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米曲霉(Aspergillus oryzae)酸性蛋白酶与部分商品化的蛋白酶相比,具有对大豆蛋白水解效率高且水解产物苦味弱的特性。作者采用RT-PCR技术克隆获得酸性蛋白酶(Ap)基因,结合生物信息学手段,对Ap进行分析与预测。结果表明:Ap基因对密码子使用频率具有偏好性,特别是第3位密码子对GC碱基的使用频率高,达到74%;编码404个氨基酸残基。Ap属于胞外天冬氨酸蛋白酶。以海枣曲霉(A.phoenicis)的酸性蛋白酶(PDB code:1IBQ)作为模板同源建模结果可知,Ap分子至少能与2个Zn2+结合,内含1个二硫键、163个氢键、35个盐碱。该酶与1IBQ相比空间结构总体相似,部分重要位点(如flap环、转角和ψ-loops)的氨基酸残基较为保守。 相似文献
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为了对哈茨木霉酸性蛋白酶(Acid Protease,Ap)的性质研究,采用RT-PCR克隆了哈茨木霉Ap基因,转化至毕赤酵母GS115菌株中获得高效表达,然后对该重组蛋白酶(Recombinant Acid Protease,rAp)的酶学性质和水解大豆分离蛋白的效果进行测定。结果表明,重组毕赤酵母在500 mL三角瓶中诱导表达时,发酵液中rAp酶活力达到21.50 U/mL。该rAp为天冬氨酸蛋白酶,最适温度为55 ℃,在40 ℃处理120 min仍具有较强的热稳定性;最适pH值为2.50,在不同pH缓冲液中处理24 h后,pH值2.00~5.00具有较强稳定性。Cu2+、Ni2+和Mn2+能显著促进活性,相对酶活分别高达116.21%、113.79%和117.44%;而Fe2+、Fe3+、0.50% SDS和5.00% Trion X-100显著抑制活性,其相对酶活分别78.02%、79.26%、2.6%和13.19%。rAp和胃蛋白酶对大豆分离蛋白水解后,水解产物中蛋白相对含量分别为14.67%和3.64%,β-伴大豆球蛋白抗原性分别降低了30.01%和26.10%,球蛋白抗原性分别降低了22.37%和15.63%。从以上结果可知,rAp对大豆分离蛋白具有较强水解和降低抗原性的能力,具有潜在的应用开发价值。 相似文献
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南方山荷叶内生真菌与根际真菌的多样性及相关性探讨 总被引:7,自引:0,他引:7
对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定,得到25株内生真菌和19株根际真菌,其中内生真菌分属于5个科、8个属,根际真菌分属于5个科、6个属。对这两组真菌作比较分析,显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性,并对植物内生真菌的起源作了初步探讨。 相似文献
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测定了10种常用抗菌药物对市售酸奶中分离的57株保加利亚乳杆菌的MIC。结果表明,泰能、克林霉素、林可霉素、头孢唑啉和红霉素对乳杆菌的抗菌或活性最强,MIC90值为0.25~2.0mg/L,敏感率为96.5%~86.0%其次是阿莫西林、复方新诺明、青霉素,其MIC90值为2.0~4.0mg/L,敏感率为84.3%~78、9%。庆大霉素、氯霉素其MIC90值为4.0~16.0mg/L,敏感率为63.2%~59.7%。酸奶中的保加利亚乳标菌存在抗药性,其抗药性基因是否具转移性有待于进一步研究。 相似文献
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为了研究重组酱油曲霉碱性蛋白酶(rAp)水解大豆分离蛋白获得的大豆肽对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响,将诱导表达后分离纯化的rAp对大豆分离蛋白进行水解,然后将水解液灌胃小白鼠,测定其水解液对小鼠免疫器官指数、小鼠血清溶菌酶活性和小鼠血清抗菌活力等对小鼠免疫功能的影响;通过测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化... 相似文献
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为了研究自制的香菇酸乳对小白鼠免疫功能的影响,作者采用小白鼠的体重增长率、脏器指数、血清抗菌活性、溶血素含量、溶菌酶活性和巨噬细胞吞噬功能等检测方法,比较了自制的香菇酸乳与普通酸乳和生理盐水对小白鼠免疫功能的影响.结果表明,与生理盐水相比,香菇酸乳和普通酸乳能显著地提高小白鼠的体重增长率、脏器指数和血清抗菌活性,而两种酸乳之间差异不显著(香菇酸乳比普通酸乳更能显著地提高胸腺指数除外);香菇酸乳显著地提高小白鼠血清的溶血素和巨噬细胞的吞噬能力,但是普通酸乳和生理盐水不具有该功效;香菇酸乳和普通酸乳与生理盐水相比较均能显著地提高小白鼠血清溶菌酶活性,且香菇酸乳比普通酸乳提高溶菌酶活性的作用更显著. 相似文献
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对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定,得到25株内生真菌和19株根际真菌,其中内生真菌分属于5个科、8个属,根际真菌分属于5个科、6个属.对这两组真菌作比较分析,显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性,并对植物内生真菌的起源作了初步探讨. 相似文献
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