凉茶中对乙酰氨基酚酶联免疫检测方法的研究

目的:制备并鉴定对乙酰氨基酚多克隆抗体。方法:以对乙酰氨基酚的特征部分为基础设计合成半抗原丁酸酰氨基酚(PCTM-H),并通过活泼酯法将其与载体蛋白BSA、OVA分别偶联制备免疫抗原PCTM-H-BSA和包被抗原PCTM-H-OVA,再经过动物免疫获得多克隆抗体。结果采用间接竞争ELISA法建立标准曲线,测得其IC50为36.0 ng/m L,定量检测线性范围为2.62~320.54 ng/m L,与其它结构类似物的无交叉反应,添加回收实验其回收率在70.0%~90%之间。结论:成功获得抗对乙酰氨基酚多克隆抗体,该抗体可实现凉茶中非法添加对乙酰氨基酚的快速检测。     

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位特异性抗体检测方法的建立与评价

目的建立并评价幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)特异性抗体的检测方法。方法应用纯化的重组HpUreB作为包被抗原,建立检测HpUreB特异性抗体的ELISA间接法。以Hp抗体Western blot检测作为“金标准”,评价所建立方法的真实性和可靠性。结果检测血清特异性IgG的灵敏度为100·0%,特异度为97·7%,阳性预测值为97·2%,阴性预测值为100·0%,约登指数为0·977,符合率为98·7%,试验的一致率为98·5%;检测血清中总的特异性Ig灵敏度为97·1%,特异度为95·3%,阳性预测值为94·4%,阴性预测值为97·6%,约登指数为0·925,符合率为96·2%,试验的一致率为97·8%;检测唾液中特异性sIgA的灵敏度为96·2%,特异度为94·5%,阳性预测值为89·3%,阴性预测值为98·1%,约登指数为0·907,符合率为95·1%,试验的一致率为97·5%;检测粪便标本中的特异性sIgA的灵敏度为92·0%,特异度为90·2%,阳性预测值为85·2%,阴性预测值为94·9%,约登指数为0·822,符合率为90·9%,试验的一致率为98·6%,CV值均小于15%。结论该检测方法真实性、可靠性、重复性良好,能满足临床标本检测的要求。     

结核分枝杆菌Rv0674蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

目的在大肠埃希菌(E. coli)中表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)Rv0674蛋白,纯化后制备多克隆抗体,并检测抗体效价。方法用PCR技术从MTB H37Rv基因组中扩增Rv0674基因,克隆至p EASYBlunt E1表达载体后,转化入E. coli BL21(DE3)中,用优化后的IPTG诱导表达条件表达Rv0674蛋白,His trap TM HP亲和层析柱纯化目的蛋白;将纯化的蛋白腹腔注射BALB/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体效价及特异性。结果成功获得了Rv0674序列正确的重组质粒p EASY-E1-Rv0674,挑选出了高表达Rv0674基因的菌株,确定的最适表达条件为1. 0 mmol/L IPTG 28℃诱导表达8 h,获得了相对分子质量约26 500的可溶性蛋白;免疫BALB/c小鼠后,能刺激小鼠产生多克隆抗体,获得的抗血清具有良好的抗原结合特性,且效价大于1∶51 200。结论成功获得了高纯度的Rv0674蛋白,并首次制备出小鼠抗Rv0674蛋白的多克隆抗体,为进一步研究Rv0674蛋白的功能和临床诊断结核病(tuberculosis,TB)的应用奠定了基础。     

鼠源性抗EHEC O157:H7 Stx2噬菌体Fab抗体库的构建及筛选

目的构建鼠源性抗EHEC O157∶H7 Stx2噬菌体Fab抗体库,并从中筛选特异性的抗体。方法用EHEC O157∶H7 Stx2类毒素免疫BALB/c小鼠,取脾分离淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR分别扩增抗体轻、重链(к和Fd)基因,经双酶切依次克隆入噬粒载体pComb3X中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体M13K07进行超感染,构建抗EHEC O157∶H7 Stx2的Fab噬菌体抗体库。以纯化的Stx2为抗原进行筛选,获得抗EHECO157∶H7Stx2的特异性Fab抗体,Western blot法检测噬菌体抗体与毒素抗原的结合活性,并对所得阳性克隆进行基因序列分析。结果构建了一个库容为1.56×107的Fab抗体库,筛选出3株特异性较强的阳性克隆,其中2个可与Stx2A1亚单位抗原反应,1个可与Stx2B亚单位抗原反应。基因序列分析显示,轻、重链可变区氨基酸序列与GenBank中已注册的鼠免疫球蛋白可变区氨基酸序列同源性分别为98.5%和99.6%。结论已成功构建了鼠源性抗EHEC O157∶H7 Stx2噬菌体Fab抗体库,为进一步制备抗EHECO157∶H7Stx2的治疗性人源化抗体奠定了基础。     

