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为了研究遗传密码子对表达调控的影响,利用PCR重叠延伸法,对萝卜抗真菌蛋白Rs-AFP2基因编码序列区的部分核苷酸进行沉默突变,构建突变体Rs-AFPm.序列分析表明,PCR产物全长240bp,有一个阅读框,编码的蛋白由29个氨基酸的信号肽和51个氨基酸的抗真菌蛋白组成.突变体与突变前的Rs-AFP2基因相比,在编码区第3号氨基酸Lys相差一个碱基(TTG→TTA),第5号氨基酸Gln相差一个碱基(CAG→CAA),第6号稀有密码子Arg相差两个碱基(CAG→CGA).重新合成引物,将切除信号肽的Rs-AFP2基因和Rs-AFPm基因与原核表达载体pET-21b(+)分别重组到大肠杆菌BL21菌株.IPTG诱导后,二者均得到了表达.软件分析显示,突变前pETAFPo表达产物占全菌蛋白的3%,突变后pETAFPm的表达产物占全菌蛋白含量的8%;表达蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经超声波破碎后,蛋白质复性,抑菌结果表明,pETAFPm表达产物的抑菌半径大于pETAFP2表达产物的抑菌半径.这些都说明改造后的Rs-AFPm基因与Rs-AFP2基因相比,已有效地提高表达量. 相似文献
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柔性桩沉降可靠性的简化分析公式 总被引:1,自引:1,他引:0
本文提出了结合分层的剪切位移法、摄动法和随机场理论来计算柔性桩沉降可靠度的简化方法,并用随机有限元和蒙特卡洛模拟法对此简化模型的精度进行了对比分析,分析结果表明该方法计算简便,精度较高。通过算例发现,在土的变形模量为小变异的情况下,其概率模型对桩的沉降可靠度影响不明显,因此其概率模型可近似采用正态分布;在土的变形模量为大变异的情况下,其概率模型对桩的沉降可靠度影响非常明显,在选择概率模型时要慎重。对于土的变形模量服从对数正态分布的情况,采用将其当量正态化后的中心点法即使在参数大变异的情况下也可以获得理想的计算精度。 相似文献
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柴达木盆地油泉子油田储层构造裂缝定量预测 总被引:2,自引:0,他引:2
油泉子油田油藏类型属构造裂缝型,储层的分布主要受裂缝发育程度的控制,因此,储层构造裂缝的预测有着特别重要的意义。通过有限元数值模拟,包括裂缝形成时期的确定,古差应力值大小估算,最大主应力方向的确定,地质模型,力学模型,计算模型的建立以及裂缝的模拟计算,最终绘制出裂缝破裂率及裂缝方位分布图,通过分析,预测结果;裂缝方位为NNE,NW向,与测井识别和岩心剩磁定向基本吻合,裂缝预测方位平面和纵向上变化较小;沿构造转折部(背斜轴部)裂缝较发育,在构造的两翼裂缝发育较差,与岩心,井史资料描述裂缝分布一致;各层裂缝发育在纵向上交错分布并相互重叠,但总体上发育区相似,只是发育区大小各不相同。 相似文献
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中国珠宝销售的可持续发展 总被引:2,自引:1,他引:1
通过对改革开放20多年来中国珠宝业发展的回顾与分析, 认为在激烈的市场竞争中, 珠宝业要达到可持续发展必须具备6个要素: (1)敬业精神; (2)信用意识; (3)创新意识和创新能力; (4)激励机制和团队精神; (5)资本营运和资源整合能力; (6)关系营销技巧. 相似文献
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