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目的原核表达埃可病毒6型表面特异性蛋白VP1,并制备其多克隆抗体。方法筛选VP1蛋白氨基酸序列中抗原性强的片段,优化基因序列,分别构建重组表达质粒p GEX-4T-2-vp1和p ET-28a-vp1。将经双酶切及测序鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,进行15%SDS-PAGE鉴定。将融合蛋白VP1-GST及VP1-His分别用Glutathione resin和High Affinity Ni-NTA resin进行纯化。以纯化后的VP1-His融合蛋白作为免疫原免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,以VP1-GST融合蛋白为检测抗原,间接ELISA法检测血清抗体效价,Western blot法检测血清抗体特异性。结果经双酶切及测序鉴定证明,重组质粒p GEX-4T-2-vp1和p ET-28a-vp1构建正确。VP1-GST和VP1-His融合蛋白的相对分子质量分别为38 000和19 000,两种融合蛋白分别以可溶性蛋白和包涵体形式表达,约占菌体总蛋白的60%和30%,纯化后的纯度均90%。兔抗VP1血清效价为1∶320 000,可与融合蛋白VP1-GST和VP1-His发生特异性结合。结论成功原核表达了融合蛋白VP1-His和VP1-GST,且VP1-His具有良好的免疫原性,其制备的多克隆抗体的特异性较好,为埃可病毒快速检测技术的建立奠定了基础。 相似文献
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质量是企业的生命线,一个企业的产品,如果没有过的硬的产品质量,它将无法在市场中立足,尤其对一个生产电梯安全部件的企业,近几年来,在质量管理工作方面东方富达机械做了很多努力:先后通过了IS09000质量认证、韩国K认证、加拿大焊接局CWB认证等一系列认证工作, 相似文献
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在不同碘浓度(碘加热温度分别为40℃,65℃,110℃)和流动高纯氩的气氛下,经再结晶退火和消除应力退火的非辐照锆-2和锆-4合金,分别在300℃,350℃和400℃的温度下,进行了单轴拉伸试验,以便了解材料状态、微观组织对锆合金碘致应力腐蚀行为的影响。试验结果表明,在应力腐蚀过程中的初始阶段,由于晶间腐蚀行为与材料微观组织有关,晶粒度对材料应力腐蚀行为(对不同碘浓度)均很敏感;在相同试验温度下,碘浓度增加使裂纹生长加快;随着试验温度提高,裂纹生长速率增加;由于织构影响,再结晶退火材料比消除应力退火的材料好。 相似文献
8.
为更好地与世界电梯市场接轨,更快地引进国外电梯先进技术,由公司董事长王光明带队,生产副总经理陈志近、销售公司经理孙刚、对外贸易部经理马晓峰、缓冲器分厂厂长张振平、上海销售部冀菱电梯有限公司销售经理王永革等人以强大阵容参加了4月9~12日在土耳其伊斯坦布尔举行的第十一届国际电梯展览会。 相似文献
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一、IQNet SR10标准的由来IQNet SR10标准最初是由西班牙标准协会(AENOR)制定的,AENOR在多年前就开始了对社会责任管理领域的技术研究,并制订了IQNet SR10的前身——AENOR R S10。2011年,该标准正式转换为国际认证联盟IQNet的国际标准即IQNet SR10。 相似文献
10.
迄今为止,全世界除极个别国家之外,都纷纷走上了市场经济的道路,可以说,全世界已经出现了市场经济一体化的大趋势和总趋势。市场经济观念已经成为人们从事社会经济的支点。随着市场经济的发展,许多科研机构、事业单位和国有企业都进行了体制改革,在管理方面发生了巨大的变化。这种为适应计划经济需要而设置的所谓事业编制的技术机构,该如何适应市场经济的需要,已是摆在我们面前的一个课题。 相似文献