莱克多巴胺荧光微球免疫层析检测方法的建立

以荧光微球作为新型标记物,采用EDC法进行偶联,制备莱克多巴胺抗体荧光微球复合物,复合物粒度均一、性质稳定,并以之为探针建立莱克多巴胺荧光微球免疫层析检测方法,检测限为2.5ng/mL,且特异性强、检测范围宽。与胶体金免疫层析方法相比,荧光微球免疫层析方法的灵敏度更高,新型的荧光微球可以提高免疫层析方法的灵敏度。     

啤酒酵母RNA提取条件的优化及其磁性固定化

通过浓盐法对啤酒酵母RNA进行提取,以磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛交联法对RNA进行磁性固定化.通过比较反应体系中的无机磷和总磷的质量分数,对RNA的提取条件和固定化条件进行优化.结果表明,RNA提取温度对提取率的影响最为显著;在提取时间4h、提取温度100℃、氯化钠质量分数为10％和酵母质最分数为8％的最优条件下,RNA提取率达到6.13％.戊二醛交联法磁性固定化RNA的最佳条件为:反应时间4h,温度40℃;RNA最佳添加量为30mL(质量浓度2mg/mL).     

液相芯片技术在食品安全领域的研究进展

液相芯片技术(liquid chip technology)又称为灵活的多组分析(flexible multi-analyte profiling,x MAP)技术,是利用偶联特异性探针的荧光编码微球捕获待测核酸或蛋白后,逐一、快速地通过流式细胞仪双色激光探测区,进行定性或定量检测。我国将液相芯片技术应用在食品安全领域仍处于起步阶段,主要集中在食源性致病菌、转基因食品和农兽药残留等食品安全检测方面。液相芯片技术同时检测多种待测分子,具有高通量、快速、准确、所需样品量少、检测范围宽、可自由组合检测项目等优点。本文检索了国内外的文献,简要概述液相芯片技术的发展历史和基本原理,并介绍该技术及其商品化试剂盒在食品安全和其他领域上的研究应用,最后对液相芯片技术的发展前景做出展望。     

明胶微球的制备及其对酸性红FRL的吸附性能

以明胶为原料,戊二醛为交联剂,Span-80为乳化剂,采用乳化-交联法制备明胶微球。扫描电镜观察结果表明:该微球表面光滑,粒径分布均匀,大小为32μm左右。红外光谱数据证明戊二醛与明胶之间的交联是成功的。同时研究了pH、时间、温度、染料浓度、微球用量等因素,对酸性红FRL吸附性能的影响。试验结果表明最佳吸附条件为:pH值为3、温度30℃、时间80min;当染料浓度为0.5g/L,微球用量0.6g/L时,染料去除率可达到97.5%。     

Sensor-containing microspheres of chitosan crosslinked with 8-hydroxyquinoline-5-sulphonic acid for determination of Cu(II) in instant coffee

A novel carbon paste electrode containing chitosan microspheres for the determination of Cu(II) in instant coffee by anodic stripping voltammetry was developed. Chitosan was crosslinked with the chelating agent 8-hydroxyquinoline-5-sulphonic acid and glutaraldehyde. The microspheres of the crosslinked chitosan biopolymer were obtained by the spray drying technique and employed in the construction of the sensor. In acetate buffer solution (0.1 mol L⁻¹, pH 6.0), the calibration curve obtained was linear for concentrations of 5.0 × 10⁻⁷ to 1.4 × 10⁻⁵ mol L⁻¹ (r = 0.9990); the detection limit was 5.5 × 10⁻⁸ mol L⁻¹. The relative standard deviation (n = 8) was lower than 3.0% for solutions containing 6.0 × 10⁻⁶, 5.0 × 10⁻⁵ and 1.5 × 10⁻⁴ mol L⁻¹ of Cu(II). The method was successfully employed for determination of Cu(II) in instant coffee and the results obtained showed good agreement when compared with those using electrothermal atomic absorption spectrometry.     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶研究

