碱性单细胞凝胶电泳技术用于辐射损伤快速剂量估算的时效和量效关系研究

应用碱性单细胞凝胶电泳技术（SCGE）,采用小鼠整体照射和人外周血离体照射方式,检测受^60Co-γ射线照射的外周血细胞DNA损伤修复的时间效应和剂量效应关系,探讨SCGE用于辐射损伤快速剂量估算的可行性。整体实验结果表明,小鼠外周血细胞DNA损伤程度在照射后即刻最明显,照射后2hDNA损伤已基本修复,照射后24h与照射前相比已无显著性差异（P〉0．05）。离体实验结果发现,照射后即刻人外周血细胞尾矩TM值随剂量增加而增加,照射组与未照射组之间有非常显著性差异（P〈0．01）,剂量效应呈现良好的线性关系Y=0．3619＋2．1834D（r=0．9946）;人外周血细胞尾矩TM照射后6h与未照射组相比已无显著性差异（P〉0．05）。以上结果表明,碱性单细胞凝胶电泳是一种快速、灵敏检测DNA损伤的有效方法,具有良好的剂量效应关系;但修复较快,可测时间范围有限。     

腹泻病例中5种致泻性大肠埃希菌的分子分型研究

目的：对腹泻病例中致泻性大肠埃希菌（DEC）进行PCR毒力基因检测,了解其流行特征,通过脉冲场凝胶电泳确定菌株之间的相关性,为预防疾病提供技术支持。方法：采集腹泻患者粪便,利用毛细管电泳仪对可疑DEC进行确认,收集患者信息,采用PFGE技术进行分子分型,用BioNumerics软件进行聚类分析。结果：检出的92例DEC阳性病例中,0～12岁患者15例;13～44岁患者60例;45～59岁患者9例;≥60岁患者8例。92株DEC中共有89种带型,DNA条带相似度为9.36%～100.00%。结论：不同年龄人群检出率有所差异,年龄在13～44岁检出率最高。DEC菌株分子分型带型分散,呈现高度多态性。     

2019年福建省哨点医院腹泻患者中致泻大肠埃希菌感染状况及病原学特征分析

目的 了解2019年福建省哨点医院腹泻患者中致泻大肠埃希菌(DEC)感染状况、毒力基因携带、分子分型及耐药情况。方法 采集腹泻患者210份粪便标本按照GB 4789.6—2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》方法分离大肠埃希菌后进行荧光聚合酶链式反应(PCR)确认,并对分离出的DEC进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及药敏试验。结果 共检出阳性菌株32株,检出率为15.2%(32/210),其中肠道致病性大肠埃希菌(EPEC)占37.5%(12/32),肠道集聚性大肠埃希菌(EAEC)占37.5%(12/32),产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)占25.0%(8/32)。药敏试验结果表明,32株菌对氨苄西林耐药程度最高,耐药率为78.1%(25/32),其次是四环素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑,耐药率分别为62.5%(20/32)和59.4%(19/32)。多重耐药(MDR)率为50.0%(16/32)。PFGE结果表明,32株菌共分为28种PFGE带型,其中12株EPEC共分为10种带型,12株EAEC共分为10种带型,8株ETEC共分为8种带型,其中EPEC聚类分析结果有两组菌株具有100.0%相似带型,EAEC有一组菌株具有100.0%相似带型,ETEC聚类分析没有完全一致的带型。结论 2019年福建省哨点医院腹泻患者DEC感染主要以EPEC、EAEC为主,菌株分型带型存在多样性,菌株耐药状况严重,且存在较高的多重耐药率。     

鲜鸡蛋蛋壳表面细菌多样性分析

目的了解鲜鸡蛋蛋壳表面菌落构成及其随时间的变化情况。方法收集榆林、汉中和西安三个地市不同养殖场的鲜鸡蛋,于不同的时间点进行试验,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)和胶回收测序的方法对细菌构成多样性和样品间相似性进行分析。结果与榆林组和西安组比较,汉中组的Shannon多样性指数和Dice相似性系数差异有统计学意义(P0.05),菌落构成主要为厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),葡萄球菌属(Staphylococcus)、链霉菌属(Streptomyces)和乳酸杆菌属(Lactobacillus)为优势菌属。结论不同地区蛋壳表面的细菌存在多样性和复杂性,而存放初期和末期菌落的相似度较高。     

