UV法测定聚甲基丙烯酸酯纳米粒中胰岛素的包封率

建立一种简便易行的测定聚甲基丙烯酸酯胰岛素纳米粒中游离胰岛素含量方法.用Nanosep OD100C33超滤膜分离纳米粒和游离药物,在276 nm处测定药物的吸光度,建立胰岛素含量测定方法,并对线性、回收率、精密度等指标进行考察,最后测定各种胰岛素和载体比例混合的纳米粒的包封率.结果发现,该超滤膜能较好地分离纳米粒和游离的药物,在0.11～1.10 u/mL范围内,药物在276 nm的吸光度和浓度存在良好的线性关系(r=0.999 8),线性方程为A=0.868 8C-0.001 6,高、中、低3种浓度的回收率和精密度良好.该方法操作简单、结果可靠,可用于胰岛素纳米粒中药物包封率的测定.     

含气脂质体的超声波介导体外基因输送的实验研究

研究不同超声频率对含气脂质体声致基因转染效率的影响.采用物理及化学法制备含气型脂质体,并比较不同磷脂配比的含气脂质体含气量差异.以不同频率超声联合化学法制备的含气脂质体转染A549细胞,比较各组报告基因的转染效率.结果表明:应用化学法制备的含气脂质体含气量显著高于物理法,脂质体含气量在卵磷脂与胆固醇配比为7∶3时达到最大值(21%);频率为45kHz的超声波转染效率显著高于其他频率对照组(p0.001),其中以含气脂质体与质粒电荷比1∶1与1∶2时为最佳.超声波联合含气脂质体可以成功介导报告基因的转染,是一种极有希望的基因输送方法.     

中药强痛消提取方法和组方研究

探讨了中药强痛消的原料药加工、提取方法和处方组成.利用小鼠福尔马林法、小鼠热水缩尾法、小鼠热板法等镇痛模型评价香附不同方法提取物及其复方的镇痛活性.结果表明:相同剂量、相同途径给药,香附水煎提取物镇痛活性最小,乙醇提取物的镇痛活性稍优,SFE-CO2提取物(Ha)的镇痛活性最佳;Ha与防己SFE-CO2提取物配伍能增强镇痛效果;Ha和Cd组成复方后,镇痛作用更强,两者以1:1配伍,400 mg/kg镇痛作用与曲马多50 mg/kg的镇痛作用等效.以Ha和Cd按1:1配伍构成的强痛消是一种强效镇痛中药.     

BAPTA-AM脂质体抗大鼠急性肾损伤作用

为了观察BAPTA-AM脂质体(BAPTA-AM liposome,BA-L)抗大鼠缺血再灌注引起的急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)作用,采取夹闭双侧肾动脉45min后再灌注一定时间致大鼠AKI模型,BA-L治疗组于再灌注开始时立即尾静脉注射BA-L.再灌注24h,检测各组大鼠血清Cr,BUN,Cys C,LDH水平与肾组织匀浆MDA含量和SOD活性,HE染色观察肾组织病理学变化.给予BA-L治疗后AKI大鼠血清Cr,BUN,Cys C,LDH及肾组织匀浆MDA含量显著降低,SOD活性增强,肾功能明显改善,HE染色显示BA-L明显减轻肾小管损伤.结果表明BA-L能显著减轻缺血再灌注引起的大鼠急性肾损伤.     

黄蜀葵花的SFE-CO2(乙醇)提取工艺及镇痛活性研究

利用以乙醇为夹带剂的CO2超临界萃取技术（SFE—CO2）萃取黄蜀葵花有效成分并进行工艺优化;研究萃取物镇痛活性．以液固比、压力、乙醇浓度、CO2流量、温度5个影响因素进行正交实验,优化工艺．用小鼠扭体法来证明其镇痛药理活性．最佳工艺条件为：液固比3．0mL／g,萃取压力30MPa,乙醇浓度90％,CO2流量4kg／h,萃取温度65℃,乙醇与粉末直接混合加入、萃取时间1．5h,浸膏得率为5．43％,黄酮得率为0．29％,萃取物的镇痛率达60．7％．用SFE—CO3（乙醇）萃取法得到的黄蜀葵花萃取物具有较好镇痛效果,该法是一种较优越的黄蜀葵花萃取方法．     

有机阴离子转运蛋白介导绿原酸肾小管分泌

利用狗肾近端小管上皮(MDCK)细胞单层模型比较丙磺舒、牛磺酸、青霉素钠等不同药物转运蛋白底物对双黄连口服液中绿原酸分泌的影响.MDCK细胞以1.5×104个细胞/孔接种于Millicell-CM culture plate inserts上培养,定期观察细胞形态,测定跨膜电阻值,待细胞单层达到一定致密程度后进行分泌实验.用M2e酶标仪测定单用双黄连口服液和合用丙磺舒、牛磺酸、青霉素钠时各组双黄连口服液中绿原酸的跨细胞转运情况,计算累积分泌量.实验结果表明,合用不同转运蛋白底物后,双黄连口服液中绿原酸的分泌量均明显降低.可见绿原酸经肾小管上皮细胞的分泌过程是一可饱和过程,有机阴离子转运蛋白部分参与绿原酸的分泌机制.     

BAPTA-AM抗D-GalN致L-O2细胞损伤作用

探讨了BAPTA-AM对D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的人胚肝细胞(L-02细胞)损伤的影响及其作用机制.加入不同浓度的BAPTA-AM 1h后,用D-GalN诱导L-02损伤,通过倒置光学显微镜观察,检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量,MTT法检测细胞活力,Annexin V-EGFP荧光染色统计细胞凋亡率,Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM测定细胞内游离钙浓度等方法,评价BAPTA-AM对D-GalN诱导的L-02细胞损伤的影响.实验表明BAPTA-AM能明显抑制D-GalN引起的L-02细胞培养液中的LDH、ALT、AST和MDA水平的升高,能抑制L-02细胞的凋亡和细胞内游离钙浓度的升高,能明显提高L-02细胞活力.而且BAPTA-AM的效价强度是甘利欣的数百倍.     

加热对金银花挥发油成分及抗炎症效果的影响

探讨了加热对金银花挥发油化学成分及其抗炎症作用的影响.使用CO2-SFE萃取挥发油后,80℃水浴5 h,得到加热后的金银花挥发油.通过GC-MS分析加热及未加热挥发油成分,采用小鼠耳肿胀模型比较两者抗急性炎症的效果.实验表明加热使挥发油的化学成份发生明显改变,相同成份的含量也显著不同,未加热挥发油抗炎效果极佳,最低有效剂量为0.4 mg/kg;热处理后挥发油无抗炎活性.因此加热能破坏金银花挥发油的有效成分.     

用PAMPA和MDCK模型研究川芎嗪的跨膜吸收机制

利用PAMPA(Parallel artificial membrane permeation assay)和狗肾小管上皮(MDCK)细胞模型探讨盐酸川芎嗪(TMPH)的跨膜吸收过程及其机制.用lecithin/n-dodecane溶液在Multi-Screen-IP板上建立PAMPA模型,将MDCK细胞以5×104个/cm2接种到Millicell-CM CulturePlate Inserts(Millicell CPI)上培养至细胞生长融合成完整单层,然后测定TMPH在PAMPA和MDCK单层细胞模型上的跨膜透过情况,计算累积透过量.实验结果表明:TMPH在PAMPA上有一定的被动扩散吸收,在MDCK模型上除存在一定量的被动扩散转运外,还有其它形式的转运机制如依赖于转运蛋白的易化扩散或主动转运等参与.