浒苔多糖的结构、制备与降解研究进展

浒苔多糖作为浒苔的主要功能成分,具有多种生物活性,如免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、降血脂等。但是由于其分子量较大,浒苔多糖具有溶解性差、生物利用率低等缺陷,这极大地限制了浒苔多糖资源的高值化开发和利用。浒苔多糖降解后得到的低分子量产物,在保持了多糖的多种生物活性的基础上,大大提升了其溶解性、生物利用度等,因而浒苔多糖降解产物的制备与活性研究已成为海洋生物资源开发研究领域的热点。目前,浒苔寡糖的制备主要是通过对浒苔多糖的降解实现的,主要方法包括化学降解法、物理降解法和酶降解法等。该研究综述了浒苔多糖的化学组成、结构、提取和纯化方法,并对浒苔多糖降解产物的制备方法和活性等进展进行了总结和展望,以期为浒苔多糖及其降解产物的研究提供理论基础,为推动海洋藻类多糖资源的高值化利用和开发提供参考。     

仙人掌多糖提取纯化及其抗凝血活性研究

对仙人掌多糖的提取、纯化及其抗凝血活性进行研究,并采用响应面分析法对提取工艺进行优化。结果表明：曲面回归方程拟合性好;优化工艺为提取温度75℃、提取时间3.63h,液料比3.42:1(mL/g),提取2 次,粗多糖得率为0.655%(湿基);粗多糖经阴离子琼脂糖离子交换层析和凝胶层析分离纯化共得到3 个多糖组分WSP1、WSP2a 和WSP3,重均分子量分别为2.32 × 106、1.24 × 106 和7.92 × 106。对氨基苯甲酸(PMP)衍生化高效液相色谱法检测表明：WSP1 主要成分为半乳糖;WSP2a 由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸组成,含量(质量分数)分别为6.3%、32.3%、12.9%、1.5%、4.8%、37.1%、0.7%、4.4%;WSP3 成分主要有阿拉伯糖、半乳糖和木糖以及少量鼠李糖、甘露糖、糖醛酸。纤维蛋白原转化纤维蛋白的抑制实验初步表明,仙人掌多糖组分WSP2a 和WSP3 具有抗凝血活性。     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

可溶性大豆多糖改善左旋肉碱诱导的小鼠小肠首过代谢

目的：研究大豆可溶性多糖（soybean soluble polysaccharides,SSPS）对左旋肉碱喂养小鼠的小肠代谢、氧化应激和炎症相关蛋白表达的影响。方法：24 只雄性昆明小鼠随机分成正常组、左旋肉碱组、SSPS组3 个实验组。连续饲喂56 d后处死小鼠,测定小鼠小肠内P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）、多药耐药性蛋白（multidrug resistanceproteins,MRP）1、MRP3、白细胞介素（interleukin,IL）-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）质量浓度和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶（uridine diphosphate glucuronosyltransferase,UGT）活力、硫酸基转移酶（sulfotransferase,SULT）活力、丙二醛（malondialdehyde,MDA）浓度等的变化。结果：与正常组相比,左旋肉碱组小鼠小肠具有更高的P-gp和MRP3质量浓度（P＜0.05）;而SSPS可使左旋肉碱喂养小鼠小肠内P-gp质量浓度显著降低（P＜0.05）,且使MRP3质量浓度轻微下降,表明SSPS可有效抑制左旋肉碱诱导的首过代谢。此外,SSPS与左旋肉碱联合处理可有效避免小鼠小肠组织MDA浓度的增加、超氧化物歧化酶活力的下降和·OH清除能力的减弱,预示SSPS可抑制长期摄入左旋肉碱诱导的氧化应激。然而,所有小鼠小肠组织的SULT和UGT活力以及IL-1、IL-6、TNF-α质量浓度没有显著变化（P＞0.05）,表明过量左旋肉碱和SSPS处理不会影响II相代谢,也不会导致炎症反应。此外,代谢组学分析表明,SSPS可抑制长期过量摄入左旋肉碱导致的能量代谢及脂质代谢紊乱。结论：SSPS可以通过调控氧化应激和代谢紊乱而有效预防左旋肉碱诱导的小鼠小肠首过代谢。     

