纳豆菌发酵扇贝裙边制备ACE抑制肽的工艺优化

为了开发安全、无副作用的食物源ACE(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,本文采用纳豆菌(Bacillus natto)发酵扇贝裙边,以多肽含量和ACE抑制率为指标,通过单因素试验对发酵时间、发酵温度、接种量和液料比等工艺参数进行研究,并采用Box-Behnken响应面分析法优化工艺条件,建立二次多项数学模型。结果表明回归模型能较好地反应各因素水平与响应值之间的关系,各因素对多肽含量的影响顺序为时间液料比接种量温度,各因素对ACE抑制率的影响顺序为时间液料比接种量温度,纳豆菌发酵扇贝裙边制备ACE抑制肽的最佳工艺条件如下:发酵时间38.4 h,发酵温度39.9℃,接种量6.0%,液料比22.5。在上述发酵条件下制备的冻干品多肽含量高达238.91 mg/g,ACE抑制率达到83.70%。本文研究结果为扇贝加工废弃物的高值化利用和食物源ACE抑制肽的研究与开发提供了理论依据。     

发光菌法测定医疗机构废水生物毒性

利用费舍尔弧菌为菌种,结合粪大肠菌群的测定,对医疗机构排放的废水进行综合测试。监测结果均符合相应的标准限值要求,但具有一定的生物毒性,对发光菌具有一定的生物抑制率。传染病和结核病医疗机构的废水生物抑制率最高,达44.7%和49.8%;中医医疗机构废水的抑制率最低,为8.1%。实验结果表明,发光菌法可应用于医疗机构废水生物毒性的测定。     

预处理对酶解过程中胶原ACE抑制肽释放的影响

本文探究了酸、碱、热、超声、超高压五种预处理方式对胶原蛋白制备ACE抑制肽的影响。胶原蛋白经预处理后采用碱性蛋白酶酶解制备水解液,对水解液的水解度、ACE抑制率和分子量分布情况进行测定,结果显示碱和超声处理组水解液的水解度、ACE抑制率均高于未处理组,表明这两种预处理方式可能利于胶原三螺旋区位点的暴露;DSC和红外分析预处理后的胶原蛋白结构显示,碱处理改变了胶原蛋白构象特点,影响非共价键的平衡,胶原三螺旋区域的位点被充分暴露,但保持了亚基的完整性,超声处理破坏了胶原螺旋区的共价交联,暴露出更多疏水性位点,利于碱性蛋白酶酶解;而酸、热和超高压处理主要影响胶原非螺旋区,无法在酶解过程中促进胶原ACE抑制活性肽段的释放。     

银条多酚氧化酶特性及控制的研究

对银条多酚氧化酶(PPO)的酶学特性及控制进行研究。结果表明：银条PPO 的最适反应时间为2.0min,最适pH 值为5.0,最适温度为30℃,银条PPO 的热稳定性较差。抗坏血酸(VC)、L- 半胱氨酸(L-cys)、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠等对PPO活性均有极显著地抑制作用;在0.05g/100mL 柠檬酸+0.05g/100mL 抗坏血酸+0.05g/100mLL- 半胱氨酸复合化学抑制剂作用条件下,对银条PPO 的酶活性抑制率可达93.5%。     

鼠李糖乳纤菌YHOC137及其发酵乳的体外抗致突变作用

乳酸菌及其代谢产物具有优良的生理功能.本文研究了一株产胞外多糖的鼠李糖乳杆菌L.rhamnosus YHOC137对诱变剂的吸附能力,利用艾姆斯实验模型考察了L.rhamnosus YHOC137发酵乳、发酵乳丙酮提取物和产物胞外多糖的体外抗致突变作用.诱变剂吸附实验表明,YHOC137活细胞对2-硝基芴(2-NF)和4一硝基喹啉-N-氧化物(4NQNO)的吸附率分别为38%和55%,YHOC137死细胞对2-NF和4NQNO的吸附分别为25%和50%.YHOC137发酵牛乳能够显著抑制由于2-NF和4NQNO导致的鼠伤寒沙门氏菌的回复突变(P＜0.05),抑制率在38.5%～54.3%之间.L.rhamnosus YHOC137发酵牛乳丙酮提取物对回复突变的抑制率在8.0%～35.3%之间;L.rhamnosus YHOC137胞外多糖对2-NF和4NQNO导致的回复突变的抑制率分别为12.8%和46.0%.     

