牛初乳中免疫球蛋白的测定

以单向免疫扩散法测定了牛初乳中的IgG。结果表明,产犊后第1次挤乳,初乳gG平均为67.23mg/mL,之后随泌乳进行迅速下降,24h后降到小于5mg/mL,到第5天已降到常乳水平。     

击败人类健康的杀手——乙型肝炎（三）

我国乙型肝炎(乙肝)流行较广,占人口总数2／3的人曾受到乙肝病毒(HBV)的传染(如何被传染请见本刊2000年11月号),而在被传染者中大约有1／2—2／3的人是在不知不觉中由于血里出现对人有保护作用的乙肝表面抗体(抗-HBS),并不发病,是较理想的结果;另有约1／6-1／5的被感染者,血里并不出现抗-HBS,而是出现乙肝表面抗原（HBsAg阳性)等血清乙肝标志物,如超过六个月且血清转氨酶不升高,     

大剂量免疫球蛋白治疗再生障碍性贫血的疗效

目的　评价静脉输注大剂量免疫球蛋白 (HDIg)治疗再生障碍性贫血的疗效。方法　球蛋白治疗组为 70例 ,其中重型再障 (SAA) 30例 ,慢性再障 (CAA) 4 0例。对照组 73例 ,其中重型再障 31例 ,慢性再障 42例。应用大剂量免疫球蛋白 (HDIg) 1g/kg·次 ,每月一次 ,同时应用康力龙、左旋咪唑、再障生血片。对照组仅用后三种药物。结果　球蛋白治疗组SAA 30例 ,基本治愈 3例 ,缓解 5例 ,明显进步 6例 ,有效率 47% ,CAA 40例 :基本治愈6例 ,缓解 12例 ,明显进步 14例 ,有效率 80 %。血象上升时间 ,血小板平均 15天左右 ,白细胞及红细胞平均 5 0天左右。对照组SAA31例 ,仅 3例明显进步 ,有效率 10 % ;CAA 42例 ,基本治愈 1例 ,缓解 5例 ,明显进步 16例 ,有效率5 2 % ;血象上升时间平均 80天左右。结论　大剂量免疫球蛋白联合雄激素治疗再障疗效明显优于对照组 ;球蛋白治疗CAA组疗效优于SAA组 ,且多次应用球蛋白疗效显著提高。     

静注人免疫球蛋白纯化用层析介质使用寿命的验证

目的 验证用于静注人免疫球蛋白生产的Fractogel?EMD TMAE（简称TMAE）层析介质的使用寿命。方法 建立TMAE凝胶层析缩小模型,通过对层析介质运行过程中的层析图谱、蛋白回收率、IgA、IgM、分子大小分布、压力、理论塔板数、对称系数和总有机碳（total organic carbon,TOC）进行趋势分析。对每次层析过程中的参数进行比对,分析随着循环次数的增加关键参数的变化情况,确定层析介质使用寿命。结果 IgA检测均值≤100μg/mL,IgM检测均值≤50μg/mL,IgG单体与二聚体含量之和> 95.0%,均符合产品质量标准。层析介质的压力呈逐步升高的趋势,蛋白回收率下降,均在可接受范围内,同时层析柱的每米理论塔板数和对称系数符合使用要求。结论 用于静注人免疫球蛋白生产的TMAE层析凝胶使用寿命暂定为240次。     

一种抗人T淋巴细胞免疫球蛋白淋巴细胞毒效价检测方法的建立

目的 建立基于人白血病T细胞株Jurkat的抗人T淋巴细胞免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte immunoglobulin,ALG)淋巴细胞毒效价定量检测方法,并进行验证。方法 采用人Jurkat细胞作为靶细胞,抗人T细胞兔免疫球蛋白(商品名：Grafalon)作为待检样品,建立其淋巴细胞毒效价定量检测方法。优化反应体系,考察细胞培养密度、细胞代次对待检样品效价的影响,并对方法的精密度进行验证。结果 优化的反应体系组成为50μL待检样品+50μL补体(1∶5稀释)+50μL细胞(5×10⁶个/mL);细胞传代密度为2×10⁵个/mL传代培养72 h或3×10⁵个/mL传代培养48 h用于效价测定最佳;当细胞生长状态较好且一致时,从P10到P25代次的细胞效价测定结果较一致。采用该方法板内重复测定待检样品效价,变异系数(CV)为6.32%,重复性良好;不同代次Jurkat细胞测定待检样品效价6次,CV为4.15%,中间精密度良好。结论 建立了一种便捷、精确的测定ALG淋巴细胞毒效价的定量检测方法,为...     

