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《中国计量学院学报》2022,(1):106-115
目的:构建菰黑粉菌(Ustilago esculenta P. Henn.)高效的遗传转化体系。方法:基于菰黑粉菌RNA-seq结果,筛选出10个高强度启动子,以pUMa932为基础载体,将异源启动子P_(otef)使用DNA无缝克隆技术替换成所筛选的启动子构建相关载体,以菰黑粉菌UeT55为实验材料,基于PEG介导原生质体转化构建表达菌株。通过qRT-PCR测定不同启动子下eGFP的表达量,并用Image J软件分析测定转化子的荧光强度。结果:启动子P_(mdh1)、P_(mix17)、P_(eno)、P_(qcr8)驱动的eGFP基因表达量和荧光强度与对照P_(otef)无显著差异,启动子P_(mia40)、P_(sti1)、P_(odc2)驱动的eGFP基因表达量和荧光强度均显著低于对照,而启动子P_(hsp)、P_(ef)、P_(cox12)驱动的eGFP基因表达量分别比P_(otef)驱动的高9倍、5倍、2倍以上,荧光强度分别高6倍、4倍、1.5倍以上,均显著高于对照。结论:P_(hsp)启动子表达能力最强,且表达稳定,适宜作为强启动子用于菰黑粉菌遗传转化体系构建。 相似文献
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菰属是稻族12属之一,与水稻有较近亲缘关系。由于其具有很多优良特性,因而成为水稻品质和产量改良的重要基因源。尽管菰属内种的分类仍存在一定争议,但本文以常用的水生菰、沼生菰、德克萨斯菰和菰4种分类方式,对每种的分布、营养价值及其研究动态进行了综述,最后提出些许建议以供参考。 相似文献
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通过显微观察和Hoechst 33258荧光染色方法,系统观察了茭白灰茭中黑粉菌厚垣孢子不同萌发时期的核相变化.研究表明,厚垣孢子萌发过程中黑粉菌细胞核的数目不断变化,核相在萌发过程中是不规则的.茭白灰茭厚垣孢子中没有观察到细胞核,菌丝体细胞核的数目在1~4个,大多数小孢子仅有一个细胞核或没有细胞核.同时获得了18个可用于茭白黑粉菌遗传变异分析的ISSR分子标记,作为深入探讨茭白黑粉菌的生物学特性的参考. 相似文献
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本研究建立了一种能够快速检测食品中菰米成分的TaqMan实时荧光PCR方法。以菰米核糖体内转录间隔区(internal transcribed space, ITS)基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,建立菰米成分的实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性分析、灵敏度分析以及实际应用检测。结果显示:本研究所建立的实时荧光PCR检测方法特异性强,仅对菰米品种中国菰(Z. latifolia)、水生菰(Z. aquatica)、沼生菰(Z. palustris)和德克萨斯菰(Z. texana)基因组DNA出现特异性扩增曲线,供试的其他30种谷物以及异源性动植物基因组DNA均无扩增曲线;该方法对菰米成分检测的灵敏度为0.001 ng/μL菰米基因组DNA或0.01%(W/W)菰米粉。应用该方法对100份市售的进口菰米、菰米碎米、杂粮米及混合米粉等样品进行检测,在80份进口菰米和5份菰米碎米中检测出菰米成分,其他样品中未检出菰米成分,与商品标识一致。该方法灵敏度高,特异性强,可快速高效地进行菰米成分的真实性甄别。 相似文献
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以发酵液中的脂肪酶活为对象,通过单因素、Plackett-Burman、最陡爬坡和响应面试验,优化蚜虫莫氏黑粉菌产脂肪酶的最佳条件。结果表明,葡萄糖、NaNO3、酵母浸粉、MgSO4、花生油和吐温-80等培养基组分添加量、装液量和发酵温度等培养条件均对脂肪酶活产生影响。其中,影响脂肪酶活最显著的3个因素分别是NaNO3添加量、酵母浸粉添加量和培养温度。优化后的最佳条件为:NaNO3添加量3.1 g/L,酵母浸粉添加量2.24 g/L,培养温度25.8℃。此条件下,发酵液中脂肪酶活为83.14 U/mL,与响应面所得回归方程的预测值接近,比初始培养基中的酶活提高2.6倍,说明回归模型能较好地优化脂肪酶发酵条件。本研究挖掘了蚜虫莫氏黑粉菌的工业化应用潜力,为拓宽脂肪酶来源提供参考。 相似文献
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最近,江苏省建湖县钟庄镇村"茨菰大王"乔元华在网上连续签订了几个大订单,特别是韩国一家农产品贸易公司一下子与他签订了30万元 相似文献