舟山市一起肠炎沙门菌污染三明治引起食物中毒事件调查

目的 对不同学校发生的一起食物中毒事件开展流行病学调查,分析致病因子和污染来源,指导临床救治并提出预防措施。方法 通过调查病例临床特征和流行病学分布,结合实验室脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术,对不同来源的沙门菌进行同源性分析,同时利用微量肉汤稀释法进行药敏试验。结果 此次事件涉及不同区县的4所学校,共发现疑似病例37例,确诊19例,病例临床特征主要为腹泻(70.27%,26/37)、发热(54.05%,20/37)、腹痛(51.35%,19/37)、呕吐(37.84%,17/37)等。实验室共分离肠炎沙门菌24株,其中19株来自病例,5株来自可疑食品三明治及其原料肉松。经PFGE分型,24株肠炎沙门菌聚类结果为100.00%。经药敏显示,19株病例株对萘啶酸耐药率为100.00%,对头孢西丁和亚胺培南耐药率均为5.26%(1/19)。结论 结合临床表现、流行病学调查、实验室检测结果,证实三明治原料肉松被肠炎沙门菌污染是导致本次事件的主要原因,建议监管部门加强对学校配餐公司的监督管理,提高公司从业人员食品安全意识,防范此类事件的发生。     

快中子照射唐菖蒲球茎的损伤作用初探

用快中子脉冲堆(China fast burst reactor Ⅱ,CFBR-Ⅱ)对唐菖蒲"超级"球茎进行不同剂量的照射处理,研究快中子对唐菖蒲球茎表面的刻蚀情况及对蛋白质表达的阻遏作用.扫描电镜观察发现球茎受损伤情况随照射剂量和照射角度的不同而变化,受垂直方向照射的球茎表面刻蚀程度最严重,且刻蚀程度随着剂量增大而增大.通过田间栽培试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析发现,随照射剂量的增大,植株生长发育受到明显的抑制,蛋白表达数量显著减少.由此表明,快中子照射对植株能产生明显的影响.     

传统浓香型白酒大曲发酵过程中细菌和真菌动态变化研究

研究采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对浓香型白酒大曲生产过程中细菌和真菌群落的多样性进行了研究。结果表明,16S r DNA的条带数、优势度、多样性和相似性在DGGE模式中明显不同,反映了不同阶段存在的细菌群落的广泛多样性。真核微生物群落的条带丰度和优势度在不同时期有所不同。     

单细胞凝胶电泳技术检测碳离子束和X射线照射对Lewis肺癌细胞的DNA损伤

比较研究了 89.63 MeV/u 的碳离子束和 6 MeV 的 X 射线照射 Lewis 肺癌细胞所致的细胞克隆存活和DNA 损伤效应,以探讨单细胞凝胶电泳检测细胞辐射敏感性及重离子束治疗肿瘤的优势.结果表明,在 10%细胞存活水平上碳离子束的相对生物学效应(Relative biological effectiveness,RBE)值达到1.77.单细胞凝胶电泳检测损伤 DNA 尾部百分含量(Tail DNA,TD)和Olive尾矩(Olive tail moment,OTM)的剂量效应曲线表明,X射线的剂量效应曲线为线性,而碳离子束诱导出-个包含线性和指数项的双阶段效应曲线.碳离子束辐照剂量大于8 Gy后TD和OTM都存在饱和效应.在2 Cy的剂量点,高传能线密度(LET)碳离子束比X射线产生更低的存活分数和更高的初始 OTM.本研究提示:在Lewis肺癌细胞中,碳离子束照射比x射线产生更为强烈的细胞致死和DNA损伤效应,可使肿瘤治疗具有更高效率.     

凝胶电泳及其在皮革工业中的应用

本文论述了凝胶电泳分离技术的发展、分离原理及其在皮革工业中的应用。     

基于TPS模型的凝胶图像校正算法研究

对失真的双向凝胶电泳图像进行有效校正是实现凝胶图像高效率、高准确率匹配的前提。针对凝胶图像获取过程中,由于样本结构的差异、凝胶的铸模和聚合、着色和扫描造成的失真,提出将"笑脸"形变模型与薄板样条(TPS)形变模型相结合的形变方法。仿真实验结果表明,形变校正效果有了明显改善。