藤茶多糖的抗氧化作用研究

目的: 探讨藤茶多糖的体内外抗氧化作用。 方法: (1)测定藤茶多糖(Ampelopsis Grossedentata polysaccharide,AGP)的还原能力;(2)测定AGP在化学模拟体系、体外血清的抗活性氧能力;(3)测定AGP对小鼠肝匀浆、小鼠肝线粒体MDA生成的影响;(4)用分光光度法测定H2O2诱导小鼠红细胞溶血和Fe2+-VC诱导的肝线粒体肿胀程度来研究AGP的抗氧化效果;(5)小鼠随机分成对照与AGP组,腹腔注射AGP 150mg/kg•bw•d 12d后,测定小鼠血清抗活性氧能力及肝组织MDA含量。 结果: AGP具有一定的还原能力,一定浓度范围内具有显著的体外抗活性氧能力并能抑制小鼠肝组织及肝线粒体MDA的生成,可减少红细胞诱导溶血和肝线粒体肿胀程度,对小鼠体内肝组织MDA生成的抑制作用显著。 结论: AGP一定浓度范围内具有抗氧化作用。     

桦褐孔菌纯化多糖体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法得到桦褐孔菌发酵粗多糖,将粗多糖过DEAE-52纤维素柱分离纯化得到两种多糖(EIOP1、EIOP2),本文以α-葡萄糖苷酶抑制活性、正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞的单位细胞葡萄糖消耗量为主要指标,探究桦褐孔菌两种纯化多糖不同浓度(10、20、40、80、160和320 μg/mL)的降血糖活性,其中α-葡萄糖苷酶抑制活性以阿卡波糖作为阳性对照,葡萄糖消耗实验以二甲双胍作为阳性对照。结果表明,EIOP1、EIOP2的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照组阿卡波糖与粗多糖,IC₅₀值分别为39.18、29.87 μg/mL。EIOP1在浓度为80 μg/mL时,对HepG2细胞的葡萄糖消耗量极显著高于对照组,促进效果最好,比对照组提高了30.62%(P<0.01);EIOP2在浓度在40 μg/mL时,葡萄糖消耗量极显著高于对照组,比对照提高了75.99%(P<0.01);对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗实验发现EIOP1在浓度为40 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了30.00%,EIOP2在浓度为80 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了90.49%,高于Met组(P<0.01)。因此,桦褐孔菌纯化多糖对正常HepG2细胞和胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗均具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于粗多糖。     

键合纤维素手性固定相的合成及手性拆分

合成了键合型纤维素-（二苯基甲基二氨基甲酸酯,苯基氨基甲酸酯）手性固定相,并用此键合柱在流动相正自己烷／异丙醇下对几种手性化合物进行了拆分,实验结果表明,此手性固定相具有一定的拆分能力。     

环保型絮凝剂处理自来水的实验研究

用天然高分子多糖（CTS）、聚合氯化铝（PAC）和助凝剂（改性物质P）等制备出一种环保型自来水复合絮凝剂,与传统的自来水絮凝剂PAC相比,这种絮凝剂使自来水的出水浊度、铝离子质量浓度和絮凝剂的药剂成本等分别下降了4．14％,40．3％和6．4％,具有明显的经济和环境效益。     

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定W135群和Y群脑膜炎球菌多糖中半乳糖和葡萄糖含量

目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(High-performance anion-exchange chromatography with pulsedamperometric detection,HPAEC-PAD)测定W135群和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖中半乳糖和葡萄糖的含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法多糖蛋白结合物原液的混合液经HCl水解处理后,进样CarboPac PA10柱,以氢氧化钠-醋酸钠梯度流洗,脉冲积分安培检测器检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密性及准确性验证,并进行初步应用。结果确定的样品水解条件为以2 mol/L HCl于85℃处理1 h。载体蛋白破伤风类毒素对检测结果无干扰;重复性、日内精密性和不同操作者之间精密性试验结果的RSD均小于5%;准确性试验中葡萄糖和半乳糖的回收率在90%～110%之间。HPAEC-PAD法测定多糖蛋白结合物原液的多糖含量与传统间苯二酚比色法测定结果相当;成品疫苗中的W135群和Y群多糖含量测定结果符合《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》的规定(均≥4μg/剂)。结论 HPAEC-PAD法专属性、精密性和准确性良好,可用于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗中W135群和Y群多糖含量的测定。     

红松松子壳多糖的单糖组成及结构初步分析

采用膜分离技术对红松松子壳热水提取物进行分离纯化,经脱蛋白、脱色后得到总多糖PPSPⅠ-b,通过DEAE-52离子交换纤维素柱层析分离得到纯化组分PPSPⅠ-1,采用气相色谱和红外光谱分析了多糖样品的单糖组成及结构特征。气相色谱分析表明:PPSPⅠ-b主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为3.40∶1.40∶0.79∶7.82∶10.67∶18.35;PPSPⅠ-1主要由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为0.96∶2.30∶2.97∶10.60∶6.91。红外光谱分析表明,PPSPⅠ-1具有多糖的特征吸收峰。