胜利油田单12区块内源微生物分子生态研究

为了全面客观地了解油藏内源微生物生态变化规律,针对油藏微生物特点建立了基于PCR扩增的变性梯度凝胶电泳(DGGE)和末端限制性片段长度多态性分析(T-RFLP)2种研究方法。提取胜利油田单12区块注入水和产出水中微生物的总DNA,并以此DNA为模板PCR扩增16S rDNA,然后分别进行DGGE和T-RFLP分析。DGGE分析结果:注入水和单12-4井检测到的条带数各有10条,单12-5井有7条,但是单12-4井、单12-5井优势种群条带数都有6条,大于注入水的4条,表明油藏内源微生物具有十分丰富的多样性,激活剂的注入激活了内源微生物;T-RFLP分析表明,该区块油藏中主要存在脱硫弧菌、假单胞菌、不动杆菌和梭菌等细菌,这些均为有益采油菌类。该研究从分子生态学角度更准确地掌握了油藏微生物生态变化规律,为内源微生物驱油方案的优化和驱油效果的提高起到跟踪指导作用。     

一起副溶血性弧菌食物中毒分离株的特征分析

目的 分析2017年广州市一起副溶血性弧菌食物中毒分离株的特征.方法 采用血清型鉴定,药敏实验,毒力基因(tdh、trh、tlh)、toxRS/new基因、orf8基因的聚合酶链式反应(PCR)检测,脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)进行分析.结果 14株副溶血性弧菌血清型鉴定为O8∶K21,药敏试...     

处理垃圾渗滤液复合式膜生物反应器中微生物群落结构的演变和分析

为了研究复合式膜生物反应器中微生物群落结构多样性的演变过程,为改进工艺提供依据,3次分别从反应器中的混合液和生物膜上采集样品并提取6个样品的微生物总DNA,然后使用V6-V8区引物对(GC968F/1492R)进行PCR扩增,最后用PCR扩增产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE).DGGE分析表明,在反应器运行初期,微生物群落结构变化较大.在整个反应器运行过程中,微生物群落多样性较高.在该系统中,由于有生物填料的存在,可能存在厌氧微环境,所以在该反应器中可能存在短程脱氮和同步脱氮.在反应器运行约2个月时,出现的一些菌群是膜污染物产生和累积的主要因素.     

Development of a novel modified EGSB reactor for municipal sewage treatment at ambient temperatures

A novel modified expanded granular sludge bed(EGSBm) reactor was developed for anaerobic treatment of municipal sewage with mixed liquid recirculation instead of effluent recirculation commonly adopted by a conventional EGSB(EGSBc) reactor.Performances of these two reactors were compared in treating municipal sewage at ambient temperatures ranging from 8 to 26 ℃.At an upflow liquid velocity(Vup) of 10.3 m/h,the mean concentrations of filtrated COD(CODfilt) and COD of the EGSBm effluent were determined to be 59.4 and 95.9 mg/L,respectively,which were significantly lower than those of the EGSBc effluent operated under identical experimental conditions.When the organic loading rate was suddenly increased from 1.2 to 7.2 kg COD/(m3·d),the EGSBm regained the removal efficiency of previous operation phase in 10 d.Hydrodynamic characteristics of the reactors were compared using the residence time distribution(RTD) model.It was found that the treatment efficiency of EGSBm kept increasing as the Vup increased.The polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(PCR-DGGE) technique was used to analyze the microbial diversity in EGSBm.Fingerprinting pattern indicated that some species in the inoculating sludge were still reserved in the granular sludge of EGSBm,moreover,several new species occurred.     

油藏微生物群落结构的分子分析

利用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术考察本源微生物驱油前后,即营养剂注入前后微生物群落结构的变化.实验室模拟地层培养结果表明,在以N-1(主要成分为淀粉纤维素)为唯一营养剂、培养温度为48℃时,在有氧或厌氧务件下,24 h后原始水样中对驱油有利的本源茵便可以被激活,并随着培养时间的延长最终达到稳定.主要激活的对驱油有利的3种菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)、梭状芽孢杆菌(Clostridium sp.)和烃类降解菌(Hydro-carbon seep bacterium).经分析,原始底层注入水中虽然含有对驱油不利的脱硫肠状菌属(Desul fotomaftculum salinum),但是在经N-1激活后的水样中均未发现该菌的存在,证明N-1不会激活原始水样中的脱硫肠状菌属.为营养体系的筛选、注入方案的优化设计和驱油效果评价提供了理论支撑.     

