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用PCR技术扩增了人热激蛋白27(Hsp27)基因,构建了原核表达载体pGEX-4T-1-Hsp27。经IPTG诱导表达了带有GST标签的重组人Hsp27,SDS-PAGE鉴定显示该重组蛋白的分子量为44 kD。利用谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和层析纯化了该重组蛋白,经串联质谱检测证明了该重组蛋白为人Hsp27。本研究为制备Hsp27抗体及进行Hsp27的功能研究奠定了基础。 相似文献
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利用FK506(Tacrolimus)对乳腺肿瘤细胞株MCF-7进行体外作用研究,发现FK506可以抑制其增殖.MTT检测结果显示,24 h与48 h的半抑制浓度基本一致,说明其在较短时间内即可发挥有效作用.细胞形态学观察以及细胞染色表明,FK506没有诱导细胞凋亡,而是阻抑了细胞的分裂.进一步经双向电泳(2-DE)蛋白质表达图谱和MALDI-TOF-TOF质谱分析,发现有17种蛋白在FK506处理细胞前后发生明显的表达量上的差异,并进一步从中鉴定出12种蛋白.这些蛋白,按其功能主要分为两大类:一类参与调节细胞骨架的装配与运输,从而影响到神经发育与细胞分裂;另一类,与基因存在密切的相互作用,参与了其复制、修复、转录调节以及翻译后蛋白的折叠,从而影响细胞分裂周期与凋亡.这些差异蛋白为明确FK506抑制细胞增殖的作用机制提供了基础,同时,FK506可以抑制乳腺肿瘤细胞增殖这一功能,也为其成为临床治癌药物提供了可能性. 相似文献
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