Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数

[目的[采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数.[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数.[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999.nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝.[结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据.     

不同种植季节下水稻株高遗传分析

[目的]对不同种植季节下水稻株高进行遗传分析.[方法]选择株高差异大的3个亲本CB1、CB4和CB7,配制CB1×CB4和CB7×CB4组合,建立相应的P1、F1、P2、B1、B2、F2群体,将其分为中、晚2个生产季节种植,考察了株高性状.利用主基因+多基因混合遗传模型理论的Akaike信息准则(AIC)在B1、B2、F2代中鉴定影响数量性状的主基因存在与否,主基因存在时通过分离分析估计主基因和微效基因的遗传效应及所占总变异的分量.[结果]株高在所有2个季别B1、B2、F2中均符合1对加性主基因+加-显性多基因遗传模式,主基因遗传率为38.63%～78.53%,多基因遗传率为1.72%～36.04%,总基因型遗传率为45.52%～92.93%;2个遗传群体2季别下株高主基因加性效应值d分别为-4.56、-9.16、-7.19和-9.38,表明主基因加性效应会降低株高性状的表达.[结论]水稻茎粗性状的遗传率受种植季别及所配组合的影响明显.     

小麦NBS类序列的分离与特征分析

[目的]获得小麦近等基因系TcLr24中NBS类抗病基因同源序列.[方法]利用已克隆植物抗病基因NBS序列中的保守结构"P-loop"和"GLPL"合成简并引物,以小麦近等基因系TcLr24基因组DNA为模板进行PCR扩增.[结果]得到13条具有连续ORF的抗病基因类似物序列,包括P-loop、Kinase-2、Kinase-3a、GLPL抗病基因所共有的保守结构,相应推测的氨基酸序列间的相似性系数在36.1%～98.3%,同时对分离的RGAs的氨基酸序列和5个已克隆植物NBS的氨基酸序列进行聚类分析表明,与Xal、RPS2亲缘关系较近,而与Lr21亲缘关系较远.[结论]TcLr24中NBS类RGAs可能会有与Lr21不同机制的抗病功能.     

髓系白血病-1的基因研究进展

抗凋亡基因髓样细胞白血病—1( MCL-1)属bcl-2基因家族中成员之一,其表达产物MCL-1蛋白在细胞凋亡调节与血液系统恶性肿瘤的发病过程中起重要作用。文章就MCL-1基因及MCL-1蛋白的特点、MCL-1蛋白在血液系统恶性肿瘤中的作用、MCL-1基因、蛋白与其他凋亡调节因子关系的研究进展进行综述。     

SCIRR10截短体真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,探讨SCIRR 10蛋白的功能位点.方法:PCR扩增出SCIRR 10蛋白的3个功能截短体表达DNA序列,构建3种真核表达质粒载体pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-145aa)、pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-90aa)和pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-70aa).将3个表达载体质粒转染到COS-7细胞中,应用Western blotting 方法检测3个蛋白截短体的表达情况.结果:3个被截短的SCIRR 10蛋白相对分子质量分别为18 800、12 800和10 700.在COS-7细胞中可以成功表达3个SCIRR 10蛋白截短体.相对3个SCIRR 10截短体蛋白的表达量,β-tubulin蛋白无明显变化.结论:成功构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,通过此系统获得有生物活性的3个SCIRR 10截短体蛋白.     

食品中幽门螺杆菌荧光PCR快速检测方法的建立及评价

目的:建立一种快速、特异、灵敏的幽门螺杆菌检测方法,并对方法进行评价,为快速、准确、有效检测幽门螺杆菌方法的建立提供依据.方法:以尿素酶基因序列为靶位点,用Primer Express 3.0软件设计引物及探针,经Blast软件对相似序列搜索后,筛选出一套最优与常见致病菌无交叉反应的引物;分别用食品中常见致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、沙门菌和空肠弯曲菌DNA进行特异性实验;将计数过的幽门螺杆菌菌悬液与牛奶样品混合液,梯度稀释后分别提取DNA进行荧光PCR扩增,确定检测方法的灵敏度;对人工污染幽门螺杆菌的生奶及生肉样品进行检测验证方法的可行性.结果:利用尿素酶基因设计的引物及探针仅对幽门螺杆菌有扩增曲线,而其他对照以及阴性对照均未有明显扩增曲线;能够对生奶及生肉中污染的幽门螺杆菌进行有效扩增;设计的引物对幽门螺杆菌的检测敏感性可达到3 CFU·mL-1,检测可以在4 d内完成.结论:荧光PCR方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中污染的幽门螺杆菌.     

金川江润香山缘

清高宗乾隆皇帝曾自我总结一生有＂十全武功＂,其中＂乾隆两征金川＂就占了两个。从小就很喜欢听关于乾隆打金川的故事,在我们生命里潜伏的文化基因让我们对故乡曾经经历的这段战争历史有着浓厚的探知情结。而在祖辈们相传的许多故事中,北京有个＂金川村＂更是一直发我们去揭开这个说法的真实面纱。     

超声微泡对pEGFP质粒转染小鼠损伤面神经的促进作用

目的：探讨超声微泡介导基因转染面神经的可行性及有效性。方法：建立小鼠面神经损伤模型,以增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP）为标记基因。将48只小鼠随机分为6组：空白组（A组）、脂质体＋质粒组（B组）、微泡＋质粒＋超声组（C组）、微泡＋质粒组（D组）、超声＋质粒组（E组）、单纯质粒组（F组）。将小鼠面神经损伤后,局部注射...     

氡对大鼠BALF细胞基因甲基化和血清肿瘤标志物的影响

研究不同剂量氡暴露对大鼠基因甲基化和血清肿瘤标志物影响,探讨其在氡致肺癌早期诊断中的价值和意义.以HD-3型多功能生态氡室模拟不同浓度氡及其子体水平,30只染氡大鼠随机分为5组,即对照组、30工作水平月(WLM)组、60 WLM组、90 WLM组、120 WLM组,每组6只;用甲基化特异性PCR (MSP)方法,检测各...     

放射性工作人员外周血CDKN1A基因表达水平调查

采用荧光实时定量RT-PCR技术,对某厂放射性工作人员外周血CDKN1A基因mRNA水平进行调查。结果表明,与对照组相比,放射性工作人员CDKN1A基因mRNA水平差异不显著;外周血白细胞数及分类差异不显著;CDKN1A基因表达水平Ct值约是-βactin的1.6倍。