Short communication: Quantitative PCR coupled with sodium dodecyl sulfate and propidium monoazide for detection of culturable Escherichia coli in milk

Escherichia coli has been frequently reported as a major foodborne bacterium contaminating raw milk or pasteurized milk. Therefore, the aim of this study was to explore a quantitative real-time PCR (qPCR) technique combined with sodium dodecyl sulfate (SDS) and propidium monoazide (PMA) to detect culturable E. coli in milk. An internal amplification control was also added into this reaction system as an indicator of false-negative results. The inclusivity and exclusivity of the primers were tested using DNA from 7 E. coli and 14 other bacterial strains. The concentrations of SDS and PMA were determined according to plate counts and quantitative cycle values of qPCR, respectively. A standard curve was established using series diluted E. coli DNA. The reliability and specificity of this method were further determined by the detection of E. coli in spiked milk. The results showed that the optimal concentrations of SDS and PMA were 100 µg/mL and 40 μM, respectively. A standard curve with a good linear relationship (coefficient of determination = 0.997; amplification efficiency = 100.5%) was obtained. Compared with conventional PCR and PMA-qPCR, the SDS-PMA-qPCR assay was more specific and sensitive in culturable E. coli detection. Therefore, we evaluated and improved the SDS-PMA-qPCR method for detecting culturable E. coli in milk.     

胡萝卜中天然胡萝卜素提取工艺的研究

对胡萝卜中胡萝卜素的提取条件进行了系统的研究,结果表明,提取的最佳工艺条件是：以1：1.5丙酮-氯仿为浸提剂,在料液比为1：6,温度为45℃条件下,浸提3次,每次60min.     

超临界甲醇法制备文冠果种仁油生物柴油研究

研究超临界甲醇法制备文冠果种仁油生物柴油时温度、醇油摩尔比、反应时间和助溶剂对油脂转化率影响,并对制备生物柴油样品进行质量指标分析。结果表明,文冠果种仁油在超临界甲醇中较为适宜转酯化反应条件为:反应温度350℃,醇油摩尔比40∶1,反应时间15 min,油脂转化率为91.25%;且生物柴油样品多项理化指标基本达到美国ASTM生物柴油标准,并与中国0#柴油标准接近。     

1-MCP·OHAA在小白杏贮藏保鲜中的应用研究

以小白杏果实为试材,以1-甲基环丙烯(1-Methylcyclopyopene,1-MCP)和环氧乙烷高级脂肪醇(Oxyethyene higher aliphatic alcohol,OHAA)为保鲜材料,在温度为-1℃~0℃、相对湿度为80%~90%的条件下贮藏小白杏,比较经1-MCP处理与1-MCP.OHAA复合小白杏的贮藏效果。结果表明,1-MCP.OHAA复合处理可降低果实CAT和SOD的活性,推迟CAT和SOD峰值的出现时间,有效延缓果实硬度和VC含量的下降,延缓果实的衰老。小白杏经1-MCP.OHAA涂膜保鲜剂的处理可延缓果实衰老,明显延长其贮藏期。     

酶催化甘油解法制备甘油二酯马油工艺研究

优化酶催化甘油解法制备甘油二酯马油的工艺。以粗马油、甘油为原料,脂肪酶催化合成甘油二酯,采用单因素结合正交试验法,以甘油二酯含量为考察指标,对底物比(粗马油∶甘油)、反应温度、加酶量及反应时间等工艺进行优化,并用CS-9301薄层扫描仪,对甘油二酯进行定性定量检测。结果表明:甘油解法制备甘油二酯马油的最佳条件为粗马油∶甘油(1∶0.5),加酶量为每克粗马油400U脂肪酶,反应时间6h,反应温度40℃,所得甘油二酯马油中甘油二酯的含量达44.18%。     

响应面优化酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺

为优化碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化活性肽的工艺条件,考察酶解条件对酶解产物的抗氧化活性的影响。以羟基自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率、还原能力为考察指标,使用响应面分析法,研究温度、pH值、底物浓度和酶添加量对制备抗氧化活性肽工艺的影响。经过优化得出最优酶解条件为:温度51℃、pH值8.13、底物浓度3.16%、酶添加量3.30%,在此最优条件下核桃多肽对羟基自由基的清除率为55.93%、对超氧阴离子自由基的清除率为47.85%、还原能力为55.34%。在10mg/mL的浓度下,核桃多肽的还原能力是VC的55.3%,对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别是VC的93.8%和52.2%。     

饲养方式对新疆多浪羊肉品质的影响

分别以戈壁滩放养及工厂集约化饲养的6 月龄多浪羊背最长肌为对象,分析测定不同饲养条件下羊肉的屠 宰性能、pH值、持水力、嫩度、色泽、抗氧化能力、脂肪酸含量、肌原纤维超微结构等指标。结果表明：工厂集 约化饲养组多浪羊肉的嫩度、成熟7 d的亮度值和脂肪酸总量优于戈壁滩放养组（P＜0.05）,而戈壁滩放养组多浪 羊肉的持水力、抗氧化能力、宰后1 d的红度值及多不饱和脂肪酸含量优于工厂集约化饲养组（P＜0.05）;工厂集 约化饲养组多浪羊肉肌原纤维密度较大、直径小,肌原纤维之间排列紧密;而戈壁滩放养组的多浪羊肉肌原纤维密 度小、直径大,肌原纤维之间空隙较大。两种饲养方式各有优势,在生产中可考虑结合已有的饲养条件加以完善, 以生产出更优质的羊肉。     

熟制凡纳滨对虾优势腐败细茵的分离鉴定及抑茵剂的筛选

筛选出适用于熟制凡纳滨对虾的生物抑菌剂,以期延长熟制凡纳滨对虾的货架期。对熟制凡纳滨对虾中优势腐败细菌进行分离鉴定,采用牛津杯法研究不同浓度壳聚糖、乳酸链球菌素(Nisin)和溶菌酶对分离到的优势腐败细菌的抑菌效果。结果表明,从熟制凡纳滨对虾中分离到的2株优势腐败细菌,一株属于芽孢杆菌属,一株是白色海球菌;壳聚糖对2株优势腐败细菌均有抑菌作用,抑菌效果随着壳聚糖浓度的增大而增强,2株优势腐败细菌对浓度为15.0mg/100mL的壳聚糖高度敏感。Nisin和溶菌酶对2株优势腐败细菌无抑菌作用。     

不同抗氧化剂体外抗氧化活性及其对肉品氧化稳定性的影响

为明确GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中允许添加至热加工肉制品使用的不同抗氧化剂的体外抗氧化活性与其抑制肉制品蛋白质氧化和脂肪氧化能力之间的关系,分别测定8种抗氧化剂的体外抗氧化活性(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由...     

葵花籽多肽的制备及其降压活性研究

试验以低温脱脂葵花籽粕为原料,进行脱脂和脱绿原酸处理后,用碱性蛋白酶制备葵花籽多肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,对底物浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和pH值进行单因素试验,在此基础上采用响应面试验优化碱性蛋白酶制备葵花籽多肽的最佳水解工艺。结果表明:底物浓度为15g/mL、加酶量为3 700U/g、酶解温度为56℃和pH值为8.2的条件下水解3h,ACE抑制率可达63.74%。