以磁性壳聚糖微球为载体,通过戊二醛交联进行脂肪酶固定化,对影响脂肪酶固定化各种因素进行考察,确定最佳条件,并比较游离酶与固定化酶pH和热稳定性。结果表明,固定化适宜条件为:脂肪酶加入量5.0 mg/100 mg载体、温度40℃、时间5 h、pH 8.04、戊二醛浓度10%、最高固载率可达90.56%,酶活4034 U/g载体;与游离酶相比,固定化酶pH和热稳定性都有较宽适用范围。     

因子设计-效应面法优化交联淀粉微球的合成工艺

为了优化用反相悬浮法合成了新型交联淀粉微球(CSM) 的工艺,采用效应面法(RSM)分析交联荆质量分数、反应温度和引发剂浓度对于 CSM 品质(产率和溶胀度)的影响,并建立了相应的预测模型.方差分析的结果表明:交联剂质量分数、反应温度和引发剂浓度对于 CSM 产率和溶胀度这两项指标都有着极为显著的影响.优化所得的较优工艺参数为:交联剂质量分数为 0.5%、交联温度为 48℃、引发剂浓度为 3.7 mmol/L,对应的 CSM 产率和溶胀度的预测值分别为 77.5%和 246%.经试验证明:应用效应面法所得到的 CSM 合成工艺参数是可行的.     

磁性淀粉微球固定化脂肪酶的研究

磁性淀粉微球为载体,采用戊二醛交联法固定化脂肪酶。磁性淀粉微球的主要组成是淀粉和磁粉。结果得到,磁性固定化脂肪酶的总活力、蛋白载量、比活、活性回收率、最适温度和最适pH值分别为4897.15U/g、50.59mg/g、98.58U/mg、72.73%、45℃和8.0。Ca2+、Na+和Mg2+对固定化脂肪酶和自由酶有激活作用,作用大小顺序为Ca2+>Mg2+>Na+。Cu2+和Fe2+对固定化脂肪酶和自由酶有抑制作用,Cu2+的作用尤其明显。脂肪酶被固定化后其热稳定性(在水介质和正己烷中)、操作稳定性、pH稳定性均比自由酶明显提高。固定化脂肪酶和自由酶在4℃下,pH8的PBS和正己烷中保存34d后,其相对活力分别是78.3%和98.8%。     

不稳定交联剂在微球合成中的应用及性能影响

通过Ⅰ型稳定交联剂(MBA)与Ⅱ型不稳定交联剂(PEGDA)复合使用,采用反相乳液聚合法制备一种不稳定交联微球。通过本体聚合法考察PEGDA的分解温度为60~65℃,并结合激光粒度仪研究Ⅱ型交联剂对微球粒径、膨胀性能的影响,SEM观察微球水化前后的形态。研究发现,适量的Ⅱ型交联剂与MBA复合使用能够减小微球的初始粒径;微球水化前后形态近似球形,初始粒径约为3μm,膨胀后颗粒间发生团聚作用;不稳定交联微球尺寸分布较宽,在常温下几乎不膨胀,60℃后Ⅱ型交联剂失效,微球膨胀速率加快,膨胀倍率优于单一交联微球,1.95×105mg/L矿化度地层水中,微球18 h内中值粒径(D0.5)从13.94μm增加到70.71μm。     

壳聚糖磁性微球的制备及其对牛血清白蛋白的吸附性能研究

以Fe/C为磁性内核、液体石蜡为分散介质、Span-80为乳化剂、环氧氯丙烷为交联剂,采用反相悬浮包埋法制备了壳聚糖磁性微球.对微球表面的活性基团含量进行了测定.研究了用戊二醛活化、Cibacron Blue 3G-A修饰后的微球对牛血清白蛋白的吸附性能.结果表明,小粒径壳聚糖磁性微球经戊二醛活化后对牛血清白蛋白的饱和吸附量为46.3 mg·g-1,经Cibacron Blue 3G-A修饰后对牛血清白蛋白的饱和吸附量为66.2 mg·g-1.