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将PCR扩增的人溶菌酶编码基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,双酶切和测序鉴定表明,重组载体构建正确.电转化毕赤酵母GS115菌株,通过G418筛选获得高拷贝重组菌株后,用甲醇诱导表达;通过SDS-PAGE检测证明上清中有目的蛋白,表达产物与预期大小的人溶菌酶蛋白分子质量15 ku一致,其表达量占分泌总蛋白... 相似文献
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将PCR扩增的人溶菌酶编码基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,双酶切和测序鉴定表明,重组载体构建正确。电转化毕赤酵母GS115菌株,通过G418筛选获得高拷贝重组菌株后,用甲醇诱导表达;通过SDS-PAGE检测证明上清中有目的蛋白,表达产物与预期大小的人溶菌酶蛋白分子质量15ku一致,其表达量占分泌总蛋白的32%。体外抑菌实验证实重组人溶菌酶蛋白对溶壁微球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草杆菌均有明显的抑菌作用,表明在毕赤酵母中成功表达了重组人溶菌酶。 相似文献
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采用富集培养的方法从农药厂活性污泥中筛选出一株高效氯氰菊酯降解菌DL-3,通过形态结构、生理生化及16SrDNA鉴定为芽孢杆菌属。该菌能以高效氯氰菊酯为唯一碳源,7d对100mg/L的高效氯氰菊酯的降解率达到67.5%。DL-3降解高效氯氰菊酯的最适温度为37℃,最适pH 7.0。DL-3对高效氯氰菊酯的耐受能力可达400mg/L,添加一定量的营养物质能显著提高DL-3的降解能力。Bacillus sp.DL-3降解高效氯氰菊酯的研究为农药残留的微生物修复提供了理论依据。 相似文献
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