血红蛋白类红细胞代用品理化性质的色谱分析

目的 建立血红蛋白类红细胞代用品的色谱分析方法。方法 通过高效液相系统与二极管矩阵检测器、多角度激光散射检测器和蒸发光散射检测器进行组合,检测聚乙二醇(PEG)化牛血红蛋白(PEG-bHb)的色谱纯度、相对分子质量分布和磷脂含量。结果 PEG-bHb为多位点不均一修饰的混合物,数均相对分子质量为1.211×10~5,重均相对分子质量为1.347×10~5,残余磷脂含量低于1μg/ml。结论 色谱分析方法是进行血红蛋白类红细胞代用品理化性质分析的适宜方法。     

膨胀床吸附高效纯化牛血红蛋白

探索了将膨胀床吸附层析应用于动物血液蛋白质的提取,尝试了直接从牛血红细胞破碎液中纯化血红蛋白.对该过程采用的吸附介质及pH值、离子强度、温度、洗脱条件等因素对高铁血红蛋白生成、产品纯度以及回收率等的影响进行探索.选择了最佳吸附介质Streamline SP,确定了优化的吸附条件为：吸附过程选用离子强度为10mmol•L^-1的磷酸盐缓冲系统,进料线流速3.3cm•min^-1,进料pH值6.6,改变缓冲液pH值为7.2进行洗脱,操作温度4℃.该技术省去了离心去除碎片步骤,有效地控制了纯化过程中无载氧能力的高铁血红蛋白的生成,动态吸附容量达到70～75mg•ml^-1,只经一步操作产品纯度达电泳纯,高铁血红蛋白含量仅为5.4％.与现有的膜过滤-层析纯化方法相比,膨胀床吸附法操作时间短,提取收率高,产品活性损失小,是一种简捷、高效、适合工业放大的天然血红蛋白制备方法.     

酶催化荧光法测定盐酸氯丙嗪

基于在pH 7.87的Tris-HCl的缓冲溶液中,利用盐酸氯丙嗪对血红蛋白模拟酶催化荧光体系的猝灭作用,建立了酶催化荧光法测定盐酸氯丙嗪的新方法.研究了该猝灭体系的最佳实验条件及动力学行为.测定的线性范围为2.11×10-8 ～5.63×10-5 mol/L,检出限为2.29 × 10-9 mol/L.对浓度为4.2...     

牛血红蛋白催化罗丹明6G褪色光度法测定过氧化氢

基于牛血红蛋白(Hb)具有模拟过氧化氢酶的催化特性,建立了一种催化褪色光度法测定H2O2的新方法.研究了pH值、KI、Hb、罗丹明6G用量及常见离子等因素对体系的影响.在526nm处,H2O2的浓度在9.72×10-7～1.94×10-5mol/L范围内与吸光度降低值呈良好的线性关系,相关系数为0.9923,方法的检出...     

血液在可见光及近红外范围内随温度变化的动态吸收特性

人体病变组织的光热效应是皮肤病激光疗法与光学诊断的基础,深入理解血液光吸收特性随温度变化的动态规律对利用激光来治疗葡萄酒色斑(PWS)等血管性疾病具有重要意义。设计并搭建了血液动态吸收光谱实验测量系统,利用常温水浴将血液样品缓慢加热至80℃(0.5～1.0℃·min^-1),每间隔5℃为单位对血液的光吸收特性进行测量,得到了血液在可见光及近红外范围400～1000 nm内随温度变化的动态吸收光谱。实验结果表明,加热过程中血液光吸收特性变化可分为4个阶段:常温至50℃血液吸收光谱基本无变化;50～58℃吸收特性曲线变平缓, 630 nm处吸光度增加为常温下的2倍;随着温度的进一步上升,血液光吸收特性大幅度增加;65℃后略有增加直至不再变化。整个加热过程中,血液吸光度均在970 nm处存在峰值,并且吸收性能随着温度的上升有所增加,这为今后使用该波段治疗较深的顽固病变血管奠定了坚实的基础。     

