HIV-1Gag p24的高效表达

将编码人免疫缺陷病毒I型 (HIV 1)核心蛋白p2 4的基因序列克隆到原核表达载体pET2 8(b)中 ,并转化不同的受体菌后 ,用IPTG诱导表达。SDS PAGE分析表明 ,受体菌BL2 1(DE3)plysS表达量最高 ,表达的重组p2 4蛋白占菌体总蛋白的 46 %。目的蛋白可与抗HIV 1p2 4单克隆抗体发生特异性反应。     

槲皮素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用的研究

槲皮素是普遍存在于植食性植物中的一类黄酮类化合物,具有明显的抗氧化、抗炎、保肝、抗肿瘤、抑菌等多种生物学功能特性.通过SDA-PAGE和碱性磷酸酶实验分析槲皮素作用前后的菌体蛋白质及碱性磷酸酶的变化,研究其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果.研究结果表明,槲皮素是通过破坏细胞壁结构、抑制菌体对蛋白质的利用,导致细菌正常生理功能的丧失或减退,达到抑菌的目的.     

牙膏抑菌效果分析研究

初步研究牙膏对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌三种比较常见致病菌的抑制效果,检验牙膏抑菌合格与否。用抗菌有效性方法,研究LP、MP、HP、LP-HE、LP-BA五种牙膏抑菌效果。LP牙膏中三种细菌浓度维持在106cfu/mL以上,其余四种牙膏在第14天后没有细菌生长,其中MP在4个周期5次检验中都没有细菌生长,LP-BA有类似抑菌效果,但第2次检验时,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的浓度分别为4×104cfu/mL和35×104cfu/mL,HP与LP-H有类似抑菌效果,在第2次检验时仅大肠杆菌生长,细菌浓度分别为1×106cfu/mL和2×106cfu/mL。LP牙膏不能对实验细菌起到抑制作用,而其余四种牙膏能有效的抑制细菌增长。     

污水厂出水消毒效果影响因素的探讨

通过对污水处理厂出水加氯消毒各种因素的分析,并经实验研究确定影响消毒效果的因素为pH、有机氮、COD、氨氮、水温等,其中pH为最主要影响因素,同时得出加氯消毒最佳水质条件。在实际生产中,可根据在线仪表显示的水质情况,来调节最佳投氯量。     

高转化效率甲基化酶缺陷大肠杆菌感受态细胞制备条件的优化

目的优化高转化效率甲基化酶缺陷的大肠杆菌DM1感受态细胞的制备条件。方法采用不同生长状态、转化冰浴时间、热激时间及转化后复苏时间的大肠杆菌DM1制备感受态细胞,分析转化效率。结果 A600值为0.39和0.69的菌液制备感受态细胞,转化冰浴时间为30min,42℃热激处理90s,大肠杆菌DM1的转化效率最高;转化后复苏时间对细菌转化效率的影响不明显。结论已优化了高转化效率甲基化酶缺陷的大肠杆菌DM1感受态细胞的制备条件,可满足大部分在质粒中进行的常规克隆的需要。     

不同蜂产品抑菌效果的研究

采用滤纸片法,测定和比较了不同浓度的蜂蜜、蜂王浆、蜂胶、蜂花粉溶液对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌)的抑菌效果.实验结果表明:蜂蜜、蜂王浆、蜂胶、蜂花粉溶液对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌效果,而且蜂胶在抑制革兰氏阳性菌,蜂花粉在抑制革兰氏阴性菌方面效果比其它蜂产品更好.蜂蜜、蜂王浆、蜂胶、蜂花粉具有很好的抑菌效果,是优良的天然保健品.     

大肠杆菌的脉冲磁场杀菌效果及规律性的研究

以大肠杆菌为研究对象,利用自行研制的脉冲磁场杀菌设备,研究了大肠杆菌不同的生长时期、磁场强度、脉冲数和物料温度对杀菌效果的影响.结果表明:大肠杆菌在对数生长前期对脉冲磁场更敏感;随磁场强度的增加,杀菌效果呈现波动性变化,在场强为3.47T时杀菌效果最好;随脉冲数的增加,细菌残留率会出现一谷值,之后随脉冲数的进一步增加,杀菌效果反而变差,在脉冲数为20个时,杀菌效果最好;物料温度越高,细菌残留率越低,杀菌效果越好,但该温度远低于热致死温度.脉冲磁场对大肠杆菌杀菌的主次因素为磁场强度>脉冲数>物料温度;最佳参数组合为磁场强度3.47T,脉冲数20,物料温度30℃.     

水稻密码子优化的cry2A^＊基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化

通过PCR从克隆载体puC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*,经限制性内切酶Nde I和BamH I双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a( ),成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a( )/Cry2A*,并转入人肠杆菌BL21(DE3)中.通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时问为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达.采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度达到95%.     

GC-MS技术在鉴定食源性致病菌研究中的应用

通过有机溶剂提取、TLC分离及GC-MS对食源性致病菌中常见的4个属9种19株病原菌的全细胞脂肪酸组分进行了分析.结果表明:沙门氏菌属、埃希氏菌属、弧菌属和志贺氏菌属全细胞脂肪酸组分都含有十四烷酸、十六烷酸和十八碳烯酸,这三种脂肪酸占总脂肪酸含量的90%左右,含量最高的是十六烷酸,含量在40%以上,其次是十八碳烯酸,含量在30%左右.脂肪酸组成在属间差异显著.大肠杆菌O157不含有十三烷酸和十五烷酸,副溶血弧菌不含有十二烷酸和十三烷酸,志贺氏菌含有特异性的环戊烷十三烷酸.这些特征可作为各个属分类鉴定的依据.模式菌株和地方菌株在含有双键的脂肪酸上,双键的位置有一定的差异,因此通过这些差异可以鉴定模式菌株与地方菌株.     

泡菜的分离菌株及其在半风干香肠中的应用

主要研究从泡菜中提取的营养乳酸茵在半风干发酵香肠中的使用.根据其16S rDNA序列顺序从泡菜中提取3类分别定义为植物乳杆菌、清酒乳杆菌、Weissella cibariar魏斯茵属) .在半风干香肠的发酵过程中,植物乳杆菌、清酒乳杆茵、Weissella cibaria以及一种商业乳酸发酵剂被混合接种为发酵荆培养物.将200 g香肠原料注入10 mm的胶原质外皮中,在23℃相对湿度为95%的环境下发酵1 d,然后在接下来的5 d内逐渐地降低温度.经过7 d发酵,香肠在15℃相对湿度为88%～78%的环境下25 d内可成熟.在预设的间隔25 d中,乳酸菌、大肠肝茵、酸碱度以及水分活度都已预定,并且15名参与者已确定最终发酵香肠的口感度.在发酵过程的7 d内,乳酸茵从约6 lg cfu/g上升到8～9 lg cfu/g,酸碱度从6.0下降到5.0,继而在熟化结束时从5.2小幅回升到5.8;并且,所有香肠的水分活度在熟化结束时增加到0.87～0.89;在熟化后的15 d内香肠中未检测出大肠杆菌.从泡菜中提取的植物乳杆菌比商用发酵剂更易导致酸碱度以及大肠肝菌量下降,同时口感测试也表明,由植物乳杆茵发酵的香肠口感要比由一般商用发酵剂发酵的香肠好;但是由魏斯茵属所发酵风干的香肠在酸碱度、大肠杆菌下降量以及口感度方面均低于由一般商用发酵的香肠.实验结果表明,从泡菜中提取的植物乳杆菌与一般商用发酵剂一样,可以提高风干香肠的质量.