梅花鹿胎盘多肽体外抗氧自由基及抗油脂氧化性能的研究

研究了鹿胎盘多肽的抗氧化性.鹿胎盘多肽具有清除羟基自由基(·OH)、超氧自由基(O2-·)和H2O2的能力,同时时油脂有一定的抗氧化作用.随着多肽浓度的增大,抗氧化能力进一步增强.当鹿胎盘多肽浓度达到200μg/mL时,对·OH、O2,'->·、H2O2的抑制率分别为42.4%、73.7%、65.2%.在猪油贮藏的第7d,加入200、300μL浓度为200μg/mL的鹿胎盘多肽,其抗氧化作用比0.02%的BHT分别高28.83%、33.95%.     

非还原性糖对丙烯酰胺形成的抑制作用

目的建立丙烯酰胺（AcA）生成的水相模型,研究非还原性糖对其形成的抑制作用。方法根据AcA的形成机理用天门冬酰胺和葡萄糖在高温下反应生成高含量的AcA,添加3种还原性糖（果糖、半乳糖、麦芽糖）和5种非还原性糖（木糖醇、甘露醇、海藻糖、蔗糖、山梨醇）研究抑制效果。结果确定了生成AcA的最佳条件为0．1mmol天门冬酰胺（0．015g）、0．1mmol葡萄糖（0、020g）、蒸馏水（10μl）于干燥箱中160℃反应30min。甘露醇、山梨醇、木糖醇对AcA生成的抑制率分别为43％、16％、6％,海藻糖对AcA的抑制率为60％。结论非还原性糖中除蔗糖外都对AcA的形成有抑制作用,海藻糖和甘露醇是最佳抑制性添加剂。     

辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制研究

探讨辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用,为开发辣木叶天然胰脂肪酶抑制剂提供理论依据。在单因素试验的基础上,用正交试验优化提取条件,研究辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制作用,并结合Dixon图和LineweaverBurk图探讨其抑制类型。结果表明最佳提取条件为:料液比1∶50(g/mL)、提取液乙醇浓度70%、超声功率400 W、超声处理时间600 s、提取温度50℃;该条件下辣木叶粗提物对胰脂肪酶活力的抑制率为79.15%;辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制。辣木叶提取物对胰脂肪酶的活性有明显抑制作用。     

碳量子点作为p53基因载体用于基因治疗

合成了一种绿色荧光碳量子点(CD),使用分子量为25 kDa的支化聚乙烯亚胺修饰CD表面,通过静电作用得到CD-聚乙烯亚胺(PEI)体系,该体系具有良好的生物相容性和稳定的光学性质。以CD-PEI为载体,实现抗肿瘤基因p53的递送。通过Zeta电位和紫外光谱的变化以及细胞成像图可知,p53质粒成功与CD-PEI体系结合。分别用CD-PEI/p53纳米体系孵育正常细胞和肝癌细胞,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验可知该体系对肝癌细胞增殖具有较强的抑制效果,而对正常细胞的毒性较小,故可用于肝癌细胞的治疗。同时,与传统PEI/p53组比较,CD-PEI/p53纳米体系具有更高的转染效率和增殖抑制率,其转染效率是传统PEI/p53组的1.6倍,增殖抑制率比传统PEI/p53组的高12%。     

酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷农药残留的最佳条件研究

采用酶抑制分光光度法快速检测蔬菜中有机磷农药残留,以抑制率为指标,研究了抑制时间、抑制温度、底物(碘化硫代丁酰胆碱)加入量和酶液加入量4个因素对检测条件的影响,通过正交试验和极差分析,得出4因素的主次关系为抑制时间>底物量>酶液量>温度,确定了蔬菜中有机磷农药残留的最佳检测条件为抑制时间15min、抑制温度35℃、底物加入量100μL、酶液加入量100μL。