现代五项高原训练生理生化指标监控的研究

在八一现代五项队为备战九运会进行高原训练期间,利用某些生理生化指标进行训练负荷的监控.结果发现:与平原相比,队员血红蛋白值高原训练期间显著增加,经适应性训练后,前三周的训练量渐增,但血红蛋白保持上升.血尿素值平原与高原没有差异,血尿素变化与训练负荷有关.女队员瘦体重下降.通过生理生化指标的监测有助于了解机体对训练负荷的承受情况及机体的恢复状况,探索高原训练规律,提高训练效率.     

透明颤菌血红蛋白基因和λ噬菌体裂解基因在生产PHB重组大肠杆菌中的同时表达

Exogenous Vitreoscilla globin gene (vgb), lytic genes of phage γ with S amber mutation (S^-RRz) and poly(fl-hydroxybutyrate) (PHB) biosynthetic genes (phbCAB) were cloned into a same Escherichia coil cell,simultaneously or respectively. Six novel strains containing phbCAB and vgb with or without lytic genes were constructed. Strain VG1 (pTU14), in which vgb, phbCAB and S-RRz could all be successfully expressed, has superior characteristics in cell growth and PHB accumulation, while the results of strains containing vgb and phbCAB without S- RRz were not better than that of strains harbored phbCAB only. The simultaneous expression of vgb and S-RRz in the recombinant VG1 (pTU14) showed a great potential for low-cost production of PHB.     

测定尿液中血红蛋白含量的共振散射新方法

在酸性介质中,锌试剂和血红蛋白通过静电引力作用生成离子缔合物,从而导致体系的共振散射信号增强,据此建立了一种简单、灵敏、快速测定血红蛋白含量的共振散射光谱新方法。在优化的实验条件下,血红蛋白质量浓度在0.04~1.20μg/m L范围内与体系共振散射强度的增加值(ΔI)呈良好的线性关系(λ=605 nm),线性回归方程为ΔI=113.43ρ-0.517 0(μg/m L),相关系数r=0.998 3,方法检出限为0.02μg/m L。将该方法应用于尿样中血红蛋白含量的检测,回收率为93.40%~106.66%,结果令人满意。     

生物大分子印迹聚合膜的表征及电化学应用

使用扫描电子显微镜(SEM)、红外图谱(IR)、循环伏安(CV)、差示脉冲循环伏安(DPV)对血红蛋白聚合物膜修饰电极进行了表征。DPV测试表明血红蛋白的浓度和峰电流分别在低浓度和高浓度下均有良好的线性关系,低浓度下满足线性回归方程ip(μA)=13.05-3.58C(μM),相关系数R为-0.9960。检出限为2.7×10-9M,线性范围8.0×10-9~7.1×10-7M;高浓度下满足线性回归方程Ip(μA)=10.56-0.1001C(μM),相关系数R为-0.9957。检出限为5.7×10-7M,线性范围1.7×10-6~1.4×10-5M。可用于构建生物分子印迹的电化学传感器。     

血红蛋白作催化剂茜素蓝S褪色法测定过氧化氢

H2O2能够氧化茜素蓝S使之褪色,而模拟酶——血红蛋白对其具有催化作用。据此建立了一种以茜素蓝S为指示剂的过氧化氢——茜素蓝S——血红蛋白酶催化反应体系测定痕量H2O2的新方法。研究了反应的最佳条件,体系的酸度为pH=10.1的NH3-NH4Cl缓冲溶液,最大吸收波长为580nm。该法的线性范围为2.0×10-7~7.5×10-5mol/L,检出限为1.3×10-8mol/L,表观摩尔吸光系数为1.7×104L/(mol·cm)。该方法可用于雨水及消毒水中H2O2的测定。结果今人满意。该方法简单、灵敏、选择性好,易于操作。