Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液蛋白成分分析

目的 对本公司研发的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液进行蛋白成分分析及鉴定。方法 按照疫苗生产工艺,应用NBS篮式生物反应器生产单价脊髓灰质炎病毒原液,经超滤浓缩及分子筛和阴离子交换两步柱层析纯化方法,收集并灭活蛋白峰。透射电镜下观察病毒形态及大小;ELISA方法检测宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)及残留牛血清白蛋白含量;HPLC法分析单价灭活病毒纯化液纯度;液相色谱(liquid chromatography,LC)与电喷雾电离质谱(electrospray ionization-mass spectrometry,ESI-MS)相结合的技术鉴定样品中所含蛋白成分。结果 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化液中可见球形病毒颗粒,直径25~30 nm;HCP、残余牛血清白蛋白含量分别低于50 ng/ml、2.5μg/ml;纯度大于95%;单价脊髓灰质炎病毒样品中含有相应血清型的脊髓灰质炎病毒基因组编码蛋白,且相应病毒蛋白成分数据库匹配相对分值在所含蛋白组分中均最高。结论 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒液经纯化后,有效去除了杂质蛋白保留了病毒蛋白组分,单价病毒纯化液病毒蛋白成分明确,纯度较高,为后续该疫苗的研发与生产提供了参考。     

Box-behnken设计优化黄刺玫果总黄酮纯化工艺研究

目的:研究大孔树脂纯化黄刺玫果总黄酮的工艺条件。方法:在单因素实验的基础上,采用Box-behnken设计优化纯化工艺,以总黄酮回收率、总黄酮纯度以及总评归一值为指标,考察上样流速、上样浓度和解吸液浓度3个因素对纯化效果的影响。结果:获得了大孔树脂D101纯化黄刺玫果总黄酮的最优条件:提取液100mL以3.0mg/mL的浓度、2.8BV/h的流速进行上样,用3BV的50%乙醇进行解析,解吸流速为3BV/h,此工艺的的平均回收率为91.27%,经纯化后提取液中总黄酮含量从3.72%提高到50.89%。结论:通过Box-behnken设计优化获得的纯化工艺操作简便,稳定可靠,为黄刺玫果总黄酮的开发提供理论支持。     

GBX系列配液罐

南京金口机械制造有限公司暨江苏金口制药设备有限公司拥有D1、D2类压力容器特种设备制造许可证(TS2232399-2013),专业生产各种制药容器。公司生产的配液罐有多种类型,立式单层储罐、立式单层配液罐、保温储罐、保温加热储罐、高位罐、纯化水储罐、注射水储罐及各种压力容器等。根据工艺条件及客户需要,可做成多种形式。     

葛根素药理学活性及分离纯化的研究进展

葛根素是豆科植物野葛的主要有效成分,是评价葛根的主要质量评价指标。文章主要论述了葛根素的主要理化性质及其药理学活性,同时系统对近年来葛根素提取、分离纯化、等方面的研究进展进行综述,以期为更好地开发利用葛根资源提供参考。     

重组蛋白TAT-NLS-Nkx6.2在大肠杆菌的表达纯化及活性测定

目的:构建重组基因TAT-NLS-Nkx6.2的原核表达载体,获得重组TN-Nkx6.2蛋白,并验证其生物学活性。方法:该实验先将人类免疫缺陷病毒HIV-1的反式激活因子TAT、核定位信号NLS、Nkx6.2基因片段连接合成目的基因TAT-NLS-Nkx6.2。之后构建重组质粒pET-28a-TNNkx6.2并将其转化入E.coli DH5α中克隆,再转化至E.coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,经组氨酸Ni2+亲和层析纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE及Western blot鉴定融合蛋白,荧光免疫组化染色观察TN-Nkx6.2在小鼠脑组织分布。结果:成功表达并获得纯度90%以上的TN-Nkx6.2蛋白,经Western Blot鉴定,TN-Nkx6.2有良好的免疫原性和免疫反应性荧光免疫组化染色证明TNNkx6.2与小鼠大脑细胞结合并内化进入胞浆及胞核。结论:获得的融合蛋白TN-Nkx6.2具有生物学活性,并能穿过血脑屏障与小鼠大脑细胞结合,并内化进入胞核和胞浆,为深入探讨同源盒基因Nkx6.2在甲状腺减低模型的分子机制研究奠定了物质基础。     

