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目的 研究重组人成骨蛋白 -1(rhOP -1)在大肠杆菌中的克隆和非诱导表达。方法 利用RT -PCR技术 ,从正常胎儿肾组织总cDNA中扩增得到rhOP- 1成熟肽基因片段 ,再将rhOP- 1成熟肽基因克隆于原核融合表达载体pGEX- 4T- 2中 ,构建表达质粒pCCBC- OP- 1,并转化到大肠杆菌JM10 9(DE3)中 ,在发酵过程中不添加任何诱导剂。表达产物经SDS -PAGE分析。结果 扩增的目的基因序列与文献报道一致。表达的目的蛋白相对分子质量为 14 0 0 0 ,表达量达到菌体蛋白的 4 0 %。结论 克隆了人OP -1成熟肽基因 ,并实现了rhOP- 1的非诱导高效表达。 相似文献
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抗癌药物L—天冬酰胺酶摇瓶发酵研究 总被引:4,自引:0,他引:4
对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的摇瓶发酵进行了研究。在最适条件下发酵12h,可使产酶达到60u/ml。在培养其中添加0.01%硫酸亚铁和2%的W试剂可分别提高产酸能力15%和28%,该发酵过程是一个耗氧很大的过程。 相似文献
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以低聚异麦芽糖和三氯化铁为原料,以铁含量、产率和反应时间为指标,采用pH值过程控制来制备低聚异麦芽糖铁配合物,筛选出最佳的工艺条件;以粒径、Zeta电位、多分散指数、电导率来展现最佳工艺条件下反应过程的变化情况,并用红外光谱和差示扫描量热分析对最佳工艺条件下制备的产物进行表征。结果表明:当反应起始pH 12.1、反应过程pH值控制为11.5时,制得的低聚异麦芽糖铁配合物的铁含量可达43.16%,产率为96.35%,反应时间缩短为1 h,相比于未控制反应过程pH值的工艺(铁含量为37.14%,反应时间为2.7 h),铁含量提高了16.21%,反应时间缩短了62.96%,低聚异麦芽糖与Fe3+发生了配位反应,表明该工艺具有较高的应用价值。 相似文献
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建立邻菲罗啉法测定低聚异麦芽糖铁Ⅲ配合物铁含量,并对该方法的试验过程逐一进行条件优化,以确定最佳检测条件。消解因素试验显示酸的种类对消解没有选择性,但随着酸体积分数的增加,加热温度和时间的增大,消解越趋于完全。2mL以上的邻菲罗啉显色剂才能完全络合亚铁离子,且络合物可在pH 3~8条件下放置240 min。铁浓度在1~5mg/L时线性相关性良好,R~2=0.999 9;低聚异麦芽糖铁Ⅲ配合物铁含量分别为42.04%,40.43%,39.45%;平均回收率以及精密度试验结果均显示了该试验方法的精确性。 相似文献
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核酸酶P_1固定化研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用正交试验法对钛氯活化纤维素固定核酸酶P_1的工艺条件进行优化,获得了较优的固定化工艺条件,酶活力回收提高到84.5%,降解酵母RNA的5'-核苷酸生成率平均可达74.2%。 相似文献
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以低聚异麦芽糖和FeCl3为原料,以铁含量为指标,在单因素试验的基础上,采用星点设计-效应面法对反应时间、反应温度、起始pH值3 个主要因素进行优化。通过反应过程中产物的pH值、粒径、铁含量、Zeta电位、多分散指数、电导率的监测阐明低聚异麦芽糖铁的生成变化规律,并对产物的理化性质进行初步表征。结果表明:当糖铁质量比为1∶1.5时,低聚异麦芽糖铁的最佳制备工艺为反应温度88 ℃、反应时间2.7 h、反应起始pH 12.1,此条件下铁含量可达37.14%,通过过程监测阐明了低聚异麦芽糖铁的反应生成规律,为最优工艺的可信度提供了理论依据,且所得产物具有良好的理化性质,有望进一步开发成为新型的补铁剂。 相似文献
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液膜萃取技术在生物工程领域的应用研究进展 总被引:15,自引:3,他引:12
简单介绍了液膜萃取技术的基本原理和种类,结合最新研究进展,着重论述了在有机酸,氨基酸,抗生素,脂肪酸以及酶和酶反应等生物工程领域的应用。 相似文献
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大肠杆菌L- 天冬酰胺酶的分离纯化及其特性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立简单有效的L- 天冬酰胺酶分离纯化工艺,研究L-天冬酰胺酶的特性。方法 采用冷丙酮破壁处理,经稀碱液抽提、离子交换层析和亲和层析进行纯化。通过温度试验、pH试验、SDS-PAGE图谱、紫外吸收光谱等研究酶的特性。结果 建立了简单高效的纯化工艺,可使L-天冬酰胺酶的纯度达94.4%,比活为520u/mg蛋白,总收率为65.7%。L-天冬酰胺酶的相对分子质量分别为143900和166700,均为有抗癌活性的EC-2组分,在270nm有最大吸收。最适作用温度为40-50℃,最适作用州为8.0-9.0在40℃以下能保持稳定。结论建立了大肠杆菌L-天冬酰胺酶的分离纯化工艺,并研究了L-天冬酰胺酶的酶学特性。 相似文献