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为了规避人肠杆菌(Escherichia coli)自身基因组表达的天然GAD的干扰,以再生无定形纤维素(regenerated amorphous cellulose,RAC)特异性吸附纤维素结合结构域谷氨酸脱羧酶(cellulose-binding domairr glutamate decarboxylase,CBD-GAD)制备的RAC-CBDGAD固定化酶作为评价指标,采用单因素和田口试验设计法对E.coli GDMCC60445高效表达CBD-GAD的条件进行了优化。结果表明,E.coli GDMCC60445表达CBD-GAD的适宜培养基为改良LB(Luria-Bertani)培养基,其组成为胰蛋白胨8 g/lL、酵母膏6 g/L、NaCl10g/L、pH 5.5;适宜的培养条件为温度37℃、摇床转速120 r/min、培养时间24 h。在该适宜条件下,RAC-CBDGAD活力为(419.79±10.37)U/g,与田口法预测值一致,较优化前提高了(30.28±3.22)%。 相似文献
176.
众所周知,现在的谷氨酸发酵工业发展突飞猛进,谷氨酸发酵技术达到了一个很高的水平,其发热量已大大超过了以前的低产酸、低转化率的发酵工况。能否正确估算其发热量并配备相应的冷源来冷却降温,达到最优发酵条件,对取得良好的发酵成果来说至关重要,本文就经实际生产实践检验过的理论计算方法作一简单论述,以供参考。 相似文献
177.
初步研究了pH缓冲液、钙离子浸泡溶液处理以及L-谷氨酸底物饲喂对采摘后新鲜芦笋中1-氨基丁酸(1-aminobutyric acid,GABA)合成和积累的影响。结果表明:pH7.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液或者100trmol/L的氯化钙溶液浸泡处理2h能分剐使芦笋材料GABA含量比对照增加73%和62-23%。效果最显著的是L-谷氨酸底物饲喂处理,采用50trmol/L的谷氨酸底物饲喂处理24h能使芦笋GABA含量比对照增加3.38倍,达到0.5108mg/g#|。为研究开发富含GABA的蔬菜功能食品提供了新思路: 相似文献
178.
采用溶菌酶处理、超声破碎、硫酸铵分级、3次DEAE SepharoseCL 6B层析、SephacrylS 200凝胶过滤等手段,从乳酸菌细胞中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶(GAD;EC4.1.1.15).纯化酶的比活力为14.4U/mg,纯化倍数31,回收率3.8%,SDS PAGE得到亚基的相对分子质量为65000.L 谷氨酸是测试的18种氨基酸中的惟一作用底物,表明乳酸菌GAD具有高度的底物专一性.酶在pH值3.6~5.4时具有活性,pH值4.7时活性最高,pH值6.0以上时没有活力.耐热性实验表明,pH值4.7条件下处理5h后,60℃时该酶仍能保持80%以上的活性,80℃以上迅速失活,由Lineweaver Burk作图得到的GAD的Km值为1.9mmol/L. 相似文献
179.
本文介绍了料液中含量的测定方法。利用谷氨酸二钠具有旋光性,会影响旋光法测值的特点,用两种方法(旋光法和中和滴定法)分别测量料液中谷氨酸钠的含量,计算出其中谷氨酸二钠的含量。本方法适用于检查中和操作水平。 相似文献
180.