大豆球蛋白鼠源多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

为建立大豆球蛋白的免疫学快速检测方法并对其进行相关脱敏研究,采用Deak法从脱脂豆粉中分离出大豆球蛋白,经过CL-6B柱层析进一步纯化,制得纯度较高的大豆球蛋白,并以此为免疫原,与佐剂1:1混合并充分乳化,采用背部多点注射法对6只Balb/c雌性小鼠进行免疫.免疫程序结束后得到4种多抗血清效价在1:6400以上,达到实...     

花生球蛋白鼠源多克隆抗体的制备及免疫学特性鉴定

为建立花生球蛋白致敏原的免疫学快速检测方法,采用碱溶酸沉法提取花生球蛋白,经SDS-PAGE检测蛋白纯度后,免疫5只6～8周龄的Balb/c雌性小鼠制备花生球蛋白鼠源多克隆抗体(多抗)血清,并进行免疫学特性鉴定。结果表明：免疫结束后得到的5个多抗血清效价均在1∶51 200以上,均具有一定的敏感性,其中2号小鼠的多抗血清敏感性较好,半数抑制浓度为320 ng/mL;制备的多抗血清特异性较强,2号小鼠的多抗血清与伴花生球蛋白、大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、牛血清白蛋白、麦朊蛋白、乳清蛋白的交叉反应率均较低,在0.5%以下;Western blot鉴定结果表明成功制备出了花生球蛋白鼠源多克隆抗体。综上,获得了效价高、敏感性强、特异性优良的花生球蛋白鼠源多克隆抗体,为其单克隆抗体的制备及免疫学快速检测方法研究奠定了基础。     

高蛋白食品中杂环胺形成与控制的研究进展

高蛋白食品在高温热加工过程中,会由还原糖、肌酸(酐)、氨基酸、肽和蛋白热反应产生一类统称为杂环胺的具有致畸、致癌性的芳香族化合物.研究食品热加工过程中杂环胺的生成机制及对应的抑制机理,是食品安全领域一直关注的热点问题.详细探讨了包括前提物在内影响杂环胺生成的主要因素,介绍了抑制杂环胺生成的技术手段,包括使用微波、红外、...     

大豆球蛋白兔源多克隆抗血清的制备及其免疫学特性鉴定

为建立大豆球蛋白致敏原检测方法和蛋白致敏性亚基的表位定位,从脱脂豆粉中分离纯化大豆球蛋白,制备多克隆抗血清,并进行免疫学特性分析。大豆球蛋白等电点pH值为6.4,采用碱溶酸沉法对大豆球蛋白进行粗提,用Sepharose CL-6B层析纯化大豆球蛋白粗提物,用SDS-PAGE检测蛋白纯度,免疫新西兰兔制备多抗血清,并对血清进行免疫学特性鉴定。结果表明:1号兔效价达到1∶6×10^4,由间接竞争ELISA抑制曲线可知,半数抑制率IC50为527 ng/mL,1号兔的多抗血清敏感性最高。特异性测定结果表明,该多抗血清除了与β-伴大豆球蛋白和花生蛋白的交叉反应率为8.6%和4.6%,与其他蛋白交叉反应率均小于0.2%。制备的兔源多抗血清效价高、敏感性强、特异性好,为大豆球蛋白单克隆抗体的制备及大豆蛋白致敏性亚分子结构的定位奠定了基础。