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为了寻找和挖掘降解岩藻多糖的新型酶,以从海带中筛选获得的一株可以降解岩藻多糖的海洋黄杆菌Flavobacterium sp. RC2-3为研究对象,对其进行了全基因组测序。通过与已报道的岩藻多糖酶氨基酸序列比对,并进行转录组学分析及实时荧光定量PCR验证,挖掘了1个可能的岩藻多糖酶基因,并将其命名为Fcn1Fcn1基因全长1221bp,编码406个氨基酸,蛋白分子质量约为46.8kDa。通过引物设计、PCR扩增,将Fcn1基因克隆,进一步构建了Fcn1基因异源表达载体Fcn1-pET-28a(+),并将其成功地在大肠杆菌BL21(DE3)表达宿主中进行了诱导表达。所得重组酶Fcn1通过带有His标签的镍柱进行分离纯化,采用铁氰化钾法测定纯化酶酶解岩藻多糖的比酶活(332U/mg),纯化倍数为2.25。酶学性质研究表明,重组酶Fcn1最适反应温度为50℃,最适反应pH值为8.0,在20~30℃和pH值为7.0~8.0时表现出较好的稳定性。结合酶学性质研究结果,确定酶的最适反应条件为30℃,pH值为8.0,并测定了岩藻多糖酶水解反应的动力学参数,Km为1.17mg/mL,Vmax为10.53g·L-1·min-1。该酶降解岩藻多糖的酶活力较高,在岩藻多糖资源的开发领域具有较大应用潜力。  相似文献   
2.
本文针对输电线路盐灰密取样的各种困难,提出了新的简便易行的方法,使得测试工作量降低,提高工作效率的同时节省人力物力。  相似文献   
3.
对常用的3种插入角钢操平找正施工方法进行了分析和对比,重点介绍悬吊式插入角钢操平找正方法。在插入角钢无预留高尺寸计算模型的基础上,利用基础中心整体旋转原理,分别用极坐标法和简化方法对有预留高情况下的插入角钢控制尺寸进行了推导,并给出了插入角钢悬吊法的操作步骤、操作注意事项及工程计算实例。悬吊式插入角钢操平找正方法,具有操作简便、施工效率高等特点,可在输电线路铁塔基础施工中推广应用。  相似文献   
4.
为保证信号测量可靠性和精确度,有效抑制工频干扰信号,提出了一种消除工频干扰的新方法.此方法避免了工频干扰的参数估计问题,也不需要单独输入参考源信号.以非负矩阵分解(NMF)为理论依据,以相似系数和重构信噪比为评估标准,进行工频干扰的消除.利用盲源分离思想,采用改进的多层NMF算法,对模拟数据和实测数据进行处理,有效完成了工频干扰信号的消除.  相似文献   
5.
盲信号恢复是从退化的信号中识别出真实的信号,由于其有广泛的应用前景,因而引起了众多学者的研究兴趣。非负矩阵分解作为一种强大的特征提取方法,已经在许多领域得到了很好的应用。本文把非负矩阵分解理论运用到盲信号的分离问题中,提出了一种基于定点非负矩阵分解(FPNMF)的盲信号恢复方法。该方法特点是借鉴盲源分离理论直接从观察信号中辨识原信号。实验中对大量模拟数据进行了盲处理和分析,结果表明本文提出的方法具有较强的有效性和鲁棒性。  相似文献   
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