致死剂量辐射诱导小鼠骨髓细胞凋亡特征的研究

经＾６０Ｃｏ γ射线以不同剂量全射照射２１３只ＬＡＣＡ小鼠,于照射后４周内分批 杀,将骨髓标本分别进行Ｈ．Ｅ染色,半薄及超薄切片,并通过原位末端标记和ＤＮＡ交电泳观察其生化特性。结果表明：射后６ｈ,各一组小鼠骨髓造血细胞出现凋亡明显增多,且剂量赵大,凋亡细胞越多。凋亡的细胞形态上表现为染色质深度缩、边移,呈半月型,环状或不规则状,核碎片喜讯发小体形成,电泳下可见ＤＮＡ梯状图谱。在２．５～７．０Ｇ６     

中日栉孔扇贝杂交子一代群体的遗传变异

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，研究了中国栉孔扇贝和日本栉孔扇贝的两组杂交子代群体的14个位点24个等位基因。将它们各自的自交子一代作为亲本的参照组，对这四组子代群体进行了遗传变异分析，结果表明：四组群体具有相同的基因位点控制同工酶的表达，但各位点等位基因的频率有所不同。统计结果表明：杂交群体的遗传变异明显高于自交群体的遗传变异，四组群体的多态位点比例（P.99）分别为36.36%（CP中自交组）、30.77%（JP日自交组）、30.77%（JFCM日雌中雄杂交组）、30.77%（JM-CF日雄中雌杂交组），平均杂合度观测值（Ho）分别为0.1273（CP）、0.1055（JP)、0.1536（JFCM）、0.1727（JMCF)，各位点平均有效等位基因数（Ae）分别为0.7318（CP）、1.6718（JP）、1.6955(JFCM)、1.6927（JMCF）。杂交优势已初步显示出来。     

苏州市食品中单增李斯特菌污染状况及分子特征分析

目的 研究2016—2020年苏州市各类食品中单增李斯特菌的污染状况及分子特征。方法 将采样食品按WS/T464—2015《食物成分数据表达规范》进行分类,计算各类食品污染率,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)和凝胶电泳对毒力基因(inlA、inlB)和耐药相关基因(virR、dltA、dltB、dltC、dltD、mprF)进行检测,通过脉冲场凝胶电泳进行分子分型。结果 683件食品中共检出44件阳性样品,总体检出率6.4%。各类食品中以肉类食品的检出率最高(17.2%),肉类食品中以预制肉制品检出率最高(37.2%)。分离的44株单增李斯特菌毒力基因inlA携带率为100.0%,inlB携带率为97.7%,耐药相关基因virR、dltA、dltB、dltC、dltD、mprF的携带率分别为90.9%、100.0%、90.9%、100.0%、95.5%、97.7%。分离株的PFGE型别可分为11个基因型簇,相似度为53.3%～100.0%,有11组100.0%相似度的带型,其中有3组为同一时间,同一地点采集样品所分离菌株。结论 苏州市肉...     

碱性蛋白酶水解乳清分离蛋白工艺优化

目的 降低乳清分离蛋白中的致敏蛋白含量, 制备低致敏性乳制品。方法 利用碱性蛋白酶水解乳清分离蛋白, 研究酶添加量、初始pH、酶解时间以及温度对乳清分离蛋白水解度的影响。在单因素的实验基础上, 采用Box-Behnken实验设计方法进行四因素三水平的响应面优化实验。结果 在P<0.05的水平下, 4个因素对乳清分离蛋白的水解度都有显著影响。最优的水解工艺为: 酶添加量6.4%、初始pH 11、酶解时间4 h、温度60 ℃。乳清分离蛋白在此条件下水解后, 水解度达到21.11%。酶解液的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)分析显示, 经过这一优化工艺水解, 10 kDa以上的蛋白基本全部被降解。高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析酶解产物的多肽及蛋白质分子量分布, 结果显示酶解产物的分子量大都分布在3.5 kDa及以下。采用间接竞争酶联免疫吸附法原理测定2种标志性致敏蛋白(β-乳球蛋白和α-乳白蛋白)的残余抗原性, 发现2种致敏蛋白的残余抗原性也有不同程度的降低。结论 通过碱性蛋白酶水解后, 乳清分离蛋白中具有致敏性的大分子蛋白转变为小分子的肽类, 从而降低了致敏性。     

2020年上海市青浦区肉制品中单增李斯特菌分子分型及耐药性分析

为了解2020年上海市青浦区肉制品中单增李斯特菌的污染状况、分子分型及耐药情况,按照《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》检测肉制品中的单增李斯特菌,使用微量肉汤稀释法(MIC法)进行抗菌药物敏感性试验,应用PFGE分子分型并采用BioNumerics软件分析聚类。结果显示,111份肉制品中单增李斯特菌的检出率为12.61%,生、熟肉制品的检出率存在统计学差异(χ_c²=29.09,P<0.05)。药敏试验表明,一株菌多重耐药——所有株菌对头孢西丁均耐药(100%),其次为苯唑西林(21.43%)。PFGE结果表明,LM聚类分析呈整体多态性且无聚集。结论为,2020年上海市青浦区肉制品中,鸡肉类生肉制品的单增李斯特菌污染情况严重,对头孢西丁完全耐药,极个别菌株存在多重耐药率。此外,分型带型存在多态性,为散发污染。因此,应加强对肉制品的安全监测,关注耐药菌株发展趋势,预防爆发性食品安全事件。