应用危险理论的网络安全风险感知模型

网络风险评估为积极主动的安全防御提供了可靠依据。借鉴免疫危险理论,利用抗体浓度,提出了一种网络风险实时、定量的感知（检测和评估）模型。建立了基于动态自体的自体耐受、各类抗体的数学模型及动力学演化方程、抗体浓度的定量表示方法;提出了采用随机生成和抗体基因库相结合的未成熟抗体生成机制,并采用疫苗接种和分发机制提高了网络主动检测能力;最后对模型进行了仿真和对比实验。结果表明,该模型可以高效检测出网络攻击,并能正确评估主机及网络面临每一类攻击时的风险以及整体综合风险。同时,该模型经过适当变换,还可以应用于病毒检测及垃圾邮件识别等相关领域。     

膜性肾病诊断与治疗新进展

膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是一种独特的肾小球病变,是成人中非糖尿病性特发性肾病综合征的最常见原因。约80%MN病例的病因是特发性的,20%与其他全身性疾病或暴露有关。抗磷脂酶A2受体抗体与特发性MN有关,这一发现可能有助于MN的诊断和预后。目前MN的治疗主要为最佳支持治疗,包括血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂的应用,降脂药和良好的血压控制。免疫抑制剂应用于患有难治性蛋白尿或肾病综合征伴相关并发症的患者,现有证据也支持使用类固醇和烷化剂的组合。本文综述了MN的诊断和治疗的最新研究进展。     

临江市学生麻风腮抗体检测分析

目的:对临江市中小学生及幼儿进行麻疹、风疹、流行性腮腺炎抗体检测,为有效控制麻风腮流行提供依据。方法:采集静脉血,采用ELISA法检测麻疹、风疹IgM、IgG,流行性腮腺炎。结果:麻疹抗体阳性:托幼机构415人,占98.6%;小学415人,占88.9%;初中850人,占88.5%;高中1802人,比率为85%。风疹抗体阳性:幼儿园764人,占91%;小学1908人,占90%;初中424人,占92%。流行性腮腺炎抗体阳性:小学596人,百分率为85.4%,初中922人,百分率为82%,高中798人,百分率为77.9%。结论:麻疹抗体阳性率随着年龄的增大呈下降趋势,年龄越大的孩子抗体越低;风疹抗体不随年龄的增长而发生变化;腮腺炎抗体水平随着年龄的增长逐渐降低。     

北海市疾控中心HIV抗体检测确证实验室通过评审验收

近日，广西北海市疾控中心HIV抗体检测确证实验室通过了卫生部专家的现场评审。     

抗心磷脂抗体与缺血性脑血管病关系的研究进展

抗心磷脂抗体（ACA）是一组能与磷脂特异性结合的多克隆免疫球蛋白。它与许多免疫介导的血栓性疾病密切相关。近年研究发现ACA是急性缺血性脑血管疾病的独立危险因子。笔者就抗心磷脂抗体与缺血性脑血管病关系的研究进展综述如下。     

治疗性抗体的研究现状与未来

从全人源化抗体的研究进展,当前治疗性抗体的临床研究现状及未来治疗性抗体发展展望三方面介绍治疗性抗体的研究现状,分析未来发展趋势。首先比较了不同方式生产的全人源化抗体及其与部分人源化抗体之间的差异,详细阐述了噬菌体展示技术和转基因技术两种全人源化抗体生产关键技术的研究进展,各自的优势、不足及今后的发展方向;然后分析探讨当前治疗性抗体的临床现状、治疗性抗体的作用机制、治疗性抗体研究中靶抗原选择以及目前治疗用抗体生产和临床应用方面面临的关键技术问题;最后对未来治疗性抗体发展进行展望分析,指出小型化抗体、免疫偶联物、双功能抗体、细胞内抗体、Fc改造抗体、抗体糖基化改造及治疗性多克隆抗体将是未来抗体的重要发展方向。