Purification Processes and Market Potential of Bromelain in Brazil

Bromelain is the denomination given to the group of endoproteases obtained from members of Bromeliacea family. These enzymes have a wide range of proven applications and have been an object of study for worldwide researchers for decades. Over the years, several different downstream processes were studied in order to determine which technique would be worthwhile to be implemented in Brazil and provide the national market with such product. The objective of the present study is to relate the main studies in Brazil that has proven that bromelain purification can be cost-effective, in addition to the well-known benefits owned by such enzymes, and highlight the applications that create their market potential in the Brazilian market.     

铀纯化和铀转化废物再循环再利用工艺途径探讨

铀纯化、转化是核燃料循环其中一个环节,其生产过程中会生产生一些副产物和大量的废物,本文通过对我国现有铀纯化、转化设施的工艺技术进行分析,探讨对其废物进行再循环再利用的途径,实现低消耗、低排放。     

碳酸钙沉淀法检测混浊原水中“两虫”的研究

对于混浊水源水中"两虫"的检测,选定有效的浓缩富集及分离纯化方法尤为重要。滤囊/滤芯富集—免疫磁分离(IMS)组合方法对混浊水源水的预处理效果较好,但成本过高。为此,研究了碳酸钙沉淀法对某混浊河水中"两虫"的浓缩富集效果,并对浓缩后样品比较了密度梯度离心法和免疫磁分离法的分离纯化效果。结果发现,利用碳酸钙沉淀法可有效实现水中"两虫"的富集;从分离纯化效果来看,Percoll—蔗糖密度梯度离心方法对贾第鞭毛虫和隐孢子虫的平均回收率分别可达72.3%和39.5%,相对标准偏差分别为10.8%和11.9%;与国标方法中免疫磁分离方法的效果相当,但可显著降低分析成本。因此,碳酸钙沉淀—密度梯度离心组合技术用于混浊水源水中"两虫"的检测具有较好的应用前景。     

A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65的原核表达及其纯化

目的原核表达A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65,并进行纯化。方法以CPA全基因为模板,PCR扩增rCPA基因,插入表达质粒p ET-28a(+)-HSP65,构建重组表达质粒p ET-28a-rCPA-HSP65,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行12%SDS-PAGE分析;优化表达工艺进行高密度发酵,发酵产物经DEAE阴离子柱上复性后,再经金属螯合层析纯化。结果重组表达质粒p ET-28a-rCPA-HSP65经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约90 000,主要以可溶性形式为主,表达量占菌体总蛋白的30.17%。利用TB培养基,IPTG 34℃诱导5 h的表达产物经纯化后,纯度约达95%,蛋白收率为4.5 mg/g湿菌。结论已成功表达并纯化了A型产气荚膜梭菌α毒素疫苗抗原rCPA-HSP65,为后期疫苗生物学活性的研究奠定了基础。     

甘草酸提取纯化工艺的研究进展

简单介绍了甘草酸的药用历史和药理作用以及在国民经济中的应用。列举了甘草酸的提取方法,主要从提取溶剂和提取纯化手段两方面考虑。从提取溶剂方面考虑,主要有水提取法、稀氨水提取法、乙醇提取法、碱性乙醇提取法和复合酶法提取法;从提取纯化手段考虑,主要有微波辅助法、超声强化法、膜技术、多级逆流技术提取法、静电场协同超声提取法、间歇式泡沫分离、双水相萃取技术和大孔树脂法等。综述了以上提取方法,为进一步开发甘草资源提供参考。