卵黄免疫球蛋白的分离提取与鉴定

对氯仿法、辛酸法、水稀释法、水-辛酸法分离卵黄免疫球蛋白(IgY)进行了比较,结果表明:水-辛酸法在9倍稀释度、pH5.3、辛酸加量1%条件下,可获得较好效果,进一步用硫酸铵沉淀脱盐后,提取率达93.4%,产率达4.67mg/mL卵黄,纯度达85%。     

利用人免疫球蛋白构建免疫磁珠富集金葡菌条件优化

利用人免疫球蛋白制备富集金黄色葡萄球菌的免疫磁珠及优化条件;利用化学键法制备免疫磁珠,并用矩阵法和单因素法优化免疫磁珠制备条件,通过磁珠对抗体饱和吸附量及加入量相关性评价磁珠与抗体固定化程度,根据免疫磁珠的特异性、灵敏性及饱和捕捉量来考察IMBS.aureus对金葡菌的富集能力;结果显示采用MB-M型磁珠,加入质量浓度均为5 mg/L的活化剂EDC和NHS,于24℃偶联人IgG,24 h得到IMBS.aureus,其饱和吸附量为393.27μg,磁珠与人IgG加入量具有相关性,IMBS.aureus特异性好、灵敏度高(26 CFU/10 mL),0.2 mL IMBS.aureus饱和捕捉菌液浓度为106CFU/mL;通过优化,磁珠装载人IgG分子的能力提高了5倍,检测限提高了4倍,富集金葡菌的效率大大增强,成本降低,为人免疫球蛋白磁珠富集和分离金黄色葡萄球菌实际应用创造了条件。     

免疫乳及其制品研究

本研究选择人肠道致病性大肠杆菌７株，沙门氏菌２株和轮状病毒１株作为免疫原制成混合疫苗对泌乳母牛进行系统免疫，以刺激机体产生特异性ＩｇＧ进入乳中，研究结果表明，在试验期内（产犊后２１０天）经免疫处理的乳牛，其常乳中ＩｇＧ活性平均为３７９．５５，而非免疫牛乳中ＩｇＧ活性平均为４８，免疫处理后乳中免疫球蛋白活性提高８倍。对免疫中ＩｇＧ热致变性研究表明，免疫乳中ＩｇＧ热变性属零级反应，变性活化能平均为１３     

免疫卵黄抗体提取工艺的优化

以水稀释法为基础,结合PEG6000沉淀法对卵黄中IgY进行分离提取。探讨稀释倍数、溶液pH值、静置时间、PEG6000浓度等因素对IgY提取率的影响,并通过正交试验对分离条件进行优化。通过单因素和正交试验得到最佳分离条件为稀释8倍、溶液pH值5.2、静置时间8h、PEG6000浓度8%,该条件下IgY提取率达到13.69mg/g;各因素对IgY提取率的影响顺序为PEG6000浓度>稀释倍数>静置时间>溶液pH。     

牛IgG电化学纳米免疫传感器的研制

研制特异性定量检测牛初乳制品及含牛IgG制品中牛IgG含量的电流型纳米免疫传感器。以成膜性及生物相容性良好的壳聚糖为媒介连接纳米金于玻碳电极,以比表面积大、吸附能力强、生物相容性好的纳米金固定兔抗牛IgG-HRP。通过循环伏安法及交流阻抗法表征电极组装各个过程的电化学特性,利用计时电流法测定PBS稀释的标准牛IgG。结果表明免疫前后稳定电流的变化率与标准牛IgG质量浓度的对数在0.1～10000ng/mL范围内线性相关,相关系数r=0.9976。该传感器稳定性及重现性良好,操作简单方便,成本较低,可用于含牛IgG制品中牛IgG含量的特异性定量检测。