酶法水解珍珠贝肉蛋白质的工艺探讨

研究了用双酶水解技术对马氏珠母贝肉进行水解的条件。结果表明：枯草杆菌中性蛋白酶：在ｐＨ６．５、温度４０℃、酶浓度３×１０３Ｕ／ｍｌ、Ｋ＋浓度０．１２％、水解时间３．０ｈ后；再用胃蛋白酶水解：ｐＨ３．０，温度６０℃，酶浓度４．５Ｕ／ｍｌ、水解时间３．０，最适底物浓度为原料与水比例１：３进行水解，蛋白质水解率为６６．２％。水解液可用于生产海鲜调味料及功能性蛋白饮料。     

珍珠贝肉蛋白饮料的研制

研究了用马氏珠母贝肉水解液制作蛋白饮料的工艺。结果表明:采用枯草杆菌中性酶和胃蛋白酶复合水解,蛋白质水解率可达66.2%。水解液经脱腥、脱色处理,再用山楂、红枣、白砂糖进行调配,制成营养丰富,具有一定保健功能的蛋白饮料。     

珠母贝糖蛋白分离提取工艺条件优化

采用单因素实验与正交实验,研究珠母贝全脏器中糖蛋白的分离提取工艺条件.结果表明:珠母贝全脏器中糖蛋白的最佳分离提取条件为:以1.0 mol/L NaCl溶液为浸提剂,料液比为1:10,浸提温度为65 ℃,浸提时间为60 min,提取液经透析浓缩、醇沉后得到珠母贝糖蛋白,得率为3.37%,总糖和总蛋白含量分别为7.49%和25.33%.     

马尾松刨花板新工艺的研究

从抽提物影响胶合角度出发,采用不同的水热处理时间、温度等工艺参数对马尾松刨花进行水热处理,实现刨花表面钝化或活化,压制刨花板.结果表明当水热处理温度为100℃、处理时间为60min、施胶量为7.5%时,刨花板甲醛释放量为10.2mg/100g,达到国家E2级标准;其他各项力学性能指标如静曲强度、内结合强度等均满足国家标准要求.     

阿维菌素特异性半抗原合成及多克隆抗体的制备

合成具有阿维菌素特征结构的半抗原,采用活化酯法与载体蛋白BSA偶联制备人工抗原.通过免疫新西兰大白兔成功制备阿维菌素多克隆抗体,抗体效价达1∶20 000,用此抗体建立的阿维菌素间接竞争酶联免疫标准曲线IC50为1.92 ng/mL,IC15为0.13 ng/mL.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇人工抗原和多克隆抗体的制备

对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的两种半抗原合成方法进行对比研究,合成半抗原,并采用活化酯法将半抗原与牛血清白蛋白偶联制备得到免疫原,通过特定程序免疫日本大耳白兔获得了多克隆抗体.抗血清效价为1∶32 000,proteinA-sepharose 4B 亲和层析纯化的DON抗体与DON、3-AC-DON(3-乙酰氧基脱氧雪腐镰刀菌烯醇)、15-AC-DON(15-乙酰氧基脱氧雪腐镰刀菌烯醇)、T-2毒素、OTA(赭曲霉A)、ZEN (玉米赤霉烯酮)的交叉反应率分别为:100%、500%、2.50%、0.10%、0.01%、0.01%,表明了所制备DON抗体的高特异性.     

弧菌外膜蛋白Ompk基因序列分析及其多克隆抗体的制备

弧菌外膜蛋白（outer membrane protein,OMP）OmpK不仅可激发机体的体液免疫和细胞免疫,而且可在不同血清型菌株之间产生免疫交叉反应。本研究利用克隆测序和查找GenBank获得20 株弧菌的Ompk基因序列并构建Ompk系统进化树,对比分析20 株弧菌Ompk基因序列;利用原核表达系统表达野生株Vibrio parahaemolyticus B的OmpK,纯化OmpK后制备兔多克隆抗体;采用酶联免疫吸附分析法和蛋白质印迹法（Western-blotting）分别检测抗体效价和特异性。系统进化树和基因序列比对结果显示Ompk基因在弧菌中高度保守,核苷酸序列相似性在77%以上;原核表达系统成功表达了弧菌OmpK,蛋白经纯化后成功制备的兔多抗效价达1∶16 000;Western-blotting实验证实抗体具有很好的特异性;OmpK多克隆抗体在弧菌中普遍存在免疫交叉性。因此,弧菌Ompk基因序列分析及其抗体研制,不仅为弧菌快速免疫学检测提供可能性,也为以OmpK为靶点的水产疫苗研制奠定了基础。     

采前翠贝喷洒及采后壳聚糖涂膜对厚皮甜瓜低温贮藏期间冷害及品质的影响

厚皮甜瓜(Cucumis melo L.)对低温敏感,在低温条件下贮藏易发生冷害,导致果实品质下降,货架期缩短。本实验以"玛瑙"厚皮甜瓜为材料,研究了在果实发育期(幼果期、膨大期、网纹形成期及采前48 h)单独400 mg/L翠贝4次喷洒、采后单独1.5%壳聚糖涂膜及采前、采后结合处理对果实低温(5℃)贮藏期间冷害及品质的影响。结果表明,采前单独翠贝喷洒或结合采后壳聚糖涂膜均可有效减轻贮藏期间的厚皮甜瓜冷害,明显降低果实细胞膜渗透率和丙二醛(MDA)含量,其中以采前翠贝处理对冷害的控制效果最好,在贮藏第21 d时,处理果实的冷害指数仅相当于对照组的1/3。同样,以上3种处理还延缓了贮藏期间果实可溶性固形物(TSS)和可滴定酸(TA)的下降,保持了果实良好的品质。其中,采前翠贝处理对维持果实的硬度和亮度、色泽效果较好;而采后壳聚糖涂膜对延缓果实TSS下降,降低失重率的效果较为突出。     

免疫乳对肠道菌群的调节作用

以24种人肠道病原茵作为抗原对乳牛进行免疫，制得的免疫乳中乳抗体的凝集价为非免疫乳的64倍。以免疫乳作为原料制备的免疫乳粉具有调节肠道茵群的作用。结果表明免疫乳粉较普通乳粉可显著增加小鼠肠道中双歧杆茵和乳杆茵的数量以及肠道中乳酸和已酸的含量，同时可显著降低小鼠肠道中肠球茵、大肠杆茵及产气荚膜梭茵的数量。     

抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定

目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。