嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究

目的　建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法　嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果　该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。结论　为进一步研究奠定了基础     

TNT荧光偏振免疫检测方法研究

研究旨在利用新制备的多克隆抗体首次建立2,4,6-三硝基甲苯（TNT）的荧光偏振免疫分析方法．通过设计合成新的TNT半抗原TNT—BSA,偶联载体蛋白后免疫新西兰大白兔,制备亲和力高、特异性强的多克隆抗体．结合新设计合成的荧光示踪物TNT—PDAM建立了TNT的荧光偏振免疫分析方法．试验结果表明,TNT荧光偏振免疫分析方法检测限为7．5μg／L,检测范围为13．8~129．7μg／L,IC50为39．3μg／L．     

抗大肠杆菌荧光抗体的制备及其特性

活体大肠杆菌与弗氏不完全佐剂乳化后注射到新西兰大白兔体内15d后,利用两步沉淀法提取并纯化得到大肠杆菌表面蛋白抗体IgG,与FITC的交联率F/P达到2.7,未发现FITC对大肠杆菌表面蛋白抗体的特异性有显著的影响。将抗大肠杆菌荧光抗体注入小白鼠体内后,除肠道内有荧光显示外,肝脏、心脏、肾脏中未发现荧光显示,表明大肠杆菌只在小白鼠大肠存在,根据观测到的荧光强度可定性和定量地判断大肠中的大肠杆菌。     

鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.     

基于免疫原理的T-S模糊系统在线建模方法

基于人工免疫原理，提出一种在线构造T-S模糊系统的建模方法．该方法结合网格空间划分方法，以建模数据为抗原，模糊规则为抗体，采用人工免疫原理确定系统结构，并应用最小二乘方法估计线性规则后件参数．该方法具有简单、学习速度快、实时性强等特点，适合多输入模糊系统的在线学习和结构调整．     

基于小生境技术的多样性抗体生成算法

新的入侵方法以及网络计算环境的不断变化,使得入侵越来越难以防范.因此应用人体免疫机制构建下一代入侵检测系统成为一个新的研究热点.本文采用一种新的抗原－抗体编码方法,并在此基础上,提出一种基于共享函数的小生境遗传算法,用来产生多样性的抗体基因,最后给出多样性评价函数以验证算法的有效性.实验结果表明:该算法能够使抗体在演化过程中保持较好的多样性.     

一种新的生物分子固定化方法在日本血吸虫压电免疫传感器中的应用

以压电传感器为检测装置,采用等离子体聚合膜沉积技术和纳米金亚单层自组装技术设计传感器的敏感界面,研制了一种新的日本血吸虫免疫传感器.先在石英晶振上沉积正丁胺等离子体聚合膜,利用膜上氨基与纳米金的共价键合作用组装一纳米金亚单层,得到可固定日本血吸虫抗原和易于传感器再生的界面,以牛血清白蛋白(BSA)封闭晶振上的非特异性吸附位点,用于直接响应感染兔血清中日本血吸虫抗体.探讨了纳米金的自组装和抗原包被等主要检测条件的影响;将传感器应用于不同感染程度兔血清样品的检测,结果令人满意.     

抗乳腺癌单克隆抗体6C6和人-鼠嵌合抗体6C6CHI的放射性标记及动物实验研究

为了研究99Tcm标记的抗乳腺癌单抗6C6及嵌合抗体6C6CHI在动物体内的生物学分布及在荷瘤裸鼠肿瘤中的摄取情况,采用改进的Schwartz法进行99Tcm标记抗体。标记后的抗体由小鼠尾静脉注射,观察不同时间的小鼠血液清除、全身清除以及两种99Tcm标记的抗体在荷人乳腺癌MCF7细胞的裸鼠中肿瘤的摄取情况,并在γ相机下于注射后不同时间显像。结果表明,99Tcm标记两种抗体的标记率均大于90％,标记抗体的免疫活性大于80％。99Tcm-6C6的全身清除半衰期为4.1 h,在血液中的半衰期分别为Tα=0.55 h、Tβ=12.42 h;99Tcm-6C6CHI的全身清除半衰期为4.28h,在血液中半衰期分别为Tα=0.98h、Tβ=12.42h。在荷人乳腺癌裸鼠中的体内分布结果是:在注射99Tcm-6C6后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为7.42±0.85和5.67±1.44。除肾外,T/NT(肿瘤/非肿瘤)比值均大于1。在注射99Tcm-6C6CHI后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为4.23±0.64和6.97±0.23,除瘤/血、瘤/肾比值小于1外,其余组织的T/NT均大于1。荷瘤鼠γ显像结果显示:在注射标记抗体后24h,肿瘤显像清晰,除肾外其它脏器无异常浓聚。抗乳腺癌单抗6C6在肿瘤中有较好的特异性,而人源化抗体6C6-CHI的肿瘤摄取稍低于6C6抗体,且血中放射性比6C6抗体高,但肿瘤显像清晰,而其它脏器的T/NT比值大于1,     

基于免疫遗传算法的工艺设计与调度集成

为实现工艺设计与调度的并行分布式集成，建立了工艺规程调度仿真优化的数学模型，确定了模型的决策空间、目标函数及约束条件。提出了一种协同进化免疫遗传算法，用以同时优化零件的备选工艺规程组合和调度方案，通过工艺种群及调度种群的相互促进，实现协同进化，依据抗体的亲和力及抗体浓度来保持群体的多样性，根据抗体的激励度来进行免疫选择，采用最优解保持策略，确保算法的收敛性，考虑编码特点，工艺抗体采用均匀交叉及随机扰动变异，而调度抗体采用均匀顺序交叉及倒位变异。通过对10台设备10种零件的实例仿真，验证了算法的有效性。     

基于改进免疫克隆选择算法的电动汽车充电站选址定容方法

随着电动汽车渗透率的提高,充电基础设施规划应更加科学、合理,提出一种基于改进免疫克隆选择算法的电动汽车充电站选址定容方法。首先,分析充电站的容量、位置和服务范围之间的关系,以充电站的覆盖率和重合度、规划区域内的功率以及充电站的充电功率为约束条件,建立以充电站年总成本最小为目标的充电站选址定容模型。然后,提出一种抗体间亲和力的计算方法以及多项式变异对免疫克隆选择算法进行改进,使其更适用于电动汽车充电站选址定容模型的寻优迭代求解。最后,利用MATLAB进行算例分析,结果验证了模型和算法的有效性。