疏水作用柱层析技术纯化HBsAg条件的筛选

在应用流水作用柱层析纯化HBsAg中,对流水介质的功能基类型、交联密度、盐的浓度、操作温度等决定疏水性强弱的因素作了比较研究。结果表明,应用以C4为功能基的Butyl—Sepharose（6～8μmol／ml）和以C3为功能基的Propyl－Sepharose（20～22μmol／ml）疏水介质、8％（NH4）2SO4,18～24℃等条件纯化HBsAg时结果较理想。     

重组蛋白A免疫吸附剂的制备及吸附性能

以琼脂糖凝胶为载体,重组蛋白A为配基制备免疫吸附剂.过血浆动态吸附之后洗脱得到含有免疫球蛋白的洗脱液;通过分析洗脱液中免疫球蛋白的纯度可以考察吸附剂对免疫球蛋白的吸附选择性;最后利用等温静态吸附检测了吸附剂对人免疫球蛋白(hIgG)溶液的吸附行为.结果表明,洗脱液中免疫球蛋白的纯度大于92%,重组蛋白A吸附剂对免疫球蛋白吸附选择性较好;等温静态吸附结果符合Langmuir等温吸附模型;进一步分析Langmuir吸附模型,表明该吸附剂在临床治疗中有吸附量大的明显优势,重组蛋白A免疫吸附剂具有很好的临床应用前景.     

二氧化钛/多孔钛复合膜的免疫隔离效果研究

为克服传统免疫隔离膜吸水膨胀、机械强度差等缺点,以钛酸丁脂为原料,采用溶胶一凝胶法以多孔钛金属为基体,制备出TiO2/多孔Ti复合膜.为避免金属基体与膜材料由于热膨胀系数的不同而引起膜的破裂,采用填堵的方法成膜.通过复合膜的渗透分离实验研究其免疫隔离效果.实验结果显示,所制得的二氧化钛/多孔钛复合膜经过3次以上涂膜能有效地阻隔免疫球蛋白及免疫细胞,但小分子物质(如葡萄糖)能自由通过该膜,故该复合膜可以作为免疫隔离膜使用,并且具有良好的免疫隔离效果.     

使用ESDA和Kriging技术进行乙肝制图研究

疾病制图是进行疾病发生情况分析和监测的一项重要技术.它是将地理分布的疾病观测数据,使用合适的空间插值技术,制作成连续分布的疾病地图的过程.介绍了ESDA和Krigmg技术,通过实际数据展示了二者的结合在我国乙肝疾病数据制图中的应用.分析结果指出,我国乙肝发病率地理分布特点为:西北内蒙和甘肃一带、中南和华东部分地区和东北部分省市为高发地区,长江以南高于长江以北,东部沿海高于西部边疆.     

血液中免疫球蛋白的分离提取及功能特性的研究进展

对血液中免疫球蛋白的性质、提取、纯化、活性测定及应用等的研究现状进行了论述.     

乙型肝炎患者免疫球蛋白检验的临床意义探讨

目的:探讨乙肝患者血清中免疫球蛋白水平、血清总胆红素及凝血酶原活动度的高低及临床意义。方法:选取2012年2月-2014年2月本院300例乙型肝炎患者及100例健康人群作为研究对象,采用免疫比浊法测定乙肝组(轻、中、重组)和对照组的免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)的水平并进行比较。治疗后按病情发展程度分为改善组和恶化组,采用相同方法对其免疫球蛋白、血清总胆红素(TBIL)及凝血酶原活动度(PTA)的水平进行检测。结果:乙肝组的免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)水平明显高于对照组;轻度乙肝组的IgM、IgG、IgA分别为(2.15±0.25)、(11.88±1.34)、(3.31±0.24)g/L;中度乙肝组的IgM、IgG、IgA分别为(2.75±0.55)、(13.45±3.25)、(3.75±0.77)g/L;重度乙肝组的IgM、IgG、IgA分别为(3.25±0.33)、(15.03±4.11)、(4.86±0.56)g/L。数据显示,随着乙肝病情的加重,轻、中、重度组的IgG、IgA、IgM水平持续上升,且两两之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。病情恶化组的PTA值(24.89±18.09)%低于改善组的(45.63±11.2)%,恶化组的TBIL(390.32±200.32)μmol/L,IgM(2.69±0.45)g/L,IgG(15.64±2.38)g/L,IgA(3.04±0.56)g/L均明显高于改善组的TBIL(180.32±170.43)μmol/L,IgM(2.54±0.43)g/L,IgG(14.83±2.64)g/L,IgA(2.82±0.54)g/L。结论:免疫球蛋白的水平能反映乙肝患者病情的程度,对患者的治疗有重要的参考价值。TBIL水平会随病情的恶化而增加,所以说,TBIL在一定程度上是肝细胞损害程度的指标。PTA作为临床反映肝功能损害轻、中、重度肝炎的实验室主要参考指标,PTA水平越低,肝细胞损害越重,病情预后越差。     

不同喂养方式对乙型肝炎病毒母婴传播的影响

目的:探索不同喂养方式对乙型肝炎病毒母婴传播的影响。方法:选取2013年1月-2015年5月在本院足月分娩的携带乙肝病毒(Hepatitis B Virus,HBV)孕妇796例,根据喂养方式分为母乳喂养组(包括混合喂养)370例及人工喂养组426例,对其所生新生儿出生后即刻检测血清乙肝病毒标志物(Hepatitis B Virus Markers,HBVM),并常规肌肉注射重组酵母乙肝疫苗(Hepatitis B Vaccine,HBVac)10μg,同时在另一部位肌肉注射乙肝免疫球蛋白(Hepatitis B Immunoglobulin,HBIG)200 U,3个月再次检测HBVM。结果:母乳喂养组及人工喂养组的新生儿出生时HBV感染率分别为11.3%和11.5%,3个月龄时感染率分别为3.5%和3.3%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);两组婴儿出生时与本组3个月龄时HBL感染率比较,差异均有统计学意义(χ2=16.519、20.997,P<0.001)。结论:携带HBV的孕妇所生新生儿,出生后即肌注HBVac 10μg联合HBIG 200 U可以明显降低HBV感染率。经联合免疫预防后,喂养方式与HBV母婴传播无明显相关性。     

大菱鲆免疫球蛋白M(IgM)单克隆抗体的制备与特性鉴定

应用细胞工程技术研制大菱鲆免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的单克隆抗体并分析其免疫学特性。小鼠骨髓瘤细胞NS0与经IgM免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合,经过反复有限稀释法克隆,筛选获得4株抗大菱鲆IgM的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为B1D1、D5C2、E1B2和F4A1。经小鼠腹水扩大生产后,单抗效价为1∶1.024×106检测灵敏度为32 ng/mL。Western blot分析表明,获得的单抗与IgM重链区特异性结合。交叉结果显示,单抗与大菱鲆血清呈强阳性反应,与褐牙鲆、红鳍东方鲀、许氏平鲉、六线鱼、鲈鱼均呈微弱阳性反应,而与半滑舌鳎、鲤鱼、鲫鱼、草鱼、鳙鱼的血清无交叉反应。本研究制备的大菱鲆IgM单克隆抗体效价高、灵敏度高、特异性强,适合用于大菱鲆免疫学相关研究和生产实际应用。