选择，并通过分批发酵、补料分批发酵的方式获得了灵芝多糖液态发酵的一系列参数。通过60h的补料分批发酵，灵芝多糖的单位产量达到2．208g／L，为灵芝多糖的工业化发酵生产奠定了基础。     

灰树花多糖Sevage法除蛋白工艺的研究

研究了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺,采用单因素实验确定Sevage试剂添加量、氯仿与正丁醇体积比、脱蛋白次数以及振摇时间对灰树花多糖除蛋白效果的影响,并在单因素实验基础上采用响应面法确定了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺条件:多糖溶液与Sevag试剂体积比3.073∶1,氯仿正丁醇体积比4.016∶1,振摇时间25.59min,脱蛋白率为37.95%,多糖含量为78.32%。     

EM复合菌群产絮凝剂的絮凝性能

EM复合菌群产絮凝剂的絮凝特性的研究结果表明，其对高岭土悬浮液絮凝率可达90％。通过添加适当助剂可将絮凝率提高至98％，而且pH值2-12范围内，絮凝率均可达到92％以上，而且具备良好的热稳定性。对多种实际污废水的絮凝率达85％-96％，进一步证明该絮凝剂有较宽的适用性。并经初步鉴别为酸性多糖物质。     

榛蘑粗多糖提取工艺的研究

对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为料液比1∶25,温度100°C,时间4h,在最佳提取工艺时,榛蘑的多糖提取率为4.37%。对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮—硫酸法测定多糖含量。     

An investigation of the flocculation characteristics of polyacrylamide‐grafted chitosan

To investigate the flocculation characteristics of polyacrylamide (PAM)‐grafted chitosan, a series of PAM‐grafted chitosan copolymer (Chito‐g‐PAM1 to Chito‐g‐PAM4) have been synthesized by ceric ammonium nitrate‐induced solution polymerization technique in nitrogen atmosphere. The flocculation characteristics of the polymer samples (PAM, grafted and ungrafted chitosan) were studied by settling test and jar test methods in the colloidal suspensions of kaolin, iron ore, silica, and bentonite powder. It was found that the settling performance of Chito‐g‐PAM3 is best among the polymer samples. The jar test results indicate that the ungrafted chitosan has better water clarifying performance than both the PAM and grafted chitosan. © 2009 Wiley Periodicals, Inc. J Appl Polym Sci, 2009     

红松松子壳多糖的单糖组成及结构初步分析

采用膜分离技术对红松松子壳热水提取物进行分离纯化,经脱蛋白、脱色后得到总多糖PPSPⅠ-b,通过DEAE-52离子交换纤维素柱层析分离得到纯化组分PPSPⅠ-1,采用气相色谱和红外光谱分析了多糖样品的单糖组成及结构特征。气相色谱分析表明:PPSPⅠ-b主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为3.40∶1.40∶0.79∶7.82∶10.67∶18.35;PPSPⅠ-1主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为0.96∶2.30∶2.97∶10.60∶6.91。红外光谱分析表明,PPSPⅠ-1具有多糖的特征吸收峰。     

超滤在多糖中的应用研究

超滤广泛应用于多糖分离、浓缩、纯化的研究中.介绍了超滤在多糖提取、浓缩中的应用,并对其发展提出了建议.     

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定W135群和Y群脑膜炎球菌多糖中半乳糖和葡萄糖含量

目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(High-performance anion-exchange chromatography with pulsedamperometric detection,HPAEC-PAD)测定W135群和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖中半乳糖和葡萄糖的含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法多糖蛋白结合物原液的混合液经HCl水解处理后,进样CarboPac PA10柱,以氢氧化钠-醋酸钠梯度流洗,脉冲积分安培检测器检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密性及准确性验证,并进行初步应用。结果确定的样品水解条件为以2 mol/L HCl于85℃处理1 h。载体蛋白破伤风类毒素对检测结果无干扰;重复性、日内精密性和不同操作者之间精密性试验结果的RSD均小于5%;准确性试验中葡萄糖和半乳糖的回收率在90%～110%之间。HPAEC-PAD法测定多糖蛋白结合物原液的多糖含量与传统间苯二酚比色法测定结果相当;成品疫苗中的W135群和Y群多糖含量测定结果符合《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》的规定(均≥4μg/剂)。结论 HPAEC-PAD法专属性、精密性和准确性良好,可用于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗中W135群和Y群多糖含量的测定。     

键合纤维素手性固定相的合成及手性拆分

合成了键合型纤维素-（二苯基甲基二氨基甲酸酯,苯基氨基甲酸酯）手性固定相,并用此键合柱在流动相正自己烷／异丙醇下对几种手性化合物进行了拆分,实验结果表明,此手性固定相具有一定的拆分能力。