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节杆菌LF-Tou2葡萄糖基转移酶是控制絮凝剂聚糖合成的酶。通过对细胞超声破碎使酶释放,经Sephadex G200凝胶色谱和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱对酶进行了纯化。对酶学特性进行了分析,并用5种化学修饰剂对酶分子中5种不同氨基酸残基与催化活性之间的关系进行了研究。结果表明:该酶的分子质量为14315Da;样品中w(α-螺旋)=31.7%,w(β-转角)=34.1%,w(无规卷曲)=34.2%。Km为2.752μmol,Vmax为58.056μmol/min;Mn2 是酶活性强有力的激活剂,Fe2 次之。酪氨酸和二硫键是酶分子的结构基团,色氨酸、巯基和组氨酸是酶活力的必需基团,在必需基团中色氨酸最关键。 相似文献
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硬脂酸修饰Lipolase脂肪酶的性能 总被引:1,自引:0,他引:1
采用N-羟基琥珀酰亚胺活化法用硬脂酸对Lipolase脂肪酶进行了化学修饰。研究了Lipolase脂肪酶的水解活力和酯化活力,重点研究了界面催化活性和表/界面张力。实验结果表明:与未修饰酶相比,修饰Lipolase的水解活力略有下降,但正己烷中的酯化活力和界面水解活力均明显提高;修饰Lipolase降低表面张力与界面张力的能力提高。用LB技术制备Lipolase的单分子层膜,发现修饰Lipolase的∏-A曲线上移,表明修饰Lipolase更易在表面形成单分子层膜。可见Lipolase脂肪酶经硬脂酸修饰后界面活性提高、有利于在有机相或两相界面催化化学反应。 相似文献
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目的 考察聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化学修饰的重组L-门冬酰胺酶(recombinant Lasparaginase, rL-ASP)的抗肿瘤活性。 方法 PEG 化学修饰rL-ASP, 获得的化学修饰酶(polyethylene glycolmodified recombinant L-asparaginase, rL-ASP-PEG)利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)观察其分子大小变化, 四甲基偶氮唑盐(3-(4, 4-dimcthylthioazol-2-yl)-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide, MTT)法和流式细胞仪(flow cytometer, FCM)检测rL-ASP-PEG 对体外培养的小鼠白血病细胞P338增殖作用的抑制作用, 腹腔给药考察rL-ASPPEG对小鼠移植性实体瘤P338 抑瘤效果, 透射电镜(transmission electron microscopy, TEM)观察rL-ASPPEG引起的肿瘤组织超微病理变化。 结果 SDSPAGE显示, rL-ASP-PEG 的分子量大于rL-ASP;MTT实验表明, rL-ASP-PEG 能抑制体外培养的小鼠P388白血病细胞的增殖, 半数有效浓度(inhibitory concentration50 %, IC50)为2.056 IU·ml-1。FCM 结果表明, rL-ASP-PEG 主要将肿瘤细胞P388 抑制在G0 +G1期,S 期细胞减少。DBA/2 荷瘤小鼠的抑瘤实验表明rL-ASP-PEG 对移植性实体瘤P338 有显著抑制作用, P 值<0.001。超微病理切片显示rL-ASP-PEG引起肿瘤组织坏死。 结论 rL-ASP 经过聚乙二醇化学修饰后, 具有肿瘤抑制作用。 相似文献
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<正>金属表面修饰,是一种有效的提高耐蚀性的手段。化学修饰同电化学修饰相比,操作简便,节能,而且实用性强,具有实际推广的意义。 钛酸酯是由美国Kenrich石油化学公司开发的一类以Ti为中心元素的新型偶联剂。它有比较独特的分子结构,一端能与无机物表面的羟基反应,生成牢固的化学键,另一端能与有机物发生交联。由于钛酸酯的这一特点,其应用范围正在不断扩大,在涂料、粘合剂、塑料和橡胶等方面都得到了广泛应用。Sugerman和SalVatore研究了钛酸酯在水基和高固涂料中的耐蚀性能,探讨了烷基钛酸酯与金属表面清漆耐蚀性的关系。Yoshitaka等研究了α-Fe_2O_3经钛酸酯修饰后表面性质的变化,并初步探讨了钛酸酯与金属的成键方式。总之,钛酸酯的作用愈来愈受到重视。 相似文献
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利用铁氰化钾和硝酸铜为原料沉淀法制备铁氰化铜(copper hexacyanoferrate,CuHCF),三聚氰胺高温热解和超声剥离法合成类石墨相氮化碳(g-C3N4)纳米片。将所制备的CuHCF和g-C3N4超声分散到含Nafion的乙醇溶液中,得到了CuHCF/Nafion/g-C3N4纳米复合物。利用扫描电子显微镜、X射线衍射仪和比表面积检测仪对所制备的样品进行结构表征。采用滴涂法将该纳米复合物修饰到玻碳电极表面,得到CuHCF/Nafion/g-C3N4/GCE。研究发现:该修饰电极对水合肼具有良好的电催化氧化作用。在优化实验条件下,当水合肼的浓度介于10~1?100?μmol/L时,其催化氧化峰电流与浓度具有良好的线性关系,水合肼检测限低至1?μmol/L。该传感器具有良好的选择性、重复性和稳定性。 相似文献
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